㈠ 怎麼用離子交換層析分離等電點分別為4，6，7， 9 的蛋白質
6．洗脫：用含NaCL(0.2-0.6M)的0.02M
Tris-HCL
緩沖液
pH7.4(內含0.
等電聚焦電泳
（IEF）分離蛋白及測定
蛋白質等電點
一、原理
等電點聚焦
（IEF）
㈡ 離子交換 穩定性 等電點 強弱作用 為什麼用
等電點（pI,isoelectric point）
例如：在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及回程度相等，所帶凈電答荷為零，呈電中性，此時溶液的pH稱為該氨基酸的等電點。
兩性離子所帶電荷因溶液的pH值不同而改變，當兩性離子正負電荷數值相等時，溶液的pH值即其等電點。
㈢ 用離子交換劑測定蛋白質的等電點時,為什麼一定要用強性離子交換劑
選用纖維素離子交換劑抄。因為蛋白質不能擴散到樹脂的鏈狀結構中，而纖維素離子交換劑交換容量大。選用ph為5.0的磷酸鹽緩沖溶液和強酸型陽離子交換劑如SE-纖維素。裝柱氫氧化鈉處理，0.1mol/L起始緩沖液平衡，上樣，吸附目標蛋白，0.15mol/L緩沖液洗脫，之後再選用ph6.5,8.0的緩沖液梯度洗脫。等電點=4.0的蛋白質在5.0緩沖液中帶負電，不能被吸附，直接分離。隨後6.0的蛋白質被洗脫出來。再用ph6.5,8.0的緩沖液梯度洗脫。
㈣ 求設計一用離子交換法分離蛋白質的試驗方案.
你的目標蛋白是什麼抄？五中蛋白中應該只有一種才是目的蛋白，其餘是雜質啊
例如陰離子交換介質吸附的是陽離子，即蛋白質處於一個PH比其自身等電點低的環境中。
裝柱 氫氧化鈉處理 磷酸鹽緩沖液平衡 上樣 吸附目標蛋白 流穿峰出現 磷酸鹽緩沖液洗脫 不同離子強度的氯化鈉洗脫（分段、梯度）
收集 檢測蛋白質純度含量等
㈤ 為什麼將牛磺酸提純時調成等電點ph=5再過離子交換樹脂
是因為氨基酸各種成分的等電點不同,調節PH值時,可以改變不同氨基酸的帶內電形式,使其在離子容交換樹脂上的吸附分配能力變化,從而進行氨基酸的分離純化.在PH為5的時候,可以分離純化出98%以上的牛磺酸晶體.
㈥ 某種蛋白質，其等電點為6.4，利用其電離性質，可採用哪些方法將其分離純化
蛋白質等電點為6.4
利用其電離性質，一般採用的就是離子交換層析。
當環境pH大於6.4時（比6.4高1到1.5個單位），理論上此時該蛋白質可以結合陰離子交換層析，比如Q或者DEAE。
當環境pH小於6.4時（比6.4低1到1.5個單位），理論上此時該蛋白質可以結合陽離子交換層析，比如SP或者CM。
可以通過陰陽離子交換層析組合使用分離純化出該蛋白
需注意結合離子交換層析都是理論情況，因為實際結構的問題可能會和理論值有偏差，要通過具體實驗結果分析。
㈦ 離子交換怎麼試驗
離子交換法是一種藉助於離子交換劑上的離子和廢水中的離子進行交換反應而除去廢水中有害離子的方法。離子交換是一種特殊吸附過程，通常是可逆性化學吸附；其特點是吸附水中離子化物質，並進行等電荷的離子交換。
離子交換劑分無機的離子交換劑如天然沸石，人工合成沸石，及有機的離子交換劑如磺化煤和各種離子交換樹脂。
在應用離子交換法進行水處理時，需要根據離子交換樹脂的性能設計離子交換設備，決定交換設備的運行周期和再生處理。通過本實驗希望達到下述目的：
1) 加深對離子交換基本理論的理解；學會離子交換樹脂的鑒別；
2) 學會離子交換設備操作方法；
3) 學會使用手持式鹽度計，掌握pH計、電導率儀的校正及測量方法。
二、實驗內容和原理
由於離子交換樹脂具有交換基因，其中的可游離交換離子能與水中的同性離子進行等當量交換。 用酸性陽離子交換樹脂除去水中陽離子，反應式如下：
nRH + M+n → RnM + nH+
M——陽離子 n——離子價數
R——交換樹脂
用鹼性陰離子交換樹脂除去水中的陰離子，反應式如下：
nROH + Y−n → RnY + nOH-
Y——陰離子
離子交換法是固體吸附的一種特殊形式，因此也可以用解吸法來解吸，進行樹脂再生。
本實驗採用自來水為進水，進行離子交換處理。因為自來水中含有較多量的陰、陽離
子，如Cl¯， NH4+，Ca，Mg，Fe，Al，K，Na等。在某些工農業生產、科研、醫療衛生等工作中所用的水，以及某些廢水深度處理過程中，都需要除去水中的這些離子。而採用離子交換樹脂來達到目的是可行的方法。
㈧ 某蛋白質等電點為8.14,如採用離子交換色譜法來純化,如何選擇填料和緩沖體系
我的話，第一步會選擇pH7.0-7.4左右過陰離子交換，讓大多數雜蛋白（大多數雜蛋白pI在6左右）、核酸、色素等雜質結合，收集流穿液，此時蛋白溶液的純度和澄清度會大大提高，再校pH7.0或更低pH過陽離子交換進行純化。講究一點的話，在緩沖選擇上可以區分一下陰陽離子緩沖，多數情況影響不大，不必糾結。
㈨ 設計一個利用陰離子交換柱純化一個等電點為7.5的蛋白質的實驗
既然是抄陰離子交換，就要讓目標蛋白帶負電，那麼緩沖液PH就要大於等電點。緩沖體系的選擇也很重要，一般用TRIS-HCl，特別是弱陰離子柱不可選用帶負電強的磷酸鹽緩沖液，否則上樣液中被交換的將是磷酸根而不是目標蛋白。一般用NaCl平衡後上樣進行離子交換，然後再用較強的陰離子洗脫。
㈩ 請問：等電點是10.9,ph緩沖溶液是8,應該選擇什麼離子交換分離
PH比等電點低，帶正電，應該選擇陽離子交換