對氨基酸和多肽等小分子進行超濾

⑴ 將蛋白質和氨基酸分離所用的層析技術有哪些

膜分離技術，尤其是超濾膜技術已經用於蛋白質和蛋白質水解液中酶、多肽以及其他大內分子有機容物的分級分離。但是分子量相近、物化性質相似的多肽很難用超濾膜進行分離。


納濾膜分離技術則對多肽和氨基酸的分級分離具有明顯的優勢。納濾膜具有納米級孔徑，截留分子量在100-1000Da之間，主要特徵是表面帶(正或負)電荷，小分子多肽和氨基酸相對分子量在100-1000Da都是兩性電解質，分子中既帶有鹼性基團(氨基)，有帶有酸性基團(羥基)。在溶液pH等於它們的等電點時，分子呈現電中性，凈電荷為零;在pH偏離等電點時，分子成為帶負電荷或正電荷的離子。

⑵ 鱷魚小分子肽能和羊奶一起喝嗎

鱷魚肽是以鱷魚肉為原料，進行脫脂，復合梯度酶解，超濾膜過濾，噴霧乾燥。形成的一種將α－氨基酸以肽鏈連接在一起而形成的化合物粉劑（它也是蛋白質水解的中間產物。通常由10~100氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫多肽）。

鱷魚肽的功效和作用

【結構特徵】
鱷元肽很好的保留了鱷魚蛋白質中最具生物活性的肽段，含有人體所必需的氨基酸、對人體有很高營養價值的不飽和脂肪酸以及多種微量元素。

【結構作用】
（1）促新陳代謝：鱷元肽很好的保留了鱷魚蛋白質中最具生物活性的肽段，從而促進機體的正常新陳代謝，讓您遠離高血脂、高脂肪的危害。

（2）低抗原性，低敏性：鱷魚肽是把鱷魚中的蛋白質通過復合酶酶切技術，將大分子蛋白酶切成小分子肽段，破壞蛋白質表面的抗原結合位點，大大降低蛋白質本身的抗原性，因此達到低抗原性、低敏性的效果。

（3）營養豐富：鱷魚肽中蛋白質含量較高 ，其中含有人體所必需的氨基酸、對人體有很高營養價值的不飽和脂肪酸以及多種微量元素。

（4）抗衰老：在鱷魚體內有一種優化核酸（DNA和RNA的組成部分），這種物質能使核酸充滿活力，抗衰抗病能力增強，能同時激活體內的觸酶和SOD，從而延緩生命衰退。

【應用】
（1）臨床葯物：鱷魚的血液中含有一種超級縮氨酸，這種超級縮氨酸不但能識別人體內的癌細胞，並能快速攻破癌細胞膜，潛入癌細胞內部將其分解粉碎，使其無法復制。除此之外鱷魚中含有超豐富的物質，其具有良好的醫用價值。

（2）保健產品：鱷魚肝，具有補腦、生新血、去濕氣、滋陰養肝、明目之功，可以治療老年性白內障、視力減退等。

（3）美容產品：鱷魚尾膠，不但能滋補肝腎，益氣固本，增強細胞活力，而且能護膚養顏，使皮膚增加彈性，減少和延緩皺紋的早現，對過敏症也有滿意效果；鱷魚油，含有人體用於維持機體各種生理功能所必須的多種氨基酸，小分子多肽等營養物質。可促進腦細胞的發育，增值，調節腦細胞代謝。

【價值】
鱷魚具有極高的葯用價值。鱷魚肉，對高蛋白，對哮喘有較好的輔助治療；鱷魚卵，富有良性膽固醇，能消除血管內的脂肪，幫助血管暢通；鱷魚肝，具有補腦、生新血、去濕氣、滋陰養肝、明目之功，可以治療老年性白內障、視力減退等；鱷魚心，配合三七、丹參，養心安神、活血化瘀，並治療心絞痛、心肌缺氧、冠心病等；鱷魚甲，可舒肝解郁，調和脾胃，含有強有力的抗癌物質和防止癌腫瘤新生細胞的生長因子，這種因子的抑癌效果是其它爬行動物的數萬倍；鱷魚骨，含有大量的活性鈣和磷等，可治療、預防風濕骨痛，治療老年骨質疏鬆、小兒缺鈣等症；鱷魚尾膠，不但能滋補肝腎，益氣固本，增強細胞活力，而且能護膚養顏，使皮膚增加彈性，減少和延緩皺紋的早現，對過敏症也有滿意效果；鱷魚油，含有人體用於維持機體各種生理功能所必須的多種氨基酸，小分子多肽等營養物質。可促進腦細胞的發育，增值，調節腦細胞代謝。增強記憶，提高智力，改善語言及肢體運用功能障礙的作用，最終達到恢復腦功能級延緩大腦過早衰退的功能。除此之外，鱷魚的血液中含有一種超級縮氨酸，這種超級縮氨酸不但能識別人體內的癌細胞，並能快速攻破癌細胞膜，潛入癌細胞內部將其分解粉碎，使其無法復制。鱷魚具有特殊結構的生物鏈，可以使鱷魚終生不患癌症。

