⑴ 葡聚糖凝膠柱色譜是什麼
葡聚糖凝膠柱的使用方法：
(1) 預處理
稱取Sephadex G-25（50－100目）約5g，加入蒸餾水100ml，置室溫下3h進行溶脹。
(2) 裝柱
凝膠層析柱的直徑與柱長之比一般為1:15。柱的底部用裝有細玻璃管的橡皮塞塞緊，用洗凈的玻璃絲（約200目尼龍布）墊底或購買類似規格的商品柱。然後將柱垂直安裝好，先加入1/3柱體積蒸餾水，接著將溶脹好的凝膠邊攪勻邊連續裝入，使它們在柱內自然沉降。同時大開下口慢速流出蒸餾水。裝柱後的凝膠必須均勻，不能有氣泡或明顯條紋。否則，必須到出重裝，裝好後，用蒸餾水平衡2－3h即可加樣品分離。
(3) 加樣
加樣前，首先把柱內凝膠上面多餘的蒸餾水放出，直到柱內液面與凝膠表面相齊（或留一極薄液層）為止。然後，由柱的上端加水解液2ml，注意不要讓溶液把凝膠沖鬆浮起，加完樣品後，打開下口緩慢放出液體至液面與凝膠面相齊，再用少量蒸餾水沖洗原來盛樣品的容器2－3次，待全部進入層析柱後，即可進行洗脫。
(4) 洗脫與收集
洗脫時，用蒸餾水作洗脫劑，並且要連續不斷地進行，使凝膠柱上端保持一定的液層，防止凝膠柱表面的液體流干。本實驗洗脫液流出的速度應控制在0.8－1.0ml/min。洗脫液的收集採用分管連續順序收集，每管收集3ml，共收集10管。據經驗，4或5號管核苷酸濃度最大，可作為層析鑒定的樣品液。但因層析柱長度的差異，管號會有變化，必要時可用紫外檢測A260nm，找出濃度最大的管號。
(5) 凝膠的再生和回收
凝膠柱使用一次後，必須反沖疏鬆一次，平衡後再使用。若使用數次，就需要再生處理。用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl溶液浸泡，然後用蒸餾水洗至中性備用。若實驗完畢，將再生後的凝膠在布氏漏鬥上用蒸餾水洗滌抽干，再用95%乙醇洗兩次，在60℃烘箱中烘乾，回收保存。
實驗五. 葡聚糖凝膠層析
【實驗目的】
1.掌握葡聚糖凝膠的特性及凝膠層析的原理。
2．學習葡聚糖凝膠層析的基本操作技術。
【實驗原理】
凝膠層析又稱分子排阻層析或凝膠過濾，是以被分離物質的分子量差異為基礎的一種層析分離技術，這一技術為純化蛋白質等生物大分子提供了一種非常溫和的分離方法。層析的固定相載體是凝膠顆粒，目前應用較廣的是：具有各種孔徑范圍的葡聚糖凝膠（Sephadex）和瓊脂糖凝膠（Sepharose）。
葡聚糖凝膠是由直鏈的葡聚糖分子和交聯劑3—氯1，2—環氧丙烷交聯而成的具有多孔網狀結構的高分子化合物。凝膠顆粒中網孔的大小可通過調節葡聚糖和交聯劑的比例來控制，交聯度越大，網孔結構越緊密；交聯度越小，網孔結構就越疏鬆，網孔的大小決定了被分離物質能夠自由出入凝膠內部的分子量范圍。可分離的分子量范圍從幾百到幾十萬不等。
葡聚糖凝膠層析，是使待分離物質通過葡聚糖凝膠層析柱，各個組分由於分子量不相同，在凝膠柱上受到的阻滯作用不同，而在層析柱中以不同的速度移動。分子量大於允許進入凝膠網孔范圍的物質完全被凝膠排阻，不能進入凝膠顆粒內部，阻滯作用小，隨著溶劑在凝膠顆粒之間流動，因此流程短，而先流出層析柱；分子量小的物質可完全進入凝膠顆粒的網孔內，阻滯作用大，流程延長，而最後從層析柱中流出。若被分離物的分子量介於完全排阻和完全進入網孔物質的分子量之間，則在兩者之間從柱中流出，由此就可以達到分離目的。
