1. 蘇丹紅染液一般如何配製
【巴氏染液配方】GILLS蘇木素(1000ML)結晶水蘇木素 2.36G硫酸鋁 17.6G碘酸鈉 0.2G蒸餾水 730ML乙二醇 250ML乙酸(冰醋酸) 20ML 混勻磁性攪拌1小時以上桔黃G6桔黃G 2.5G蒸餾水 25ML無水乙醇 500ML桔黃不易溶解,因此加熱使桔黃充分溶 解方可使用:無水乙醇易揮發分多次加入;配好後需要過濾. EA50:3%亮綠溶液 5ML (3克亮綠: 100ML蒸餾水)20%伊紅溶液 10ML (20克伊紅Y(醇溶): 100ML蒸餾水) 95%酒精 350ML甲醇 125 ML 磷鎢酸 1G乙酸 10ML EA50染液配好後使 用濾紙檢查;伊紅Y不易溶解,配製伊紅溶液時充分攪拌使其完全溶解。鹼溶液;飽和碳酸鋰加蒸餾水,取上清液,加入適量蒸餾水。附染色注意事項: 1 正確配置染液,蘇木素染液易生成沉澱,使用過程中應定期過濾,否則沉澱附著在細胞表面有礙觀察。2.嚴格控制染色時間,使用計時器。3.採用正確的漂洗方法忌用力過猛或漂洗不凈,流水沖洗時 避免直接沖擊標本 。4.徹底脫水,使用二甲苯作細胞透明化處理,保證鏡下細胞結構清晰。脫水是否徹底,直接關繫到鏡細胞結構的清晰程度,最為生要。此步驟常被一般操作者所忽視,結果所得塗片在高倍鏡下核內一片模糊,有礙觀察,同時標本 褪色也快。因此脫水應嚴格操作,盡量避免將水分帶入高濃度乙醇中。由無水乙醇入二甲苯時,如出現白色乳狀液,表明脫不盡,應將塗片退入無水乙醇中重新脫水。5.染色達到標准:核的結構清晰;秀明度高;分色恰當。6.即時更換各種染液,酸鹼液,灑精和二甲苯等試劑。
2. 2%乙醇蘇木精是怎麼配置的
1.傳統方法:(1)Harris蘇木素
配方:
蘇木素 1g 無水乙醇 10ml
蒸餾水 200 ml 鉀明礬 20g
HgO 0.5g
先將蘇木素溶於無水乙醇中,備用。把明礬 放入蒸餾水,加熱溶解,再加入備用的蘇木素,煮沸2分鍾,先假如少量的氧化貢,防止氧化過程中蘇木素外淤,玻璃攪拌,然後,邊攪拌邊加入氧化汞。加完後,立即遺至冰水中,加速其冷卻,靜置一夜後,過濾。用前以5%的比例加入冰醋酸。如配好後時間較長,冰醋酸的量可適當多加一點。冰醋酸可直接影響蘇木素的著色能力和清晰度。加少了,會造成核漿共染,背景不幹凈。加多了,核著色能力下降。此液可放置3月至半年左右,視氣溫而定。使用期要看染色的切片量來定,以1天100張片量,可使用半個月左右。
2.改良的蘇木精染色液配製方法
蘇木精染液配製方法雖然很多,但都有其局限性,大多醫院沿用哈瑞氏蘇木精染液,此液優點是染色力強,配後即可使用。其缺點是配製較麻煩,危險性較高,須具有豐富經驗技師配製。加入黃色氧化汞時如過快則反應過於激烈,可使液體溢出,有時可呈噴射狀,容易使操作者受到傷害。溫度過低時,蘇木精氧化不充分,會影響其染色力,須適當地掌握反應程度。極易形成沉澱、結晶和氧化膜,尤其室溫較低時,更加顯著,需經常過濾。使用及保存時間較短,一般數月即失效,如染色較多很快失去染色力,現蘇木精價格比從前增長了幾十倍,造成極大的浪費。
1 材料與方法
1.1 材料 蘇木精2g,無水乙醇250ml,硫酸鋁10g,蒸餾 水750ml,碘酸鈉0.5g,檸檬酸1g。
1.2 方法 將蘇木精溶於無水乙醇,將硫酸鋁溶於水,兩液混合加熱煮沸2min,加入碘酸鈉及檸檬酸。
2 結果
經比較,此液存放時間長,染色力保持時間長,染色效果好。
3 討論
用硫酸鋁替代鉀明礬染液久放也不會產生沉澱、結晶,不用過濾即可使用。此液存放時間長,染色力保持時間長,經過我室比較,使用時間可比哈瑞氏蘇木精染液長一倍。1g蘇木精配置的染液是哈瑞氏蘇木精染液的兩倍,更加經濟實用。
此液染色效果好,染色時間3~8min,特別是染色質顯色清晰,但應注意一些染色技巧,配置鹽酸酒精分化液時,濃度稍低,一般控制在0.8%左右,分化時間稍短,應在30s之內。氨水配製成1%,返藍時間要較長,一般控制在1~2min,充分水洗後再進行下面的染色。
以上內容僅供參考!希望對你有幫助!!
