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台灣超濾離心管真空純化過濾裝置

發布時間:2021-11-24 11:45:03

超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。

⑵ 離心管和離心超濾管

離心管就來是一個簡單的可自以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉澱。
離心超濾管會有一個類似於內管和外管的兩個部分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內管中),就是超濾的原理。。。。常用於濃縮樣品。

⑶ 真空泵過濾裝置在什麼地方

真空泵過濾裝置分為真空泵進氣過濾器,真空泵排氣過濾器和油過濾器,不同的過濾器安裝在不同的位置,進氣過濾器安裝在進氣口,作用是過濾抽氣雜質;排氣過濾器安裝在排氣口,作用是過濾油煙,油霧分離,讓排氣清潔,另外收集油滴再利用,油過濾器則是過濾油。濾哥三種濾芯有效配合,達到延長真空泵壽命,提高真空泵性能,節約成本的目的。

⑷ 超濾離心管價格

超濾離心管作為一種更為高效的超濾管裝置可以有效的加快離心過濾速度,目前超濾離心管技術成熟,國內超濾離心管價格穩定,跟國外對比有很大優勢

⑸ 紙帶過濾機、轉台式真空過濾機的工作原理

紙帶過濾機、轉鼓真空過濾機的工作原理:
真空轉鼓過濾機由於其結構特專點,確定了它在如下屬工況要求下使用,能達到滿意的使用效果。
1、料漿中固體顆粒沉降速度不能太快,使用一般的攪拌器能保證形成均勻的懸浮液。
2、濾餅不需要過長的抽干時間即能達到所要求的濾餅含濕率。
3、濾餅能採用單級洗滌方法達到工藝所要求的純度或者能有效回收濾餅中的殘留物。
4、濾液和洗滌之間沒有嚴格分割的要求。
濾餅形成速度快,鞥在400~500mmHfg(1mmHg=133.32pa)真空條件下,在數秒鍾內形成濾餅,通常料漿的濃度(固含率)應在1%~20%(質量分數)范圍內,濾液的固含量允許達到0.1%~0.5%(質量分數)。它被廣泛地用於食品(如澱粉脫水和過濾)、醫葯、化學和廢水處理、冶金、采礦、石油、鋼廠和發電廠的粉煤灰脫水等場合。

⑹ 真空過濾裝置哪裡使用到嗎

生物制葯、實驗室,都可以用到,比如賽多利斯Sartolab®真空過濾裝置適合組織培養基、生物流體以及其它水性溶液的過濾

⑺ 超濾離心管 50kd能過濾抗體嗎

3KD指的是截留分子量
截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff)是使用分子量大小表示的超濾膜的截留性能,又內稱作容切割分子量。
由於直接測定超濾膜的孔徑相當困難,所以使用已知分子量的球狀物質進行測定。如膜對被截留物質的截留率大於90%時,就用被截留物質的分子量表示膜的截留性能,稱為膜的截留分子量。實際上,所使用的物質並非絕對的球形,由於試驗條件的限制,所測定的截留率也有一定的誤差,所以截留分子量不能絕對表示膜的分離性能。也就是說3KD分子量的產品有可能透過膜也有可能被膜攔截,一般來說希望3KD的產品全部透過,需要選擇截留分子量更大的膜,比如5KD

⑻ 超濾離心管是什麼

離心超濾管是一種採用優化過濾結構的設計方式,減少濃差極化,降低了膜易污染堵塞機率,加快了離心速度,縮短了離心所需的時間;超濾離心管還可用的膜表面面積提供快速樣品處理。

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