本實驗以葡聚糖凝膠G—25作為固定相載體，來分離藍色葡聚糖—2000和溴酚藍。藍色葡聚糖—2000分子量接近2×106， 而溴酚藍分子量為670，二者分子量相差較大，前者完全排阻，而後者則可完全進入凝膠顆粒網孔內，二者通過層析柱的時間不同而分開。
【實驗材料】
1.實驗器材
層析柱(1×20cm)附有一小段乳膠管及螺旋夾；洗脫液瓶(帶下口的三角瓶，250m1)；試管及試管架；量筒10m1；721型分光光度計
2.實驗試劑
(1) Tris—醋酸緩沖液(pH7.0):取0.0lmol/L Tris溶液(含0.1mol/L KCl)900ml，用濃醋酸調pH至7.0，加蒸餾水至1000m1。
(2) 溴酚藍溶液：稱取溴酚藍10毫克，溶於5毫升乙醇中，充分攪拌使其溶解，然後逐滴加入Tris—醋酸緩沖液(pH7.0)至溶液呈深藍色。
(3) 藍色葡聚糖—2000溶液：稱取藍色葡聚糖—2000 10毫克，溶於2毫升Tris—醋酸緩沖液(pH7.0)中即成。
(4) 樣品溶液：取溴酚藍溶液0.1毫升，藍色葡聚糖—2000溶液0.5毫升混勻後為上柱樣品溶液。
(5)葡聚糖凝膠G-25 (Sephadex-G-25)
【實驗操作】
1.實驗凝膠的制備：商品凝膠是乾燥的顆粒，使用時需經溶脹處理，稱取4克葡聚糖凝膠G—25，加50毫升蒸餾水，攪拌均勻，在室溫溶脹6小時，或沸水浴溶脹 2小時，一般採用後一種方法。再用傾瀉法除去凝膠上層水及細小顆粒，用蒸餾水反復洗滌幾次，再以緩沖溶液(pH7.0的Tris—醋酸溶液)洗滌2—3次，使pH和離子強度達到平衡，最後抽去溶液及凝膠顆粒內部氣泡，凝膠可保存在緩沖液內。
2.裝柱：將層析柱洗凈，垂直固定在鐵支架上，選擇有薄膜端作為層析柱下口，將下口接上乳膠管並用螺旋夾夾緊。層析柱中加入洗脫液，打開下口螺旋夾，讓溶液流出，排除殘留氣泡，最後保留約2厘米高度的洗脫液，擰緊螺旋夾。將凝膠輕輕攪動均勻，用玻璃棒沿層析柱內壁緩緩注入柱中，待凝膠沉積到柱床下已超過l厘米時，打開下口螺旋夾，繼續裝柱至柱床高度達到8厘米,關閉出口。裝柱過程中嚴禁產生氣泡，盡可能一次裝完，避免出現分層。再用洗脫液平衡l至2個柱床體積，凝膠面上始終保持有一定的洗脫液。平衡後，擰緊下端螺旋夾。
3.加樣品：打開螺旋夾使柱面上的洗脫液流出，直至床面與液面剛好平齊為止，關閉下端出口。取溴酚藍及藍色葡聚糖—2000混合液0.3毫升，小心地加於凝膠表面上，切勿攪動層析柱床表面。打開下端出口，使樣品溶液進入凝膠內，並開始收集流出液。當樣品溶液恰好流至與凝膠表面平齊時，關閉下端出口。用少量洗脫液清洗層析柱加樣區，共洗滌三次，每次清洗液應完全進入凝膠柱內後，再進行下一次洗滌。最後在凝膠表面上加入洗脫液，保持高度為3—4cm。
4.洗脫與收集：連接好凝膠柱層析系統，調節洗脫液流速為每分鍾1毫升，進行洗脫。仔細觀察樣品在層析柱內的分離現象，收集洗脫液，每收集3毫升即換一支收集管(試管預先編號)，收集約20管左右，樣品即可完全被洗脫下來。將各收集管中的洗脫液分別用721型分光光度計在波長540nm處測定其光密度。
5.凝膠回收處理方法：將樣品完全洗脫下來後，繼續用三倍柱床體積的洗脫液沖洗凝膠後，將柱下口放在小燒杯中，慢慢打開，再將上口慢慢松開，使凝膠全部回收至小燒杯中，備用。
2 Sephadex LH20 的原理。
