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離子交換deae纖維素柱

發布時間:2021-12-20 02:17:52

1. DEAE纖維素離子交換柱後面的數字意義

DEAE-纖維素 DEAE cellulose DEAE-纖維素 DEAE cellulose 二乙氨乙基纖維素陰離交換纖維素 DEAE—纖維素化:稱取IgDEAE32或52放入5ml量筒加蒸餾水浸泡夜觀察溶脹DEAE體積根據所需層析柱柱床體積計算所需DEAE

2. DEAE纖維素陰離子交換柱,看到很多地方講到流穿模式,什麼叫做流穿模式呢

流穿模式指的是樣品沒掛柱,都留下來了。

3. 什麼是硼酸型DEAE纖維素柱

陰離子交換劑與陽離子交換劑的裝柱用於分離酸性蛋白
buquan

4. DEAE纖維素柱的原理

DEAE纖維素柱原理,基於離子交換層析:離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖回維素組成。

陰離子答交換基質結合,帶有負電荷的蛋白質,然後這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質從而洗脫下來。

(4)離子交換deae纖維素柱擴展閱讀:

基本信息:

性狀:乾燥纖維狀。

用途:用於柱色譜分析,用以分離提純多糖、肽、核苷酸、酶、血清組分和病毒等,陰離子交換填料。

保存:常溫乾燥封袋保存。

DEAE—纖維素的使用方法:

稱取IgDEAE32或52,放入5ml量筒中,加蒸餾水浸泡過夜,觀察溶脹後DEAE的體積。根據所需層析柱的柱床體積計算所需DEAE的用量,稱取所需DEAE用蒸餾水浸泡過夜,其間換幾次水,每次除去細小顆粒。

抽干,改用0.5mol/LNaOH溶液浸泡1h以上,抽干(可用布氏漏斗),用無離子水漂洗,使pH至8左右(用pH試紙檢查)。再改用0.5mol/LHCl溶液浸泡1h以上,去酸溶液,用無離子水洗至pH6左右。本實驗中在用前應以0.0175mol/L,pH6.7磷酸鹽緩沖液,浸泡平衡後使用。

5. DEAE纖維素是什麼

英文名稱:DEAE cellulose DE-23
CAS號:9000-11-7
功能團:二乙氨乙基
正常PH范圍:2~9.5
小離子電量:0.88~1.08meg/dg(dg=dry gram,千克重)
蛋白容積:425mg/dg(蛋白體積是指0.01M ph8.5磷酸緩沖液—牛血清白蛋白)
蛋白容積/柱體積:60mg/ml
每升所需的離子交換劑㎏柱床體積:0.19(離子交換劑重量的數字考慮到溶脹,容易去除及使用過程中離子離子交換剩餘顆粒)
填料密度:0.15dg/ml(填料密度的狀態為0.05M PH7.5磷酸緩沖液)
性狀:乾燥纖維狀

用途:用於柱色譜分析,用以分離提純多糖、肽、核苷酸、酶、血清組分和病毒等,陰離子交換填料
保存:RT

6. DEAE纖維素柱層析分離多糖的過程中遇到了很多問題,請做過的同學看看我的問題出在哪裡,謝謝謝謝。。。。

.1...DEAE是要先泡,然後鹼酸鹼的順序洗滌的, 每次都要洗滌到中性才能進行下一個步驟,你洗滌的時候可以使勁的攪拌, 然後靜置。麻煩你多泡 多攪拌。自然會開的
2如果靜置上面還有漂浮物可以考慮不要!
3,你要多看資料,人家抽濾只是為了抽干(不是絕對的干),然後方便換水洗滌,這樣能減少靜置時間,所以不是絕對的干啊,你給抽濾的漏斗底下加上濾紙。
4. 經過這些處理後肯定是會 沉澱的,我覺得你是急性子,這些東西和後來你需要的凝膠裝柱子都是濕法裝住,都需要慢慢裝,過一會才會沉澱下來,不要看你隨便倒一些進柱子,就感覺已經滿了,你過一會看就發現,在柱子最底下其實只慢慢沉澱了一點。

7. DEAE-52纖維素柱求助

DEAE-纖維素復 DEAE cellulose DEAE-纖維素 DEAE cellulose 為二乙氨乙基纖制維素。是陰離子交換纖維素之一。 DEAE—纖維素的活化:稱取IgDEAE32或52,放入5ml量筒中,加蒸餾水浸泡過夜,觀察溶脹後DEAE的體積。根據所需層析柱的柱床體積計算所需DEAE