⑶ 針對於氨基酸、多肽及蛋白質的研究，費歇爾得出了哪些結論

1899年開始，費歇爾選擇了一個更難的課題，即對氨基酸、多肽及蛋白質的研究。蛋白質與人類的生活、生命關系更為密切。蛋白質的結構非常復雜，一個分子往往有幾千個原子。面對這一難題，費歇爾充滿信心地說：「關於有機合成的這項研究，由於先輩們留下了寶貴的經驗方法，在短短的62年內征服了尿素、脂肪、多種酸類、染料等，並進而征服了尿酸和糖類。從而可以斷言對任何活著的有機物體產物，我們都不必膽怯。」

對蛋白質的研究，費歇爾決定從它的基本組成氨基酸開始。為了認識所有的氨基酸，他發展和改進了許多分析方法，一一將各種氨基酸分離出來進行鑒別。由於他的辛勤勞動，人們認識了19種氨基酸。自然界中有幾十萬種蛋白質，而它們都是由20種氨基酸以不同的數量比例和不同的排列方式結合而成的。在進一步探索蛋白質的組成和結構及合成方法時，他發現將氨基酸聚合，首先得到的不是蛋白質，而是以他命名為多肽的一類化合物。將蛋白質進行分解，首先得到的也是多肽一類化合物。根據這一實驗事實，1902年他提出了蛋白質的多肽結構學說。他指出：蛋白質分子是許多氨基酸以肽鍵結合而成的長鏈高分子化合物。兩個氨基酸結合成二肽，三個氨基酸分子結合成三肽，多個氨基酸結合成多肽。隨後他合成了100多種多肽化合物，由簡單到復雜，開始只採用同一氨基酸使其鏈逐步增長，發展到採用多種氨基酸使其氨基酸雙鏈伸長。1907年，他製取由18種氨基酸分子組成的多肽，成為當時的重要科學新聞，並於1914年第一個合成了核苷酸。他又被提名為諾貝爾生理學及醫學獎候選人。由於積勞成疾，身體狀況惡化，也由於第一次世界大戰的爆發，費歇爾不得不中斷了這一重要的研究。

⑷ 氨基酸，多肽和蛋白質的區別與聯系

一、多肽與氨基酸的區別

結構不同：氨基酸是組成多肽和蛋白質的基本單位，兩個或則兩個以上氨基酸組成一個肽鏈，因此多肽的分子比氨基酸分子大。

吸收不同：科學家的研究發現人體吸收蛋白質主要形式是小分子活性多肽片段和游離氨基酸。相對氨基酸的吸收，以多肽形式具有易吸收、主動吸收、優先吸收、完全吸收、可做為信使等特點。

體內合成蛋白質：多肽在人體內合成蛋白質的利用率比氨基酸高，氨基酸合成蛋白質須要將氨基酸先合成為多肽短鏈，然後再裝配成蛋白質。

數量不同：人體內氨基酸只有20種，由於多肽肽鏈長度、結構有多種結構和變化，20種氨基酸能合成無數種多肽。

功能不同：單一氨基酸的功能需要組合成多肽，才能表達出相應的功能，蛋白質的功能體現也是以活性多肽片段為基本功能單位。

二、多肽與蛋白質的聯系

結構：將50個以上氨基酸構成的多肽鏈稱為蛋白質，因此，多肽相對蛋白質比較具有分子量小、肽鍵的數目少、肽鏈短的特點;蛋白質的分子量大、肽鍵的數目多、肽鏈長、具有獨特的三維立體結構。