Sephadex LH20的分離原理主要有兩方面：以凝膠過濾作用為主，兼具反相分配的作用（在反相溶劑中）。因為凝膠過濾作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脫下來，小分子的化合物保留強，最後出柱。如果使用反相溶劑洗脫， Sephadex LH20對化合物還起反相分配的作用，所以極性大的化合物保留弱，先被洗脫下來，極性小的化合物保留強，後出柱。如果使用正相溶劑洗脫，這主要靠凝膠過濾作用來分離。
3 Sephadex LH20 洗脫溶劑。
看完第2點後，就應該清楚Sephadex LH20 洗脫溶劑因分為兩類：反相和正相兩種。用得最多的是反相溶劑洗脫，以甲醇－－水系統最為常見，先用水，逐漸增加甲醇比例，最後用100％甲醇沖柱。正相系統以氯仿－－甲醇最為常見，先用50％氯仿－－甲醇，逐漸增加甲醇比例，最後用100％甲醇沖柱。
4 Sephadex LH20 樣品的處理和洗脫溶劑的選擇。
如果樣品極性大，這選用反相溶劑洗脫（甲醇－－水），樣品用最少體積的甲醇－－水（盡可能甲醇少一些）溶解，過濾後，濕法上樣（一定要濾喔！要是把Sephadex LH20 堵啦，就得將Sephadex LH20 的柱頭部分棄去，很心痛呀）。如果樣品極性小，這選用正相溶劑洗脫（氯仿－－甲醇），樣品用最少體積的氯仿－－甲醇溶解，過濾後，濕法上樣。
5 Sephadex LH-20的步驟。
(1) 選擇條件：
梯度洗脫在Sephadex使用中並不象在正相柱層析中那麼重要。首先你的樣品須要能溶解在盡量少量的洗脫劑中。極性在的用甲醇水系統;極性小者一般用不含水的系統。我們實驗室常用正己烷二氯甲烷甲醇系統，用了很多年，效果較好。
(2) 飽和層析柱：
用洗脫劑將凝膠搖勻，直立柱身，讓其自然沉降，此時要防止氣泡留在其中。至少半小時打開開關，流出幾個柱體種的洗脫劑，目的是使其膨脹在正確比例的洗脫劑中。
(3) 樣品處理：用盡量少的洗脫劑溶解樣品，常壓過濾。
(4) 濕法上柱。這也是要有技巧的步驟。
(5) 洗脫：控制流速，一般1drop/s以下，可參見廠家的一些參數;必要時更改極性（很多時一個極性就可以將樣品洗脫完畢）。
再生以備下次使用。
6 分離的技巧，最後說說我的使用心得
（1） 流速不可太快，切切不可新急，所謂欲速則不達。
（2）柱子盡可能長， Sephadex LH20 柱長的增加將極大地改善分離，所不要吝惜填料，寧可將填料全裝在一根大柱子中，不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優勢兵力，打擊敵人。
（3） 餾分一定要接的細，可1／10，或1／20 個保留體積接成一餾分。
（4） 洗脫體積一般為2-3個保留體積，對特殊保留強的化合物，可洗脫5個保留體積。
（5）鞣質成分死吸附嚴重，如不在乎填料者，可用Sephadex LH20 分鞣質
（6）Sephadex LH20 對黃酮類成分的分離效果極佳，方法很成型，有大量文獻參考。
（7）填料反復使用，每次用完，一般可用甲醇將柱子洗干凈，然後用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來，待用。
