045um濾膜除菌過濾陽性對照

⑴ 濾膜標准品是不是指這個濾膜的含量是有標准值的

問：最近要做一些培養基，有一些糖類需要過濾除菌，但不知道怎麼操作，還需要什麼輔助設備？

答：你只要有濾膜和配套的過濾器就可以了，一般在超凈工作台上進行。濾膜用0.22微米或0.45微米兩種規格，指的是濾膜的孔徑大小吧。一般0.22就夠了！

答：如果溶液的量比較大，超過500ml，可以採用已滅菌的抽濾瓶，預先墊好0.22um 的濾膜。抽濾瓶滅菌前要檢查封口用紗布或棉花堵牢，使用時，不用在無菌室中進行，只要保證收集瓶無菌狀態就可以。抽濾後，過濾好的溶液在無菌條件下倒進已滅菌的空試劑瓶中。

如果用小量的溶液過濾，無菌室內用一次性注射器和一次性0.22um濾膜（millipore或pall都有賣）就可以。

答：看過濾的量，如果量小，用注射器加濾器、0.22微米濾膜過濾，濾器加上濾膜後蓋緊，稍旋松，飯盒密封100度蒸餾水煮沸30分鍾滅菌，用來承接無菌糖水的瓶需高壓。用時在無菌操作台上操作，並先旋緊濾器，注意濾器外流下去的哪怕一滴也會造成染菌；過濾應該是費力的，如果感覺很輕松，則濾膜已破。0.45微米的濾膜一般用於兩次過濾的第一次，以防止0.22堵塞。注射器，若能高壓更好些。

如果量大，正壓可用蠕動泵接皮管接不銹鋼濾器大張濾膜，這些都是要高壓的。負壓可用抽濾。

⑵ 除菌過濾75%乙醇用哪種濾膜，是PVDF的，還是用PTFE的，請詳細說明，謝謝！

都可以用。

PVDF膜為疏水性的，膜孔徑有大有小，隨著膜孔徑的不斷減小回，膜對低分子量的蛋白結答合就越牢固。大於20kda的蛋白選用0.45um的膜，小於20kda的蛋白選用0.2um的膜。

PVDF膜在使用時需預處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團，使其更容易與帶負電的蛋白結合。PVDF膜具有較高的機械強度，是印跡法中的理想固相支持物材料。

(2)045um濾膜除菌過濾陽性對照擴展閱讀

過濾除菌法，利用濾膜過濾去除細菌的方法。常用的有熔結玻璃細菌濾器、火棉膠、硝化纖維素濾膜等。用最大孔徑不超過1nm的過濾器可得到無菌濾液，常用於對熱不穩定的物質的除菌。空氣或其他氣體也可通過棉花或超細纖維膜達到除菌的目的。

主要用於血清、毒素、抗生素等不耐熱生物製品及空氣的除菌。常用的濾菌器有薄膜濾菌器（0.45μm和0.22μm孔徑）、陶瓷濾菌器、石棉濾菌器（即Seitz濾菌器）、燒結玻璃濾菌器等。

⑶ 陽性對照的生物安全櫃作用和過濾後的排風怎麼處理

‍生物安全櫃排風：
1、先經安全櫃的過濾器排到實驗室內中，然後再通過實驗室排風系容統排到建築物外面；
2、通過實驗室排風系統的過濾器排到建築物外面；
3、直接經安全櫃的過濾器排到建築物外面。過濾器可以裝在全排風生物安全櫃的壓力排風系統里，也可以裝在建築物的排風系統里。

排風系統的設置應符合以下規定。

1、排風必須與送風聯鎖，排風先於送風開啟，後於送風關閉。
2、生物安全實驗室房間的排風管道可以兼作生物安全櫃的排風管道。
3、排風系統應能保證生物安全櫃內相對於其所在房間為負壓。
4、生物安全實驗室不得利用安全櫃或其他負壓隔離裝置作為房間排風口。
5、II級B1、B2和Ⅲ級 生物安全櫃的排風必須直接與排風系統相連。

⑷ 無菌檢查法驗證應該在 陽性對照室、 無菌室 、微生物限度室那個裡面操作

無菌室

⑸ 微生物限度檢查中的陽性對照和陰性對照是怎麼回事

微生物限度檢查中的陽性對照和陰性對照是怎麼回事
4.10微生物限度(薄膜過濾法)
4.10.1取相當於每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時，可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉－蛋白腖緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同「計數方法的驗證」。沖洗後取出濾膜，菌面朝上貼於營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉腖葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
4.10.2陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml，照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
4.10.3培養和計數 除另有規定外，細菌培養48小時，逐日點計菌落數，一般以48小時的菌落數報告；黴菌、酵母菌培養72小時，逐日點計菌落數，一般以72小時的菌落數報告；必要時，可適當延長培養時間至5～7天進行菌落計數並報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數後，計算各稀釋級供試液的平均菌落數，按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少於15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4.10.4菌數報告原則 以相當於1g或1ml供試品的菌落數報告菌數；若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。