功能：蛋白質的生理功能主要由組成蛋白質的活性多肽片段來完成，蛋白質的功能即其中所含的特異性活性多肽片段的功能體現，因此科學家們稱「肽是生命的統帥，生命是肽的反應體系」。

營養：多肽的營養優於蛋白質，因為蛋白質要分解成多肽才能吸收，因此人體蛋白質的吸收率不高。多肽具有完全吸收、優先吸收和主動吸收等特點。

(4)對氨基酸和多肽等小分子進行超濾擴展閱讀：

小分子復合肽和氨基酸的區別：

（1）低耗，與氨基酸比較，吸收具有低耗或不消耗能量的特點，肽通過十二指腸吸收後，直接進入血液，將自身能量輸送到人體各個部位

（2）氨基酸只有20種，功效可數，而肽以氨基酸為底物，可合成上百上千種，肽屬於降解的小分子蛋白質，含氨基酸基團，屬於原料類產品。

（3）較氨基酸吸收快速，以完整的形式被機體吸收。主動吸收，氨基酸屬於被動吸收，肽吸收較氨基酸快，而且具有不飽和的特點。

⑸ 跪求實驗方案急。關於植物小分子多肽的提取分離和分析 最好用到高效液相提取 分析的

多肽類化合物廣泛存在於自然界中，其中對具有一定生物活性的多肽的研究，一直是葯物開發的一個主要方向。生物體內已知的活性多肽主要是從內分泌腺組織器官、分泌細胞和體液中產生或獲得的，生命活動中的細胞分化、神經激素遞質調節、腫瘤病變、免疫調節等均與活性多肽密切相關。隨著現代科技的飛速發展，從天然產物中獲得肽類物質的手段也不斷得到提高。一些新方法、新思路的應用。不斷有新的肽類物質被發現應用於防病治病之中。本文介紹了近幾年肽類物質分離、分析的主要方法研究進展。
1 分離方法
採取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質的性質決定。對蛋白質、多肽提取分離常用的方法包括：鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉澱法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化，同時上述這些方法也是蛋白、多肽類物質分析中常用的手段，如層析、叫泳等。
1.1 高效液相色譜（HPLC）
HPLC的出現為肽類物質的分離提供了有利的方法手段，因為蛋白質、多肽的HPLC應用與其它化合物相比，在適宜的色譜條件下不僅可以在短時間內完成分離目的，更重要的是HPLC能在制備規模上生產具有生物活性的多肽。因此在尋找多肽類物質分離制備的最佳條件上，不少學者做了大量的工作。如何保持多肽活性、如何選擇固定相材料、洗脫液種類、如何分析測定都是目前研究的內容。
1．1．1 反相高效液相色譜（RP-HPLC）
結果與保留值之間的關系：利用RP-HPLC分離多肽首先得確定不同結構的多肽在柱上的保留情況。為了獲得一系列的保留系數，Wilce等利用多線性回歸方法對2106種肽的保留性質與結構進行分析，得出了不同氨基酸組成對保留系數影響的關系，其中極性氨基酸殘基在2～20氨基酸組成的肽中，可減少在柱上的保留時間；在10～60氨基酸組成的肽中，非極性氨基酸較多也可減少在柱上的保留時間，而含5～25個氨基酸的小肽中，非極性氨基酸增加可延長在柱上的保留時間。同時有不少文獻報道了肽鏈長度、氨基酸組成、溫度等條件對保留情況的影響，並利用計算機處理分析得到每種多肽的分離提取的最佳條件。
肽圖分析（Peptide Mapping）：肽圖分析是根據蛋白質、多肽的分子量大小以及氨基酸組成特點，使用專一性較強的蛋白水解酶[一般未肽鏈內切酶（endopeptidase）]作用於特殊的肽鏈位點將多肽裂解成小片斷，通過一定的分離檢測手段形成特徵性指紋圖譜，肽圖分析對多肽結構研究合特性鑒別具有重要意義。利用胰蛋白酶能特意性作用於Arg和Lys羧基端的肽鏈的性質，通過RP-HPLC法採用C18柱檢測了重組人生長激素特徵性胰肽圖譜。同時胰島素的肽圖經V8酶專一裂解也製得，並可鑒別僅相差一個氨基酸殘疾的不同種屬來源的胰島素。人類腫瘤壞死因子的單克隆抗體結構也應用酶解法及在線分析技術確定了肽圖，便於鑒定分析。此項技術已經在新葯開發中得到廣泛應用。
1.1.2 疏水作用色譜（Hydrophobic interaction chromatogrphy，HIC）
HIC是利用多肽中含有疏水基因，可與固定相之間產生疏水作用而達到分離分析的目的，其比RP-GPLC具有較少使多肽變性的特點。利用GIC分離生產激素（GH）產品的結構與活性比EP-GPLC分離的要穩定，活性較穩定。Geng等利用HIC柱的低變性特點，將大腸桿菌表達出的經鹽酸胍乙啶變性得到人重組干擾素-γ。通過HIC柱純化、折疊出高生物活性的產品。不同人尿表皮生長因子（EGF）也利用HIC純化到了，均具有良好的生物活性。HIC可將未經離子交換柱的樣品純化。而RP-HPLC則不能達到這一要求。