Sephadex LH-20是由葡聚糖G-25羥丙基化加工而成，屬於分子篩凝膠，尤其適用於天然產物在有機溶劑中的純化。例如：類固醇、萜類、脂類以及小分子多肽等，Pharmadex LH-20同時適用於分子類別非常相似的物質的分離和工業規模的制備，既可用於初步純化步驟，也可用於最終精製步驟，如非對映同分異構體的分離。
1.裝柱
裝填的重要原則之一就是需要形成一個穩定均一的柱床。膠顆粒越均一（粒徑分布越窄），越容易獲得穩定均一的柱床。但是對於Sephadex LH-20而言，25～100μm的粒徑范圍相對於許多用於制備色譜的填料而言，不能說分布均一，也就是說其粒徑分布較寬。然而當膠溶脹後就相對容易得到均一的柱床。這對於長柱（最高至250cm）而言也是同樣的。在裝柱前，層析柱和儲槽都必須進行徹底的清洗。
Sephadex LH-20在使用之前必須進行溶脹。在溶脹的過程中，要盡量避免過分攪拌，否則會破壞球形膠粒，且要避免使用磁力攪拌器。
在室溫下，將凝膠溶脹於層析溶劑中至少三小時，溶脹後膠體積的大小決定於所使用的溶劑系統，請參考後頁之干膠溶脹表計算特定柱體積所需要干膠的量。使溶脹膠體積沉澱之後占總體積的75%，上層溶劑佔25%，這時，懸浮液從一個容器倒入另一容器時膠粒可移動。將溶脹後的凝膠根據裝柱要求均勻倒入柱內，在保證膠粒不變形的前提下，應在盡可能高的壓力下裝柱，反壓不要超過1.5ba。
2.平衡
上樣前，用洗脫液平衡層析柱至少兩個柱體積直到基線變得平穩為止，如改變溶劑應該注意凝膠在新溶劑中的溶脹性質，並根據性質確定柱高調節器的位置，如使用相同的溶劑，在以後的層析中柱平衡可以省略。
3.洗脫液
為確保延長層析柱的使用壽命，所有的緩沖液都應該離心或經過0.45um的膜過濾以除去雜質。
4.樣品
樣品體積應該占柱總體積的1-2%，同樣在使用之前樣品應該離心或經過0.45um的膜過濾。
5.洗脫
洗脫流速應根據情況而定，最大線性流速約12cm/min（反壓1.5ba），建議流速為1-10cm/h。總體來說，較低的流速，具有較高的分辯率。
⑵ 葡聚糖凝膠柱層析和硅膠柱層析的區別
這個葡聚糖凝膠柱層東西比較貴
可以重復用，每次用之前，都是先用硅膠柱等，先分離的比較純，再過葡聚糖凝膠Sephadex LH_20柱，這樣就可以重復利用。
硅膠柱層析原理：硅膠層析法的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離， 一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附，整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。
葡聚糖凝膠柱層析,其主要用於分離黃酮類化合物
⑶ 什麼是陰離子交換柱
陰離子交換器 又叫陰床,作用是用陰樹脂中的氫氧根交換掉水中的其他陰離子回.混合物通過陰離子交答換柱,陰離子可以被吸附從而與其他物質分開,一般來說,陰離子交換柱的吸附劑應該呈陽性
離子交換器分為：鈉離子交換器、陰陽床、混合床等種類,.離子交換柱(器)外殼一般採用硬聚氯乙烯(PVC)、硬聚氯乙烯復合玻璃鋼(PVC-FRP)、有機玻璃(PMMA)、有機玻璃復合透明玻璃鋼(PMMA-FRP)、鋼襯膠(JR)、不銹鋼襯膠等材質.主要用於鍋爐、熱電站、化工、輕工、紡織、醫葯、生物、電子、原子能及純水處理的前道處理,工業生產所需進行硬水軟化、去離子水制備的場合,還可用於食品葯物的脫色提純,貴重金屬、化工原料的回收,電鍍廢水的處理等.
