1. 血清是怎麼提煉出來的
血清是血液沉降之後把血細胞分離開的上層清液。
你可以采血後把血液放進離心管中，1500~2000r/min，去上層清液就是血清！
2. 如何獲取血清問題
serum，血清，詳細資料見網路http://ke..com/view/42775.htm?fr=aladdin
先糾錯，紅細胞是血細胞而非生物大分子。
嚴格的講，添加了抗凝劑的血液在高速離心機離心後得到的上清液為血漿而非血清，前者與後者相比含有多種凝血因子比如纖維蛋白原或纖維蛋白。離心的方法可以使血液分層，使血細胞（紅細胞、白細胞）、血液中的其他成分（血小板、血漿清蛋白、球蛋白等）沉澱於管底，從而獲取新鮮血漿。血清可以用離心新鮮膠凍狀血凝塊獲得。
常用的注射器過濾器一般是0.46um和0.22um兩種規格，可以過濾掉部分細菌、液體中的雜質等，理論上可以通過過濾方式得到血漿，但實際上沒人這么做——因為紅細胞直徑為6~9um很快就能堵塞過濾器濾孔，使得過濾沒法進行；手術中自體血液回輸機的過濾不同於普通的注射器過濾器。
綜上所述，用注射器過濾得到的血漿和離心機獲得的差異不大，但注射器過濾基本上是不可能實現的。
3. 懷疑血清染菌，想用濾膜過濾一下，可否自己用0.22μm濾膜過濾
0.22μm濾膜可以除去細菌的。不會影響其他成分。但是如果有細菌分泌物（比如毒素），則不能去除。建議更換。
4. 請問細胞培養中胎牛血清過濾的詳細步驟,
胎牛血清買回來先化開，然後56度半小時滅活，在正常過濾就行。如果你用一次性濾器，內那就先准備容20或50ml的注射器，用注射器抽取，拔掉針頭，再把一次性濾器插入注射器出口，把濾出的血清放滅過菌的容器就行，我一般放50ml離心管中，用時也方便，否則血清反復凍融不好，也容易染菌。
5. 細胞培養基加了血清後還可以過濾么
1、血清要做滅活處理；
2、滅活後的血清要經過.45和.22慮膜過濾；
3、培養基是不可以紫回外照射的。
還要答注意一點的是血清一般不推薦直接過濾除菌的，如果懷疑血清染菌，過濾時要把血清按比例加入到培養液中，然後才可以過濾除菌！！
6. 全血分離獲得血清的方法及步驟 謝謝
材料與方法
1.1 血清採集 MG患者全血來自～2005年就診於遼寧中醫學院附屬醫院的門診患者。根據典型臨床表現、新斯的明試驗、低頻重復電刺激及單纖維肌電圖等確診，無其他自身免疫性疾病，未經其他免疫抑制治療，並參照1994年版《中醫病證診斷療效標准》辨證為脾腎虛型。正常人血清取自同時期健康志願者。-70 ℃冰箱冷凍保存備用。
1.2 主要試劑 固相pH梯度干膠條IPG strip（Amersham公司產品， 非線性pH 3～10， 7 cm）。3-〔3-（膽醯胺基丙基）二甲氨基〕丙磺酸鹽｛3-〔（3-cholamidopropyl） dimethylamino〕-1-propanesul-fonate， CHAPS｝，二硫蘇糖醇（DL-dithiothreitol， DTT），三丁基膦（tributyl phosphine， TBP），尿素，硫脲，碘乙醯胺（iodoacetamide， IAA），丙烯醯胺（acrylamide）、甲雙丙烯醯胺（N， N'-methylenebi-sacrylamide），四甲基乙二胺（N， N， N， N-tetram-ethyl-ethylenediamine， TEMED），過硫醯胺（am-monium persulfate， APS），三羥甲基氨基甲烷〔tris （hydroxymethyl） aminomethane〕、甘氨酸（glycine， Gly）和十二烷基磺酸鈉（sodium dodecyl sulfate， SDS）均為Bio-Rad公司產品。瓊脂糖為華美生物公司產品。其他試劑均使用國產分析純試劑。所有溶液均用MilliQ水配製。
1.3 主要儀器 高速冷凍離心機，德國Eppendorf公司產品;EttanTMIPGphorⅡ，Amersham Biosci-ences公司產品;P-2000分光光度儀，Hitachi公司產品;SE-600電泳儀，Amersham公司產品;純水裝置，Millipore公司產品;GS-710光密度掃描儀，Bio-Rad公司產品;冷卻水循環系統，Cole-Parmer公司產品;Bruker-Daltonics AutoFlex TOF-TOF LIFTMass Spectrometer，美國Bruker-Daltonics公司產品;LCQ Deca XP Plus，美國Thermo Finnigan公司產品。
1.4 雙向電泳