1.1.3 分子排阻色譜（Sizs-Exclusion chromatogrphy，SEC）
SEC是利用多肽分子大小、形狀差異來分離純化多肽物質，特別對一些較大的聚集態的分子更為方便，如人重組生長激素（hgH）的分離，不同結構、構型的GH在SEC柱上分離行為完全不同，從而可分離不同構型或在氨基酸序列上有微小差異的變異體，利用SEC研究修飾化的PEG的分離方法，此PEC具有半衰期長、作用強的特點。一些分子量較大的肽或蛋白均可利用此法分離分析。
1．1．4離子交換色譜（Iron-Exchange chromatography,IEXC）
IEXC可在中性條件下，利用多肽的帶電性不同分離純化具有生物活性的多肽。其可分為陽離子柱與陰離子柱兩大類，還有一些新型樹脂，如大孔型樹脂、均孔型樹脂、離子交換纖維素、葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠樹脂等。在多肽類物質的分離分析研究中，對多肽的性質、洗脫劑、洗脫條件的研究較多，不同的多肽分離條件有所不同，特別是洗脫劑的離子強度、鹽濃度等對純化影響較大。Wu等報道利用離子交換柱層析法，探討分離牛碳酸酐異構體和牛血清白蛋白、雞血清白蛋白酶的提取條件，獲得了有價值的數據供今後此類物質分離研究。
1．1．5膜蛋白色譜（Chromatography of Membrane Protein,CMP）
CMP+分離強蔬水性蛋白、多肽混合物的層析系統，一般有去垢劑（如SDS）溶解膜蛋白後形成SDS-融膜蛋白，並由羥基磷灰石為固定相的柱子分離純化。羥基磷灰石柱具有陰離子磷酸基團（P-端），又具有陽離子鈣（C-端），與固定相結合主要決定於膜蛋白的大小、SDS結合量有關。利用原子散射法研究cAMP的分離機制發現，樣品與SDS結合後在離子交換柱上存在SDS分子、帶電荷氨基酸與固定相中帶電離子間的交換，從而達到分級分離的目的。
1．1．6高效置換色譜（High-Performance Displacement Chromatography,HPDC）
HPDC是利用小分子高效置換劑來交換色譜柱上的樣品，從而達到分離的目的。它具有分離組分含量較少成分的特性。利用HPDC鑒定分離了低於總量1%組分的活性人重組生長激素（rHG ）。在研究非毒性交換劑時Jayarama發現硫酸化葡萄糖（Detran Sulfate，DS）是對β乳球蛋白A和B的良好置換劑，一般DS的相對分子質量為1×104和4×104最宜。研究表明置換劑的相對分子質量越低，越易於與固定相結合，因此在分離相對分子質量小的多肽時，需要更小的置換劑才能將其置換純化出來。
1.1.7 灌注層析（Perfusion Chromatography，PC）
PC是一種基於分子篩原理與高速流動的流動相的層析分離方法，固定相孔徑大小及流動相速度直接影響分離效果。試驗證明其在生產、制備過程中具有低投入、高產出的特性。目前市場上可供應的PC固定相種類較多，適合於不同分子量的多肽分離使用。
1.2 親和層析（Affinity Chromatography，AC）
AC是利用連接在固定相基質上的配基與可以和其特異性產生作用的配體之間的特異親和性而分離物質的層析方法。自1968年Cuatrecasas提出親和層析概念以來，在尋找特異親和作用物質上發現了許多組合，如抗原-抗體、酶-催化底物、凝集素-多糖、寡核苷酸與其互補鏈等等。對多肽類物質分離目前主要應用其單抗或生物模擬配基與其親和，這些配基由天然的，也有根據其結構人工合成的。Patel等人利用一系列親和柱分離純化到了組織血漿纖維蛋白酶原激活劑蛋白多肽。
固定金屬親和層析（Immobilized Metal Affinity Chromatography.LMAC）是近年來發展起來的一種親和方法。其固定相基質上鰲合了一些金屬離子，如Cu2+、Ni2+、Fe3+等，此柱可通過配為鍵鰲合側鏈含有Lys、Met、Asp、Arg、Tyr、Glu和His的多肽，特別是肽序列中含有His-X-X-X-His的結構最易結合到金屬離子親和柱上，純化效果較好。其中胰島素樣生長因子（Insylin Like Growth Factor，IGF）、二氫葉還原酶融合蛋白等均用此方法分離到純度較高的產品。