有機玻璃離子交換裝置耐腐蝕、無色透明、適用於食品、醫葯、製糖及電子工業小規模純水制備.碳鋼襯膠離子交換裝置具有制水量大、強度高、成本低等特點,適用於大型鍋爐軟化水及大規模純水制備.
希望有所幫助
⑷ 葡聚糖凝膠色譜層析柱圖結果怎麼分析
1.凝膠的預處理
交聯葡聚糖凝膠的市售商品多為乾燥顆粒，使用前必須充分溶脹。方法是將欲使用的干凝膠緩慢地傾倒入5～10倍的去離子水中，參照相關資料中凝膠溶脹所需時間，進行充分浸泡，然後用傾倒法除去表面懸浮的小顆粒，並減壓抽氣排除凝膠懸液中的氣泡，准備裝柱。在許多情況下，也可採用加熱煮沸方法進行凝膠溶脹，此法不僅能加快溶脹速率，而且能除去凝膠中污染的細菌，同時排除氣泡。
2.裝柱
層析柱的選擇一般根據分離樣品的種類和樣品的數量而定。純化蛋白質時，柱床體積應為樣品體積的25～100倍。去除鹽及游離熒光素約為樣品體積的4～10倍。柱太短，影響分離效果。柱長一些，分離效果好，但柱太長，則延長分離時間，樣品也稀釋過度。層析柱的內徑也要選擇適當。內徑過細，會發生「器壁效應」，即靠近管壁的流速要大於中心的流速影響分離效果。所以層析柱的內徑和高度應有一定的比例。對於除鹽來說應為1︰5～1︰25；對於純化蛋白質來說應為1︰20～1︰100。
凝膠柱的裝填方法和要求，基本上與離子交換柱的制備相同。一根理想的凝膠柱要求柱中的填料(凝膠)密度均勻一致，沒有空隙和氣泡。通常新裝的凝膠柱用適當的緩沖溶液平衡後，將帶色的蘭葡聚糖–2000、細胞色素，或血紅蛋白等物質配製成質量濃度為2g/L的溶液過柱，觀察色帶是否均勻下移，以鑒定新裝柱的技術質量是否合格，否則，必須重新裝填。
3.加樣與洗脫
（1）加樣量：加樣量與測定方法和層析柱大小有關。如果檢測方法靈敏度高或柱床體積小，加樣量可小；否則，加樣量增大。例如利用凝膠層析分離蛋白質時，若採用28Onm波長測定吸光度，對一根2cm×6Ocm的柱來說，加樣量需5mg左右。一般來說，加樣量越少或加樣體積越小(樣品濃度高)，解析度越高。通常樣品液的加入量應掌握在凝膠床總體積的5％～10％。樣品體積過大，分離效果不好。
對高解析度的分子篩層析，樣品溶液的體積主要由內水體積(Vi)所決定，故高吸水量凝膠如Sephadex G-200，每mL總床體積可加0.3～0.5mg溶質，使用體積約為0.O2倍總體積；而低吸水量凝膠如Sephadex G–75，每mL總床體積加溶質質量為0.2mg，樣品體積為0.Ol倍總體積。
（2）加樣方法：如同離子交換柱層析一樣，凝膠床經平衡後，吸去上層液體，待平衡液下降至床表面時，關閉流出口，用滴管加入樣品液，打開流出口，使樣品液緩慢滲入凝膠床內。當樣品液面恰與凝膠床表面持平時，小心加入數mL洗脫液沖洗管壁。然後繼續用大量洗脫液洗脫。
（3）洗脫：加完樣品後，將層析床與洗脫液儲瓶、檢測儀、分部收集器及記錄儀相連，根據被分離物質的性質，預先估計好一個適宜的流速，定量地分部收集流出液，每組分一至數mL。各組分可用適當的方法進行定性或定量分析。
凝膠柱層析一般都以單一緩沖溶液或鹽溶液作為洗脫液，有時甚至可用蒸餾水。洗脫時用於流速控制的裝置最好的是恆流泵。若無此裝置，可用控制操作壓的辦法進行。樣品體積不宜過多，最好為床體積的1％～5%，最多不要超過10%。樣品濃度也不宜過大，濃度過大粘度大，分離效果差，一般不超過4%。
