超濾管預處理

A. 做超濾實驗時，超濾膜如何預處理

不知你要做的實驗原液是何種物質，要區別對待。一般超濾膜在出廠時都做過保養，分為干態保存和濕法保存。乾的拿來直接通水就可使用了，濕法的要將保護液放干凈方可使用，否則會和實驗原液發生混合，影響效果。

B. 超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管（MWCO10kD）。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選，視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管，主要考慮MWCO和濃縮體積，通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全過膜，冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂的白線為准。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機預冷至4度）。膜與轉軸的方向根據說明書調整（角轉離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時，【取50ul國產Bradford溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mg/ml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測】，繼續加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱，導致堵管。若發生沉澱，要確定沉澱的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，後者的方法是換不同的Buffer，直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經0.22um超濾膜超濾），再濃縮至1ml左右，連續三次，最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定，一般不多於500ul，也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上，基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作，用黃槍頭（200ul）取，輕輕順著邊緣插入槍頭，輕輕吹打、混勻蛋白液，注意不要碰到超濾膜，然後吸取濃縮液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取，否則難度太大，有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中，沒過超濾膜，防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管，重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水，用milliQ水輕輕潤洗幾次，【若管底有可見的蛋白沉澱，可以先加入水，然後用槍頭吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉澱懸起，然後倒掉，不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液，室溫放置20min，期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液，將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時，不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗，內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯，加至接近滿的MilliQ水，50ml管也加滿MilliQ水，將管芯慢慢放入50ml
離心管，排出部分水，然後蓋上蓋子，放4度保存，直到下次使用。一般來說，按照上述步驟和注意事項，每根管用三四年不會壞。

C. 超濾前面預處理可以用樹脂軟化氺嗎

清凈源水處理設備廠為你解答：嚴格來講，超濾前面預處理可加軟化也可以不加軟化。

D. 超濾是不是精處理系統 水處理系統分為預處理系統、精處理系統、後處理系統。請問是怎麼分的呢

超濾、石英砂、活性碳等都是是屬於預處理系統，
RO是精處理系統
EDI是後處理系統

E. 超濾的預處理的步驟是什麼

這個問題比較復雜，進超濾之前水質是有指標的，比如濁度、油、fe、mn、鈣鎂離子等專，每家超濾供應商都會屬提供進水水質標準的。那些超標就必須添加預處理設施，常規廢水處理工藝為：混凝沉澱+多介質過濾器+保安過濾器+超濾或混凝沉澱+自清洗過濾器+超濾。

F. 超濾預處理前都需要哪些過濾設備

石英砂，活性炭

G. 超濾進水管怎麼會憋呢

在工業用的超濾上堵塞是正常的，一般超濾的堵塞就是大顆粒雜質和有機物的污堵內。在工業超濾機前面要容有完備的預處理系統來替超濾分擔壓力，超濾的預處理有石英砂過濾器、活性炭過濾器和精密過濾器。也有的水質較好的話可以加上盤式過濾器作為預處理。如果你用的是家用機的話，一般廠家設計的沒有預處理或者是簡單的過濾芯，這樣超濾的使用年限是很難長久的，只有換膜了。超濾堵塞的辦法：
世界上沒有不堵的篩子，正常使用下超濾膜也會堵的。一般工業用的超濾機器上都配有殺菌裝置和在線清洗裝置，來定期處理超濾膜。如果你是家用的話清洗會比較麻煩。建議換個新的膜就可以了。有個小方法處理超濾膜，用氫氧化鈉1%濃度侵泡1個小時左右在用自來水沖下會緩解或者解除堵塞的。

H. 多介質過濾器加活性炭過濾器加超濾的預處理合理嗎

預處理的作用是去除水中的有機物以及大顆粒的物質，保證後續膜組件的安全。內
一般常見的預處理如下：容
1、多介質過濾器+活性炭過濾器+軟水器+精密過濾器或者多介質過濾器+活性炭過濾器+阻垢劑加葯+精密過濾器，這種適合硬度較高的原水；
2、多介質過濾器+活性炭過濾器+精密過濾器，一般用於硬度較低的南方地區，多介質和活性炭的直徑相對較大
3、盤濾+超濾+阻垢劑+殺菌劑，一般用於有機物較多的地表水

I. 超濾濃縮離心管使用前要怎麼處理

可能不來同廠家的產品保存運輸條源件不一樣。
如果有甘油等保護劑，那就一定要洗干凈再加樣品。
乾的超濾管也要先潤濕再用，否則可能不能完全利用膜面積。
最好，用樣品buffer潤洗下再加樣，最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好，使膜充分浸潤。

降低吸附的辦法有：
1，蛋白濃度不要過低
2，盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3，用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗（不影響蛋白活性的前提下）
4，加入保護蛋白，如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止長菌，依不同樣品可以重復使用不同的次數。