Chaiken等人報道了另一種親和層析方法，利用反義DNA表達產生，其與正鏈DNA表達產生的肽或蛋白具有一定的親和性，如Arg加壓素受體復合物，已用此法分離得到。DNA與蛋白、多肽復合物之間的作用也是生物親和中常用的方法。將人工合成的寡核苷酸結合在固定相基質上，將樣品蛋白或多肽從柱中流過，與之結合可達到分離特定結構多肽的目的。
1.3 毛細管電泳（Capillary electrophoresis，CE）--分離分析方法
CE是在傳統的電泳技術基礎上於本世紀60年代末由Hjerten發明的，其利用小的毛細管代替傳統的大電泳槽，使電泳效率提高了幾十倍。此技術從80年代以來發展迅速，是生物化學分析工作者與生化學家分離、定性多肽與蛋白類物質的有利工具。CE根據應用原理不同可分為以下幾種；毛細管區帶電泳Capillary Zone electrophoresis，CZE）、毛細管等電聚焦電泳（Capillary Isoeletric Focusing，CIEF）毛細管凝膠電泳（CapillaryGelElectrophoresis，CGE）和膠束電動毛細管層析（Micellar Electokinetic Electrophoresis Chromatorgraphy,MECC）等。
1.3.1 毛細管區帶電泳（Capillary Zone Electrophoresis，CZE）
CZE分離多肽類物質主要是依據不同組分中的化合物所帶電性決定，比傳統凝膠電泳更准確。目前存在於CZE分離分析多肽物質的主要問題是天然蛋白或肽易與毛細管硅膠柱上的硅醇發生反應，影響峰形與電泳時間，針對這些問題不少學者做了大量實驗進行改進，如調節電池泳液的PH值，使與硅醇反應的極性基團減少；改進毛細管柱材料的組成，針對多肽性質的不同採取不同的CZE方法研究分離5個含9個氨基酸殘基的小肽，確定了小肽分析的基本條件，即在低PH條件下，緩沖液中含有一定濃度的金屬離子如Zn2+等，此時分離速度快而且准確。
1．3．2細管等電聚電泳（Capillary Isleletric Focusing,CIEF）
由於不同的蛋白、多肽的等電點（PI）不同，因此在具有不同pH梯度的電泳槽中，其可在等電點pH條件下聚集沉澱下來，而與其他肽類分離開來。CIEF在分離、分析混合多肽物質中應用不多，主要應用與不同來源的多肽異構體之間的分離，如對rHG不同異構體分離。由於在CIEF柱表面覆蓋物的不穩定性限制了此法的廣泛應用。
1．3. 3毛細管凝膠電泳 (Capillary Gel Electrophoresis,CGE)
CGE是基於分子篩原理，經十二烷基磺酸鈉（SDS）處理的蛋白或多肽在電泳過程中主要靠分子形狀、分子量不同而分離。目前，又有一種非交聯歡、線性、疏水多聚凝膠柱被用於多肽物質的分離分析，此電泳法適於含疏水側鏈較多的肽分離，這種凝膠易於灌注，使用壽命長，性質較為穩定。
1．3．4膠束電動毛細管層析（Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC）
MECC的原理是在電泳液中加入表面活性劑，如SDS，使一些中性分子帶相同電荷分子得以分離。特別對一些小分子肽，陰離子、陽離子表面活性劑的應用都可使之形成帶有一定電荷的膠束，從而得到很好的分離效果。有文獻報道在電解液中加入環糊精等物質，可使用權含疏水結構組分的多肽選擇性與環糊精的環孔作用，從而利用疏水作用使多肽得到分離。
1．4多肽蛋白質分離工程的系統應用
以上提到的分離多肽的技術在實際應用過程中多相互結合，根據分離多肽性質的不同，採用不同的分離手段。特別是後基因組時代，對於蛋白質組深入的研究，人們對於分離多肽及蛋白質的手段不斷改進，綜合利用了蛋白質和多肽的各種性質，採用包括前面提到的常規蛋白多肽提取方法，同時利用了高效液相色譜，毛細管電泳，2-D電泳等手段分離得到細胞或組織中盡可能多的蛋白多肽。在蛋白質組學研究中系統應用蛋白和多肽分離鑒定的技術在此研究中即是分離手段也是分析方法之一。特別是以下提到的質譜技術的發展，大大的提高了蛋白多肽類物質的分析鑒定的效率。
2 分析方法
2．1 質譜分析（Mass Spectrometry, MS）
MS在蛋白、多肽分析中已經得到了廣泛應用，特別是在分離純化後的在線分析中，MS的高敏性、快速性特別適合多肽物質分析鑒定。其中連續流快原子轟擊質譜（Continuous-Flow Fast Atom Bombardment, cf-FAB）和電霧離子化質譜（Electrospray Ionization, EIS）是近幾年發展起來的新方法。