洗脫液應與膨脹一致，否則更換溶劑，凝膠體積會發生變化，影響分離效果。洗脫液要有一定的離子強度和pH值。分離血清蛋白常用0.02～0.1Mol/L pH 6.9～8.0的PBS液（0.14Mol/L NaCl）和0.1Mol/L pH8.0Tris-HCl緩沖鹽溶液（0.14Mol/L NaCl）。
凝膠再生和保存
凝膠層析的載體不會與被分離的物質發生任何作用，因此凝膠柱在層析分離後稍加平衡即可進行下一次的分離操作。但使用多次後，由於床體積變小，流動速率降低或雜質污染等原因，使分離效果受到影響。此時對凝膠柱需進行再生處理，其方法是:先用水反復進行逆向沖洗，再用緩沖溶液平衡，即可進行下一次分離。
對使用過的凝膠，若短時間保存，只要反復洗滌除去蛋白質等雜質，加入適量防腐劑即可；若長期保存，則需將凝膠從柱中取出，進行洗滌、脫水和乾燥等處理後，裝瓶保存。
⑸ 陰離子交換柱是什麼
陰離子交換器 又叫復陰床制，作用是用陰樹脂中的氫氧根交換掉水中的其他陰離子。離子交換器分為：鈉離子交換器、陰陽床、混合床等種類，。離子交換柱(器)外殼一般採用硬聚氯乙烯(PVC)、硬聚氯乙烯復合玻璃鋼(PVC-FRP)、有機玻璃(PMMA)、有機玻璃復合透明玻璃鋼(PMMA-FRP)、鋼襯膠(JR)、不銹鋼襯膠等材質。主要用於鍋爐、熱電站、化工、輕工、紡織、醫葯、生物、電子、原子能及純水處理的前道處理，工業生產所需進行硬水軟化、去離子水制備的場合，還可用於食品葯物的脫色提純，貴重金屬、化工原料的回收，電鍍廢水的處理等。
有機玻璃離子交換裝置耐腐蝕、無色透明、適用於食品、醫葯、製糖及電子工業小規模純水制備。碳鋼襯膠離子交換裝置具有制水量大、強度高、成本低等特點，適用於大型鍋爐軟化水及大規模純水制備。
⑹ 用葡聚糖凝膠G-100層析，自己裝柱，可是下液流速特別慢，半天才出一滴，請問是什麼問題一開始還挺快
1、考慮一下被分離組分的物性，思考一下具有該物性的被分離組分是否適合於葡聚糖凝膠柱分離；
2、要選擇合適的流動相；
3、裝柱前，凝膠的處理也很重要，務必除盡氣泡；裝柱過程中，也得嚴格按正確操作進行；
4、流速，壓力也值得探討、摸索一下。
⑺ 離子交換柱的制備
聚丙烯離子交換柱
離子交換柱主要是利用離子交換樹脂中的離子同原水（液體）中的鈣、鎂及鐵離子進行交換而將其去除，使水（液體）得到凈化。
它已廣泛應用於化工、電子、醫葯、紡織、電鍍行業的製取純水、硬水軟化、葯物和食品的脫色和提取、重要化工原料的回收以及污水處理等。聚丙烯離子交換柱技術參數及外形尺寸：
聚丙烯離子交換柱技術參數及外形
名稱 陰、陽、鈉單床 體內再生混床
規格 φ250 φ315 φ400 φ500 φ630 φ250 φ315 φ400 φ500 φ630
設計流量 m3/h 1 1.5 2.5 4 6 2 3 4.5 7 1.2
柱體高 2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500
總高（H） 2830 2960 2930 2990 3080 2830 2860 2930 2990 3080
進水口（Dg） 20 20 25 25 32 25 25 32 32 50
出水口（Dg） 20 20 25 25 32 25 25 32 32 50
排氣品（Dg） 20 20 20 20 25 25 25 25 25 40
清洗口（Dg） 25 25 32 32 40 32 32 40 40 50
樹脂進出口（Dg）排凈口 32 32 32 40 40 32 32 32 32 40
聚丙烯離子交換柱
離子交換柱主要是利用離子交換樹脂中的離子同原水（液體）中的鈣、鎂及鐵離子進行交換而將其去除，使水（液體）得到凈化。