8. 用過的sephadex G-25層析柱和DEAE纖維素離子交換柱再生的方法為什麼不一樣

飛秒檢測發現sephadex G-25層析柱填料是葡聚糖交聯的凝膠柱,G-X, X:(1)交聯度。X越小,交聯度越大,網孔越小,適用於分離低分子量產品,反之亦然。(2)吸水量。為凝膠得水值的10倍.例如,G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克.凝膠柱使用一次後,必須反沖疏鬆一次,平衡後再使用。若使用數次,就需要再生處理。用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl溶液浸泡,然後用蒸餾水洗至中性備用。若實驗完畢,將再生後的凝膠在布氏漏鬥上用蒸餾水洗滌抽干,再用95%乙醇洗兩次,在60℃烘箱中烘乾,回收保存。
DEAE-纖維素為二乙氨乙基纖維素,是陰離子交換劑。基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂;而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。離子交換層析同樣可以用於蛋白質的分離純化。由於蛋白質也有等電點,當蛋白質處於不同的pH條件下,其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質,所以這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質,結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的pH值洗脫下來。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生。如離子交換纖維素可用2mol/:NaCl淋洗柱,若有強吸附物則可用0.1mol/LNaOH洗柱;若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌,其順序為:0.5mol/LNaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存離子交換劑時要加防腐劑。對陰離子交換劑宜用0.002%氯已定(洗必泰),陽離子交換劑可用乙基硫柳汞(0.005%)。有些產品建議用0.02%疊氮鈉。
兩種填料的抗酸鹼性和抗腐蝕性能不同。

9. deae-陰離子纖維素的使用方法

DEAE-纖維素的處理及裝柱
(1)處理
本實驗採用的是DEAE-纖維素DE 52 是弱酸型陰離子交換劑,具體處理方法為:先將DE52陰離子交換劑乾粉浸泡於蒸餾水中,去除雜質;再在0.5N的HCL溶液中浸泡1-2h,再用無離子水或蒸餾水洗至pH值中性或PH4以上,並將其在抽濾漏斗中抽干;將抽乾的離子交換劑浸泡在0.5N的NaOH溶液中1-2h,再用無離子水或蒸餾水將其洗至中性。
(2)裝柱
將層析柱清洗干凈垂直固定到層析架上,加1/3體積的無離子水,打開下出液口,水流暢通,即刻將小燒杯中裝有適宜濃度的柱材,輕輕倒入層析柱中,凝膠自然慢慢沉降再層析柱底部,凝膠沉積直到離層析柱上端1.5-2cm處,停止裝柱。層析柱上端進液口連接恆流泵,下出口連接蛋白質監測儀,待層析柱的平衡。
(3)平衡
在柱層析上樣前必須對層析柱進行平衡,所謂平衡就是將層析柱中的溶液用層析過程的緩沖液(洗脫液)置換出來,使層析柱中的緩沖系統與柱層析過程中的系統一致。其方法是:利用層析柱上端的恆流泵將平衡緩沖液泵入到層析柱內,打開層析柱下端的出口,平衡液流速在0.5-1ml/min,當下出口流出液的PH值與平衡緩沖液的PH值一致時,層析柱達到了平衡。在本實驗中,用0.002M Tris-HCL緩沖液PH7.4(內含0.0001M EDTA),預先將DE-52柱進行平衡。

10. DEAE纖維素柱子為什麼膠總是不貼壁

DEAE-纖維素 DEAE cellulose

DEAE-纖維素 DEAE cellulose 為二乙氨乙基纖維素。是陰離子交換纖維素之一。
DEAE—纖維素的活化:稱取IgDEAE32或52,放入5ml量筒中,加蒸餾水浸泡過夜,觀察溶脹後DEAE的體積。根據所需層析柱的柱床體積計算所需DEAE的用量,稱取所需DEAE用蒸餾水浸泡過夜,其間換幾次水,每次除去細小顆粒。抽干,改用0.5ml/LNaOH溶液浸泡1h以上,抽干(可用布氏漏斗),用無離子水漂洗,使pH至8左右(用pH試紙檢查)。再改用0.5ml/LHCl溶液浸泡1h以上,去酸溶液,用無離子水洗至pH6左右。本實驗中在用前應以0.0175mol/L,pH6.7磷酸鹽緩沖液,浸泡平衡後使用。
用過的離子交換劑可以反復使用,使其恢復原狀的方法俗稱「再生」。再生並非每次用酸、鹼反復處理,通常只要「轉型」處理即可。所謂轉型就是使交換劑帶上所希望的某種離子,如希望陽離子交換劑帶上NH+4則可用NH4OH浸泡,如希望陰離子交換劑帶上Cl—則用NaCl溶液處理。本實驗中DEAE—纖維素在酸鹼處理後,用0.0175mol/L,pH6.7磷酸鹽緩沖溶液浸泡即可轉型,以HPO4取代DEAE中的OH—。一般由於DEAE—纖維素使用後因帶有大量雜蛋白,所以再生時,先用0.5ml/L NaOH浸洗,用無離子洗至pH8左右,再轉型,即可再使用。

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