2．1．1連續流快原子轟擊質譜（Continuous-Flow Fast Atom Bombardment, cf-FAB）
cf-FAB是一種弱離子化技術，可將肽類或小分子量蛋白離子化成MH+或（M-H）形式。主要應用於肽類的分離檢測，其具有中等解析度，精確度大於+0.2amu，流速一般在0.5-1.5μl·Ml-1。在測定使流動相需加0.5%-10%基質如甘油和高有機溶劑成分，使樣品在檢測探針處達到敏感化。cf-FAB常與HPLC、CEZ等方法結合使用達分離分析的目的，許多多肽的cf-FAB分析方法已經建立，並得到很好的應用。如Hideaki等利用此法研究L-Pro、L-Ala的四肽化合物系列。證明L-Pro在保持小肽構相穩定性。連接分子方面具有重要意義。
2.1.2 電霧離子化質譜（Electrospray Ionozation，EIS）
EIS可產生多價離子化的蛋白或多肽，允許相對分子質量達1×105蛋白進行分析，解析度在1500-2000amu。精確度在0.01%左右。EIS更適合相對分子質量大的蛋白質的在線分析，且需要氣化或有機溶劑使樣品敏感化。利用EIS與HPLC聯合分離分析GH和血紅蛋白均獲成功，其也可與CEZ聯合應用。
2.1.3 基質輔助激光解析/離子化-飛行時間質譜（Matrix-associated laser disso-ciation/ionization time of flight mass spectrmtry，MALDI-TOF MS）
MALDI-TOF是目前蛋白質鑒定中精確測定測定分子質量的手段，特別適合對混合蛋白多肽類物質的相對分子質量的測定，靈敏度和解析度均較高。它是目前蛋白質組學研究的必備工具。同時結合液相色譜的聯用技術可以高效率的鑒定多肽物質。特別是當各種原理的質譜技術串聯應用時，不但可以得到多肽的相對分子質量信息，還可以測定它的序列結構，此項技術將在未來蛋白質組學研究中起到決定性作用。
2.2 核磁共振(Nuclear Magnetic resonance，NMR)
NMR因圖譜信號的純數字化、過度的重疊范圍過寬（由於相對分子質量太大）核信號弱等原因，在蛋白、多肽物質的分析中應用一直不多。隨著二維、三維以及四維NMR的應用，分子生物學、計算機處理技術的發展，使NMR逐漸成為此類物質分析的主要方法之一。NMR可用於確定氨基酸序列、定量混合物中的各組分組成含量等分析中。但要應用於蛋白質分析中仍有許多問題需要解決，例如，如何使分子量大的蛋白質有特定的形狀而便於定量與定性分析，如何減少數據處理的時間問題等。這些問題多有不少學者在進行研究。雖然在蛋白質分析中應用較少，NMR在分析分子中含少於30個氨基酸的小肽時是非常有用的，可以克服上述蛋白質分析中的缺點而達到快速准確分析的目的。
2.3 其他
除上述方法之外，氨基酸組成分析、氨基酸序列分析、場解析質譜、IR、UV光譜、CD、圓而色譜、生物鑒定法、放射性同位素標記法及免疫學方法等都已應用於多肽類物質的結果鑒定、分析檢測之中。
以上簡要的介紹了近幾年多肽物質分離、分析的常用方法及最新研究方向。隨著科學技術水平的不斷發展，會有許多更新的分離分析手段不斷涌現，因此這一領域的研究具有廣闊的前景。 應用SDS-PAGE顯示小分子多肽
SDS-PAGE在分離、鑒定和純化蛋白質方面有著廣泛應用，其有效分離范圍取決於聚丙烯醯胺的濃度和交聯度，其孔徑隨著雙丙烯醯胺與丙烯醯胺比率的增加而減小，比率接近於1：20時，孔徑達到最小值。分子量低於10kD的小分子肽類，即使用較高濃度的聚丙烯醯胺凝膠的SDS-PAGE也不能完全分離，或是顯不出色，或是顯帶較弱，帶型彌散。且分子量越小，效果也越差。
為了能在SDS-PAGE上顯示測定小分子量的多肽，通常採取兩種方法：一是增加凝膠的濃度和交聯度，在制膠時加入一些可以降低聚丙烯醯胺凝膠網限孔徑的溶質分子，使用尿素、甘油或蔗糖等物質；二是選擇緩沖液中的拖尾離子的種類和濃度以達到改善多肽的分離效果。
操作步驟
1．電泳緩沖液的配製如下表所示
緩沖液Tris
(mol/L)Tricine
(mol/L)pHSDS
(%)
陽極緩沖液
陰極緩沖液
膠緩沖液0.2
0.1
3.0—
0.1
—8.9*
8.25**
8.4*—
0.1
0.3
* 用HCl調pH
** pH約為8.25