它已廣泛應用於化工、電子、醫葯、紡織、電鍍行業的製取純水、硬水軟化、葯物和食品的脫色和提取、重要化工原料的回收以及污水處理等。聚丙烯離子交換柱技術參數及外形尺寸：
聚丙烯離子交換柱技術參數及外形
名稱 陰、陽、鈉單床 體內再生混床
規格 φ250 φ315 φ400 φ500 φ630 φ250 φ315 φ400 φ500 φ630
設計流量 m3/h 1 1.5 2.5 4 6 2 3 4.5 7 1.2
柱體高 2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500 2500
總高（H） 2830 2960 2930 2990 3080 2830 2860 2930 2990 3080
進水口（Dg） 20 20 25 25 32 25 25 32 32 50
出水口（Dg） 20 20 25 25 32 25 25 32 32 50
排氣品（Dg） 20 20 20 20 25 25 25 25 25 40
清洗口（Dg） 25 25 32 32 40 32 32 40 40 50
樹脂進出口（Dg）排凈口 32 32 32 40 40 32 32 32 32 40
葡萄糖凝膠是一種珠狀凝膠，含有大量羥基，很容易在水中和電解質溶液中溶脹。G型葡聚糖凝膠含有各種不同交聯度，其溶脹度和分級分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠溶脹度基本上不為鹽和洗滌劑的存在而受到影響。另外，葡聚糖凝膠具有不同粒度。極細級用於分離需要極高解析度的柱色譜和薄層色譜；粗級和中級用於制備性色譜過程，可以在較低眼裡下獲得較高流速，粗級也可用於批量制備。
⑻ 緊急求助！！我的葡聚糖凝膠柱G-10堵了該怎麼辦
金歐亞®凝膠色譜法原理：是利用被分離物質分子量大小、形狀的不同導致在填料上滲透程度不同使組分分
離（分子篩原理），大分子物質由於擴散受阻，在凝膠中行徑較短而最先洗脫下來，進入凝膠內的小分子物
質按分子大小由大至小被洗脫下來，從而達到相互分離的目的，根據樣品的性質選用水、緩沖溶液加鹽或有
機溶劑作為流動相。
1、在室溫下，將乾粉浸泡於50-60%乙醇中至少24小時，並不斷攪拌以保證凝膠溶脹，抽濾，用無鹽水洗去
殘存的乙醇；在無鹽水中充分溶脹24小時。
2、將溶脹後的凝膠脫氣後（真空或超聲波）根據裝柱要求一次性均勻置入柱內，注意保證濕態裝柱，並避免
柱內產生氣泡和斷層。
3、上樣前緩沖溶液平衡層析柱至少二--三個柱體積直到記錄儀基線變的平穩為止（流出液的pH值等於
Buffer的pH值）。
4、凝膠過濾的上樣量一般為5-7%的床體積，我們建議初次上樣量控制在1-2%的床體��臃擲肭榭隹梢災?
步增加；柱高的選擇也與分離要求相關，難分物質要有一定柱高和流速控制。
⑼ 有關葡聚糖凝膠柱層析的問題，謝謝！
我覺得，這正說明了該方法或者該柱子分離效果不好。個人建議：
考慮被分離組分的理化性質（首要的），然後在選擇合適的方法，合適的柱子，流動相。如果確實得選用凝膠柱，而分離不了，可以考慮在用層析法分離之前先除雜（當然，如果兩種組分都是需要的，這是不適用的）
⑽ 葡聚糖凝膠色譜柱是用來干什麼的
做葡聚糖凝膠層析分離蛋白肽過程中，填充一般柱子需要2/3以上,灌時先加2-3毫升相應的緩沖液,然後,用玻棒輕輕絞勻再灌,不能產生氣泡,也不能使它幹掉,以免產生龜裂影響實驗結果.