1.4.1 血清總蛋白質的提取及定量 血清-70 ℃反復凍融4次後，用Agilent Multiple Affinity Re-moval Column處理去除高豐度蛋白。使用Agilent 5K超濾管進行濃縮除鹽，凍干回收的樣品，-70 ℃保存。用裂解液（9 mol/L 尿素、4% CHAPS、 65 mmol/L DTT和cocktail酶抑制劑）進行復溶，並採用考馬斯亮藍法進行蛋白質定量。
1.4.2 等電聚焦 自-20 ℃取出的膠條，室溫下平衡10 min，以500 μg上樣量在每份樣本中加入上樣緩沖液（8 mol/L尿素、2% CHAPS、1% Bio-lyte和1% TBP）以及標准蛋白質分子，上樣於泡脹槽中，加入礦物油覆蓋。程序設置如下:30 V 12 h，500 V 1 h，1 000 V 1 h，8 000 V 6 h。恆溫20 ℃。等電聚焦電泳後IPG膠條在平衡液1（Tris-base 50 mol/L 、尿素 6 mol/L、甘油 30%、SDS 2%、溴酚藍0.002%和DTT 100 mg）中於振盪器上振盪 15 min; 然後置入平衡液2（成分同平衡液1，用 400 mg 碘乙醯胺代替100 mg DTT）同樣於振盪器上振盪15 min。
1.4.3 SDS-PAGE垂直電泳 採用12.5%的均勻SDS2聚丙烯醯胺凝膠（水23.2 ml，30%丙烯醯胺溶液32.46 ml，1.5 mol/L Tris-HCl緩沖液pH 8.8 20 ml，10% SDS 0.8 ml，10% APS 0.4 ml，TEMED 3.76 μl，膠總體積80 ml）。將平衡後的IPG膠條移至凝膠的上方，膠條一端放入低分子量蛋白質標准，0.5%的瓊脂糖封膠。上下槽加入電極緩沖液（Tris 5 mmol/L，Gly 192 mmol/L和SDS 0.1%）。初始電流為每塊膠40 mA，電泳20 min，然後以每塊膠60 mA電流，直至溴酚藍前沿。
1.4.4 銀染色 電泳結束後，採用硝酸銀染色法，通過固定，硝酸銀染色，顯影，停顯及脫色，至背景清晰。
1.5 圖像分析 每個樣品常規進行3次二維電泳，用GS-710光密度掃描儀對電泳後的膠圖分別進行掃描，所得掃描圖像輸入計算機，採用Image-master軟體對圖像進行背景消減、蛋白質點檢測和校正，獲取蛋白質點的位置坐標和表達量等分析。選取 Ratio ≥1.5的蛋白質點認為有差異。所有數據的統計分析均採用SPSS 12.0軟體，統計學分析採用 t 檢驗。
1.6 基質輔助激光解吸電離-飛行時間質譜分析 用手術刀片切下膠上目標條帶，進行切膠、膠上胰蛋白酶酶解 20 h ，抽提酶解肽段，Zip Tip脫鹽後點樣，行基質輔助激光解吸電離-飛行時間質譜（matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry， MALDI-TOF-MS）分析（飛行管長2.7 m，加速電壓 20 kV ，反射電壓23 kV）。將第1級質譜得到的肽片段質量指紋圖譜、肽質量指紋圖譜與第2級質譜得到的肽序列信息一起用來檢索蛋白質資料庫，找出匹配的蛋白質。
1.7 資料庫檢索 將質譜鑒定所得的肽質量指紋譜（peptide mass fingerprinting， PMF）數據於Bio-Works（Thermo Finnigan， San Jose， CA）軟體搜索相應的庫。搜索使用的資料庫為IPI human蛋白庫（SEQUEST結果過濾參數為:當Charge+1，Xcorr≥1.9;當Charge+2，Xcorr≥2.2;當Charge+3，Xcorr≥3.75;其中DelCN≥0.1）以及NCBI上 Homo sapiens的非冗餘蛋白庫（rendant data-base）。檢索參數為胰蛋白酶解;氨基酸固定修飾方式為脲甲基半胱氨酸;模式為單同位素峰;肽片斷最大誤差控制在100 ppm;肽片斷最大分子量誤差為±0.5 Da;每個肽允許有1個不完全裂解位點。
2 結果
2.1 脾腎虛型重症肌無力患者血清雙向電泳圖譜 的建立及分析 經2-DE技術及銀染色後，得到了兩組血清的雙向凝膠電泳圖，並於相同的條件下重復實驗3次。在正常對照組細胞蛋白質組雙向電泳圖譜上可觀察到1 463±179個蛋白點，而脾腎虛型重症肌無力組可見到1 508±89個蛋白點
7. 如何在血清中提取DNA
.dna提取的幾種方法
(1).濃鹽法
利用rnp和dnp在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1m
氯
納提取化鈉抽提,得到的dnp粘液與含有少量辛醇的
氯仿一起搖盪,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及氯仿相中間，而dna位於上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將dna
鈉鹽沉澱出來.