2．丙烯醯胺貯存液的配製
單丙-雙丙混合物單丙的百分數雙丙的百分數
49.5% T, 3%C
49.5% T, 6%C48
46.51.5
3.0
T：丙烯醯胺的總濃度
C：交聯度

3．膠的制備，與一般SDS-PAGE相似，按下表配製分離膠和濃縮膠
組 份分離膠
16% T，6%C濃縮膠
6% T，3%C
49.5% T, 3%C丙烯醯胺溶液（ml）
49.5% T, 6%C 丙烯醯胺溶液（ml）
膠緩沖液（ml）
脲（g）[甘油（ml）]
水（ml）
10%過硫酸銨（μl）
TEMED（μl）
總體積（ml）—
3.3
3.3
3.6[2.4]
1
40
4.0
10.040.48
—
1.00
—
1.50
25
2.5
3.03
4．樣品緩沖液
4% SDS
12%甘油
50mmol/L Tris
2%巰基乙醇
0.01% Serva blue
多肽樣品與樣品緩沖液混合沸煮2min（或40℃溫浴30min）。
5．將灌膠的玻璃板固定在電泳裝置上，用1%瓊脂糖封邊，倒入陰極緩沖液，依次加樣。
6．將電泳裝置放入電泳槽內，倒入陽極緩沖液，將正負極與電泳儀相接，恆電壓50~60V，待指示劑進入分離膠後，電壓可升至70~90V，恆壓約3h待指示劑走出凝膠下緣停止電泳。
7．染色、脫色及膠的保存同SDS-PAGE。

⑹ 有能夠根據多肽序列和結構模擬成小分子化合物的方法嗎

預測結構主要是根據序列的特點。對於現有的科技來說，還是無法准確預測多內肽容的二級結構，畢竟肽鏈是經過加工後形成的，不是完全依照分子間相互作用和力的大小形成穩定的構象。所以，對肽鏈二級結構的預測多數是依靠通過多肽、氨基酸序列的和已知蛋白的同源性來判斷的，功能相似、同源性高則結構就比較相似。另外，通過氨基酸自身的特點，包括形成螺旋或者折疊的能力，還有通過紅外、拉曼光譜則能有效檢測特徵二級結構的存在。然後確定多肽的結構特點。

⑺ 多肽氨基酸測序最好的方法PITG法是指什麼

氨基酸測序分為N端測序和C端測序，原理是用氨肽酶（N端測序法）或羧肽酶（C端測序法）專將肽鏈從一端依屬次切下，並在一段時間內檢測切下的氨基酸的種類（時間過長則會出現多種氨基酸），並且重復該過程。
必需氨基酸有9種：甲硫氨酸、纈氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、色氨酸、蘇氨酸（可以用「甲借來一本兩色書」來幫助記憶，雖然「纈氨酸」的「纈」正確讀音是「鞋」而不是「傑」）。