3. 蘇木素的簡介
蘇木素和伊紅在組織學上被經常使用,與碘液不同,這是一種永久染色劑。其他常用的含有蘇木素的染色劑有磷鎢酸蘇木素染色劑,也就是磷鎢酸與蘇木素的混合物。蘇木素染色劑經常為組織的研究使用。 明礬和三價鐵鹽常常被用作媒染劑,展示核和細胞質結構。這些媒染劑的原理都是形成媒染劑-染料-組織復合體,從而顯示顏色。使用的鹽不同顏色也不同: 當用鐵鹽呈現深藍色顏色沉澱,用鋁鹽通常顯示藍白色。下面分別介紹鋁蘇木素溶液和鐵蘇木素溶液。
4. 蘇木素有毒嗎
蘇木是臨床常用的中葯,能夠行血,破瘀,消腫,止痛。臨床常用於治婦人血氣心腹痛,經閉,產後瘀血脹痛喘急,痢疾,破傷風,癰腫,撲損瘀滯作痛等等。沒有毒的。
5. 蘇木素名詞解釋
蘇木素是從洋蘇木中提取的一種染色劑,它在被氧化後生成蘇木精,同媒染劑(常用的是三價的鐵或鋁的鹽)一起使用,能夠使細胞核染色。蘇木素是一種鹼性染料。
來自網路:
http://ke..com/link?url=_rFAd7vnaTcSgcRIhEZLYojL0wlR_sK
6. 蘇木素的鐵溶液
常用的兩種鐵蘇木素溶液有Weigert氏溶液(使用氯化鐵銨作為媒染劑)和Heidenhain氏溶液(使用硫酸鐵銨作為媒染劑)。它們都是活潑的氧化劑,不能長期保存。鐵蘇木精溶液能夠用於幾乎所有的固定劑,而且如果用於媒染的過量的鐵離子都被沖洗凈的話,能夠永久著色。在酒精中浸泡多年的組織往往不易著色,這時就可以選擇鐵蘇木素染色,效果很好。鐵蘇木素溶液會把細胞核染成灰黑色,常常用於顯微照相。 Weigert氏蘇木素配方是實驗室使用的標准鐵蘇木素溶液,特別是在染色顯示肌纖維時。當使用的生物材料或已經用過的試劑中含有酸時,最適合使用的就是Weigert氏蘇木素溶液,因為這時所有的鋁蘇木素溶液染細胞核時都會褪色。
A液
1g蘇木素
100ml無水乙醇
B液
4ml30%無水氯化鐵溶液
1ml濃鹽酸
100ml蒸餾水
在酒精中溶解蘇木素,微熱。在另一個容器中混合鹽酸、氯化鐵和蒸餾水。兩種溶液都很穩定,可以放置6個星期不變質。染色前,把兩溶液等量混合,得到深黑色混合液,即可染色。混合液可以保存1~2天。 Heidenhain氏蘇木素配方用於細胞學染色觀察,特別是用於一些較薄的組織的回染。它可以用於細胞核的染色觀察,能夠清楚地顯示染色體、染色質以及細胞質中線粒體的位置。此外,還可以使髓鞘染色。
染色劑:
0.5 g 蘇木素
10 ml 95%乙醇
90 ml蒸餾水
媒染劑:
25 g硫酸鐵銨
100 ml蒸餾水
把染色劑和媒染劑分開配製,放置4~5星期成熟。染色時再混合。
7. 碧雲天的蘇木素伊紅染色試劑盒好用嗎
好不好用,要用過才知道啊。
試劑盒說明:
