質粒會粘到超濾離心管上嗎

① 在質粒提取中如有蛋白質殘留會有什麼現象如何去除蛋白污染

在質粒提取中如有蛋白質殘留，會出現提取的質粒不純凈的現象，加入溶液III可以去除蛋白污染。

質粒抽主要的目的是為了去除RNA，將質粒與細菌基因組DNA分開，然後去除蛋白質及其它雜質，如果去除的不夠徹底或者有殘留，那麼得到的質粒就不會相對純凈。

蛋白質的去除，主要是靠不溶解的 K-SDS-蛋白質復合物的形成。雖然將中和後的體系置於 4C 一段時間，可以形成更多的該不溶復合物，從而使蛋白質殘留更少，但實踐證明這樣做並不是必須的，除非是大量抽提。

只要加入溶液 I 後的懸浮，加入溶液 II 後的裂解及加入溶液 III 後的中和是均勻徹底的，蛋白質的殘留就應該在可以滿足實驗要求的水平；而只有溶液的用量足夠，甚至過剩，才能確保裂解和中和是徹底的。當然，試劑盒及苯酚的使用，是可以更進一步降低蛋白質的殘留的。

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質粒抽提竅門

1、加溶液II（裂解液）後，操作一定要溫和，劇烈混合會導致基因組DNA污染。[4]

2、洗脫時60℃溫育（Ellution Buffer）洗脫緩沖液或去離子水效果更好。

3、若質粒提取含量低，可增加菌液樣或換用ArtMediaPlasmid Culture，其比LB培養基質粒得量高

4、菌體應徹底懸浮 ， 如果沒有徹底懸浮菌體，則殘留的菌體團塊在溶液 II 加入後，變成難以完全裂解的團塊。這個團塊在溶液 III 加入後，會有一部分蛋白質繼續存在於溶液中，成為蛋白質殘留的最大根源。

5、加入溶液 II 後，混勻，體系最好能立即變得清澈。體系如果變得清澈了，馬上加入溶液 III 中和。

6、中和的操作 ，在 1.5ml 離心管中加入溶液 III 後，先顛倒兩次，使管底朝上，用指頭彈擊管底數次，再顛倒混勻。效果非常好。

② 在超凈工作台不能加質粒嗎

超凈工作台不是防靜電工作台，加了會是產品變質。所以你還是不要加的好。

③ 真核基因能否用質粒導入會不會因為真核基因太大而不能導入。如果是...

我很無語。。。。。。基因的概念你看沒看？！基因是指有遺傳效應的DNA片段。。。。。片段啊!大爺！！！。。。。片段能有多長？與整個細胞核比起來小得多了。。。就好像你在地球上一樣，能說大么？！載體就是質粒啊！！！。。。。你妹的，你生物經常考D吧？？

④ 關於質粒載體轉化時如果使用同種質粒載體那麼在轉化過程中會不會有多個質粒載體進入轉化子里呢

會的。在最初的轉化時，一個宿主菌內很可能轉進去多個載體。
但是最後能在宿主菌中穩定復制並存在的，只有一種載體，或者說，復制子不互相干擾的載體才能穩定共存。

⑤ 質粒的問題

質粒本身就是條DNA 在許多生物上.很多抗性的基因就在質粒上,比如說抗葯性什麼的,所以他能編碼蛋白質 你那插入重組DNA的意思就是把2個DNA連一起

⑥ 提取質粒實驗中，質粒最後在離心管里，還是AC柱中，急急急，求神人幫忙

最後？最後是在離心管里啊。 不知道你們用的試劑盒是不是p1 p2 p3那種。加完p3上柱離心之後，質粒就在柱子里，乙醇洗也是洗柱子，晾乾。最後洗脫就是把質粒從柱子中洗到管子里，所以最後在管子里咯。

⑦ RT-PCR出一段目的基因，為什麼要把它先TA克隆呢為什麼不能直接把它連接到相應的質粒上呢

確實可以不一定要TA克隆。

你可以在設計引物的時候在引物的5'端加上酶切位點，比如你選中XXXYYY位點你可以把引物設計為AA－XXXYYY－AGCT(AGCT 代表你原來的引物序列）.我一般在頭上加2個A，這樣酶切效果好一些。兩個引物可以加相同，也可以不同酶切位點。取決於2點：
1。擴增區沒有該位點，（必須知道你擴增區的序列）
2。對應於你的目標分子。

TA克隆的好處在於選擇靈活，萬一一個位點不好使，同一批質粒還可以用其他酶再切。隨時可以擴增。還有方便下游作業，比如說你要連接兩端PCR產物，先克隆會比較方便一些。

所以2種方法各有優缺點，你可以根據情況選用。

⑧ 真核基因會不會因為太大而不能用質粒做載體。如果是用什麼做載體

當然不會。
質粒就是一個DNA環，加入真核生物的目的基因，頂多周長長些~

⑨ 質粒連接會出現幾種情況

根據題意目的基因和質粒露出的粘性末端是相同的，所以考慮兩兩結合的情況，可能有目的基因與目的基因相連，形成環狀的外源DNA；質粒與質粒相連，形成環狀的載體DNA；質粒與目的基因相連，形成重組質粒．
故選：C．

⑩ 基因工程中質粒會整合到基因組上嗎

有可能會！

有的質粒上含有轉座子，它可以自己單獨復制或者斷裂下來，環化後插入核區DNA鏈。

另外，質粒上如果和宿主DNA鏈有同源區段，也有機會直接發生重組。（就像減數分裂前聯會時發生的一樣。）

一般細菌想要穩定遺傳某個性狀，而不是細胞質遺傳導致有的質粒沒進子細胞的話，一般用後者來實現，相對比較穩定。