也可用0.15
mnacl液反復洗滌細胞破碎液除去rnp,再以1mnacl提取脫氧核糖蛋白,再按氯仿---異醇法除去蛋白.
兩種方法比較,後種方法使核酸降解可能少一些.
以稀鹽酸溶液提取dna
時,加入適量去污劑,如sds可有助於蛋白質與dna
的分離。在提取過程中為抑制組織中的dnase對dna
的降解作用,在氯化鈉溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15mnacl,0.015m檸檬鈉,並稱ssc溶液,提取dna.
（2）.陰離子去污劑法:
用sds或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質變性,可以直接從生物材料中提取dna
.由於細胞中dna與蛋白質之間常借靜電引力或配位鍵結合,因為陰離子去污劑能夠破壞這種價鍵,所以常用陰離子去污劑提取dna.
（3）.苯酚抽提法:
苯酚作為蛋白變性劑,同時抑制了dnase的降解作用.用苯酚處理勻漿液時,由於蛋白與dna
聯結鍵已斷,蛋白分子表面又含有很多極性基團與苯酚相似相溶。蛋白分子溶於酚相，而dna溶於水相。離心分層後取出水層，多次重復操作，再合並含dna
的水相，利用核酸不溶於醇的性質，用乙醇沉澱dna
。此時dna是十分粘稠的物質，可用玻璃漫漫繞成一團，取出。此法的特點是使提取的dna保持天然狀態
.
（
4）.水抽提法:
利用核酸溶解於水的性質,將組織細胞破碎後,用低鹽溶液除去rna，然後將沉澱溶於水中，使dna充分溶解於水中,離心後收集上清液.在上清中加入固體氯化鈉調節至2.6m.加入2倍體積95%乙醇,立即用攪拌法攪出.然後分別用66%
٠80%和95%乙醇以及丙銅洗滌,最後在空氣中乾燥,既得dna樣品.此法提取的dna中蛋白質含量較高,故一般不用.為除蛋白可將此法加以改良,在提取過程中加入sds.
8. 細胞培養時，為什麼勿直接過濾血清
買來的就已經過濾過除菌了，如果污染了直接扔掉吧，血清過濾起來很費勁的
9. 如何用活性炭處理的血清
我找到的方法如下「
1 活性炭使用前先用預冷的消毒水洗兩遍
2 用0.5%右旋糖苷T70配置5%的活性炭懸浮液
3 與血清同體積混合
4 1000g 離心10分鍾
5 吸取上清（一部分血清與活性炭顆粒混合）
6 56℃，30分鍾，每分鍾4次混合這些混合物
7 1000g 20分鍾離心這些懸液
8 重復離心兩次，取上清液
9 0.22um濾器過濾，-20凍存
但是右旋糖苷T70價格很讓人心疼啊，而且我就用一次。
10. 血清怎麼從血里分離
人體的血液由有形成分和無形成分組成，白血球、紅血球、血小板是有形成分，血清是血液中的無形成分。用顯微鏡可以觀察到血液中的白血球、紅血球、血小板等有形成分，血清為去除纖維蛋白原後的無形成分，顏色微黃，透亮。
血清的基本成分是水，水中溶有蛋白質、脂肪、糖、無機鹽、維生素等營養成分，也溶有人體代謝產物。血清中有抗體，這是被稱作免疫球蛋白的蛋白質。
你說的應該稱抗毒血清。
因製作時是將蛇毒、病原菌產的毒等小量多次地注射到免子、馬血管內，每日慢慢加大注射量，一定時間後，因該動物體內產生抗體，經檢測，達到一定效價後，就可以抽血。血液分離血清後再經提純，就成了抗毒血清。
如蛇、白喉、破傷風、狂犬病抗毒血清等都是如此制備，用來治療相應毒素反應。
該生物制劑是異種血清，對人會有過敏反應，注射前均要做皮試。陰性可注射，陽性必需作脫敏療法才行。