蘇木精-伊紅染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining ),簡稱HE染色法 ,是病理學常規製片中最基本的染色方法。蘇木精染液為鹼性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。 染色過程需要優化,著色情況與組織或細胞的種類有關,也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,很多細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜鹼,當其衰老時或發生退行性變則呈現嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現透明變性時,伊紅著色由淺變深。 本產品所包含試劑均為工作液,可直接使用。
操作說明(以下步驟僅供參考):
(一)石蠟組織切片染色。
1.取材組織塊,經固定後,常規石蠟包埋,切片。
2.石蠟切片脫蠟水化:
二甲苯(I)中脫蠟5min。
換用新鮮的二甲苯(Ⅱ),再脫蠟5min。
無水乙醇5 min。
95%乙醇2min。
80%乙醇2min
70%乙醇2min。
蒸餾水2min。
3.蘇木素染液染色5-20min(具體時間根據染色結果和實驗要求調整),自來水沖洗。
4.分化液分化30s。
5.自來水浸泡15min或溫水(約50℃)5min。
6.置伊紅染液2min(具體時間根據染色結果和實驗要求調整),自來水沖洗。
7.自來水浸泡5min。
8.脫水,透明,封片:
95%乙醇(I)1min
95%乙醇(Ⅱ)1min
③100%乙醇(I)1min
100%乙醇(Ⅱ)1min
二甲苯石炭酸(3:1)1min
二甲苯(I)1min
二甲苯(Ⅱ)1min
中性樹膠封固,鏡下觀察。
(二)冰凍切片
冰凍切片不用脫蠟,可固定後直接染色,其方法與石蠟切片相同。
注意事項:
1、切片脫蠟應盡量干凈。
2、系列乙醇應經常更換新液。
3、第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預實驗。
4、染色過程推薦淺染,通常只需能夠分辨細胞核即可,顏色過深有可能影響細胞質顏色。
5、冷凍切片染色時間盡量要短。
6、染色時的pH值很重要。蘇木素中礬類,太少會使核染偏紅,太多會造成染色彌散。需要嚴格按照配方進行配置。
7、放置時間過長的蘇木素染液需要過濾後才能使用,否則容易造成分色效果不好。
8、如果染色效果不好,可以加適量的冰醋酸增強細胞質著色,該操作具有一定副作用,染好的片子會隨著時間延長而褪色。
9、為了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。
8. 蘇木素的鋁溶液
常用的兩種鋁蘇木素溶液有Ehrlich氏溶液和Harris氏溶液。鋁蘇木素溶液能夠把細胞核染成半透明的淺藍色,在酸性環境下會迅速變成紅色。作為媒染劑使用的鉀鋁硫酸鹽在鹼性溶液通常結合與氫氧根形成不能溶解的氫氧化鋁。 在過量的酸中,氫氧化鋁由於缺乏OH-離子而溶解,因此,鋁蘇木素溶液的酸性溶液變成紅色。 在鋁蘇木素溶液染色時,被染色的部分通常轉移到一種鹼性溶液中,中和酸並釋放氫氧根,形成一個不溶的藍色鋁蘇木精復合物。
由於自來水鹼性不十分強,通常用每升含有33.5 g NaHCO4和20克的MgSO4,並加入百里香酚蘭的溶液代替。使用冷水會減慢染色過程。 實際上,使用在10°C之下的冷水甚至可能導致組織呈現紅色。 1 g 蘇木素