⑹ 0.45的濾膜除菌效果好嗎

自然界中的大部抄分細菌尤其是襲致病,其尺寸都大於0.45微米,所以絕大部分細菌都能被0.45微米的膜截留,而且微孔濾膜並非篩孔,而是一個復雜的通道,標稱的孔徑是指最大的孔的等效孔徑,所以即使是小於0.45微米的細菌也是絕大部分都能被截留,一般情況下截留粘質沙雷氏菌的能力測試HRV大於7,其假陰性的風險已經遠遠低於無菌檢測其他過程(如取樣\恢復生長等等)可能導致的風險.所以各國葯典對無菌檢測的膜都選用0.45微米孔徑.

⑺ 無菌檢查薄膜過濾器需要用0.22um濾膜嗎

1、滅菌方法
培養基的滅菌方法主要有兩種，高壓除菌及0.22um微孔濾膜過濾除菌。與過濾相比，高壓滅菌的工作強度小，成本較低，但易造成營養成分的流失，而且在多次加樣（無菌谷氨醯胺溶液，無菌碳酸氫鈉溶液等）過程中容易造成二次污染。大多數培養基採用0.1～0.2μm孔徑的微孔濾膜進行過濾滅菌，並且已成為培養基除菌的發展方向，它可低限度地減少培養基的營養損失。
1.1 高壓滅菌

某些培養基（如MEM）可進行高壓滅菌，例如清大天一的MEM培養基中的MD605、MD609等。這類培養基一般不含有L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉，一般是在培養基高壓滅菌後加入L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉的無菌的液體。另外可高壓的谷氨酸鹽（如L-丙氨醯-L-谷氨醯胺）可代替L-谷氨醯胺。
可高壓滅菌的培養基在121℃、15psi，15分鍾的條件下完全可達到滅菌效果及營養成分的最小損失，不需將滅菌時間延長。為保證高壓滅菌的效果，滅菌設備的驗證很關鍵。
1.2 過濾滅菌
可供過濾滅菌使用的濾膜很多，其材料多為polyethersulphone（PES）、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。一般情況下採取正壓過濾，正壓過濾較之負壓過濾具有流速高、過濾快、不易污染，可避免蛋白質產生大量氣泡等優點。一般使用過濾器可參照各供應商的產品說明書。
目前大多數實驗室和制採用微孔濾膜濾器（如Zeiss濾器）或立式微孔濾器（Millipore、Pall）除菌。微孔濾膜濾器為不銹鋼，中間可夾放0.22um濾膜。使用這種濾器最重要步驟是安裝濾膜及無菌過濾過程。如在使用Zeiss濾器時，先要用培養用水將濾膜充分潤濕，在安裝濾膜時可在其上放置一層定性濾紙再固定。消毒時旋鈕不要扭太緊，凡與空氣接觸部位都要包好（可用牛皮紙、紗布、無紡布等）；高壓滅菌後，在無菌環境中立即將旋鈕扭緊。過濾除菌結束後，要打開濾器，檢查濾膜是否完整，如果濾膜破裂，需重新進行過濾除菌過程。立式微孔濾器可以選用不同的微孔濾柱體積，因為濾膜的折疊，膜面積顯著增大，液體處理量大，而且不容易發生堵塞現象。

⑻ 微生物培養基，將培養基配料加入用蒸餾水洗過的三角瓶中，在無菌工作台用0.45um的濾膜過濾到無菌的三角瓶

0.45微米的濾膜孔徑大，不能保證過濾除菌的效果。

⑼ 純化水微生物限度檢查法需要陽性對照嗎

4.10微生物限度(薄膜過濾法)
4.10.1取相當於每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時，可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉－蛋白腖緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同「計數方法的驗證」。沖洗後取出濾膜，菌面朝上貼於營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉腖葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
4.10.2陰性對照試驗
取試驗用的稀釋液1ml，照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
4.10.3培養和計數
除另有規定外，細菌培養48小時，逐日點計菌落數，一般以48小時的菌落數報告；黴菌、酵母菌培養72小時，逐日點計菌落數，一般以72小時的菌落數報告；必要時，可適當延長培養時間至5～7天進行菌落計數並報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數後，計算各稀釋級供試液的平均菌落數，按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少於15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4.10.4菌數報告原則
以相當於1g或1ml供試品的菌落數報告菌數；若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。

⑽ 0.22um濾膜濾過肽的分子量是多少

0.45μm的濾膜能過濾除菌,但不能截留小分子的多肽,對應截留分子量要幾十萬甚至上百萬