⑻ 超濾脫鹽 利用超濾技術是否能對一些液態食品進行脫鹽，並同時盡量保持其中的氨基酸，進而保持風味。

氨基酸的分子量相對於鹽類是比較大，但是用通常超濾（幾萬分子量）去除效版果不好。當然權如果能買到截留分子量接近氨基酸的低分子量的超濾也可以，但到幾千級別的超濾通常很貴，何況氨基酸的平均分子量大概在110左右呢。
你說的東西要看原水的成分再採用具體的工藝。例如如果大顆粒（幾微米以上的）多，可以過微濾膜，然後加一級超濾（幾萬到幾十萬分子量的）去除膠體大分子，例如蛋白或多肽，達到NF（納濾）級別進水要求後，過一級NF，NF通常截留不住1價的鹽分而能截留住2價的鹽或更大的分子，你保留截留成分（濃水部分）就可以了。
RO是1價也能截留的，你這上面可能用不著。。

⑼ 小分子活性多肽是什麼呢

由2至4個氨基酸組成的就叫做「小分子肽」。

兩個以上的氨基酸之間以肽鍵相連，形成的「氨基鏈」或「氨基酸串」就叫做肽。其中，10個以上氨基酸組成的肽被稱為「多肽」，而由2至9個氨基酸組成的就叫做「寡肽」。

活性肽主要控制人體的生長、發育、免疫調節和新陳代謝，它在人體處於一種平衡狀態，若活性肽減少後，人體的機能發生重要變化。

肽在人體起著多種激素的作用，它是人體多種激素的底物，也是多種激素的來源和源泉。

人體的生長發育和許多因素有關，特別是人體蛋白質，人體蛋白質又是以肽的形式存在的，人體生長發育首要的物質基礎是肽。

人體生長發育離不開激素，而激素也是肽的一種表現形式。因此，人體生長發育無論從哪個方面講，都離不開肽，肽在人體的生長發育中起著重要作用。

(9)對氨基酸和多肽等小分子進行超濾擴展閱讀：

勝肽是屬於降解的小分子膠原蛋白，含氨基酸基團，屬於原料類產品。勝肽也是人體中原本就存在的成分，是一種氨基酸形成的鏈狀結構。我們所熟悉的蛋白質，就是一種多勝肽鏈。因氨基酸的組份和順序各不相同而組成不同的肽。

由兩個氨基酸以肽鍵相連的化合物稱為「二肽」，以此類推，有9個氨基酸組成的化合物稱為「九肽」，由多個氨基酸（一般為50個，也有稱100個的）組成的肽則稱為多肽，組成多肽的氨基酸單元稱為「氨基酸殘基」。肽鍵將氨基酸與氨基酸頭尾相連。

微生物發酵法的生產工藝技術主要是通過現代微生物發酵技術將大分子球蛋白轉化為小分子肽，通過控制微生物的代謝和發酵條件可生產不同氨基酸排序和分子量不同的肽。在發酵過程中，產生的游離氨基酸被微生物再次吸收利用，對微生物的代謝不會產生反饋抑制。

通過微生物的代謝作用，對氨基酸和小肽進行移接和重排，對某些肽基團進行修飾和重組。例如以大豆豆粕為原料經過微生物發酵法生產的大豆肽，改變了大豆蛋白質固有的氨基酸序列，修飾了肽的疏水性氨基酸末端。

使大豆肽沒有苦味，活性更高，並賦予大豆肽一些生物活性功能，屬於生物工程的高新技術范圍、科技含量高、在食品行業、發酵工業、飼料行業、制葯行業、化妝品行業和植物營養促進劑等行業中都能應用。具有十分廣泛的用途和非常廣闊的開發應用前景。

⑽ 蛋白質在消化道內被分解為氨基酸和小分子短肽，為什麼這樣做有什麼好處

蛋白質是大分子物質，不能被小腸上皮細胞吸收。在胃和小腸中被蛋白質酶分解為多肽，再在小腸中被肽酶分解為氨基酸，這樣小腸上皮細胞就能以主動運輸的方式吸收了。