100 ml無水乙醇
60 g明礬(鋁鉀硫酸鹽)
100 ml甘油
100 ml蒸餾水
10 ml冰醋酸(HOAc)
首先,在100 ml無水乙醇中溶解1 g 蘇木素,微熱。 然後,在100 ml蒸餾水中溶解60 g明礬加入100 ml甘油微熱。 第三步,混合二種溶液並且增加10 ml冰醋酸。 然後轉移到用棉花輕輕塞住口的燒瓶中,暴露在空氣和陽光中幾個星期,每天震盪溶液。在這個過程中,蘇木素被部分氧化。 最後,把溶液轉移到一個封口很嚴的試劑瓶中在溫暖處存放。
染色時,有時需要加入0.3 g碘酸鈉。 因為蘇木素溶液被氧化,溶液的顏色從紫色將變成深紅,而醋酸刺激性氣味將變成宜人的芳香。 甘油作為穩定劑並且減速溶液的蒸發。 然而,甘油可以減速染料的成熟,所以可以在最初的制備以後的4到6個星期後加入。
Ehrlich的蘇木素溶液染色時,黏多糖物質例如軟骨素也被染成藍色。 染色時間通常是15到40分鍾。 1 g 蘇木素
10 ml無水乙醇
20 g明礬(鋁鉀硫酸鹽)
0.5 g氧化汞
190 ml蒸餾水
10 ml冰醋酸(HOAc)
首先,在10 ml無水乙醇中溶解1 g 蘇木素,微熱。 然後,在500 ml燒杯中加入190ml蒸餾水和20 g明礬。 第三步,加入氧化汞,立即插入冷水中迅速降溫。要用開口較大的容器,防止加入氧化汞後放出氧氣引起爆炸。加入氧化汞後,溶液應該呈現深紫色。加入4%的l冰醋酸能夠使對細胞核染色的特異性更強。 最後,把溶液過濾,轉移到一個密封的試劑瓶中,立即使用或長期保存。
Harris氏蘇木素配方染色被用於細胞核的常規檢查和性染色體的檢查。染色時間通常是5到20分鍾 1.5 g 蘇木素
50 ml1%的碘的95%乙醇溶液
700ml飽和的明礬溶液
250 ml蒸餾水
把蘇木素溶解到250ml溫的蒸餾水中,加入碘酒,加入明礬溶液,煮沸。
Cole氏蘇木素染色溶液使用前要冷卻,過濾。染色時間通常是10分鍾。 比Ehrlich氏蘇木素配方靈敏度好,不會或很少會把黏多糖物質染色。
1 g 蘇木素
0.2g NaIO3
50g 明礬
1g檸檬酸
50g水合三氯乙醛
1000 ml蒸餾水
把蘇木素,明礬,碘酸鈉加入1000ml蒸餾水溶解,過夜放置,以便蘇木素充分溶解。加入檸檬酸,水合氯醛,煮沸5分鍾後冷卻。
9. 蘇木素的配置方法
可以將蘇木精溶於無水乙醇,將硫酸鋁溶於水,混合加熱煮沸2min,加入碘酸鈉及檸檬酸。但其實更為快捷的方法是去買已經配置好了的蘇木素,我們實驗室用的徠卡的蘇木素,就比自己配置要存放的時間長,染色效果也更加清晰。
10. 蘇木精 曙紅染色液的配置
Delafield 蘇木精
材料:蘇木素4g、無水酒精25ml、10%銨礬水溶液400ml、甘油100ml、甲醇100ml、蒸餾水
配置方法:(1)取10g銨礬溶於90ml蒸餾水中,即成10%銨礬水溶液;
(2)取蘇木精4g溶於無水酒精25ml;
(3)溶化後加10%銨礬水溶液400ml,放有光處3-4天;
(4)濾過後加甘油及甲醇各100ml,過濾數日後可長久保存。
用法:一般用蒸餾水稀釋50-100倍,染4-24小時,後流水洗。