① 求離子交換色譜法分離蛋白質試驗步驟
離線pH梯度復-強陽離子交換色譜法制分離肽段混合物 這篇文獻能否幫助您?
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② 檸檬酸生產工藝流程
1、檸檬酸是世界上產量較高的有機酸,是一種無水物質。檸檬酸的生產工藝主要有生物發酵、水果提取和化學合成。以玉米粉為原料生產檸檬酸,有利於實現低能耗、低污染、高效益的目標。
過濾後玉米渣和多餘的蛋白質發酵過程,壓力和糖混合通風與無菌空氣深層發酵,發酵槽保持適當的生長溫度35~37℃環境中,與傳統的干土豆為原料相比,用玉米作為新興的檸檬酸生產的原材料和生產酸快,發酵周期短,成本低,在溶氧能力強等。總的來說,產酸產量可以提高10%左右。
2、為了提高傳統玉米麵粉發酵檸檬酸的生產過程生產干土豆為原料,通過發酵和鈣鹽提取技術,該方法生產的產品質量差,成本高,嚴重的環境污染,為了進一步擴大經濟效益,提高生產效率,實現清潔、無污染的生產,需要提高檸檬酸生產的提取工藝。
3、在原材料方面,本研究的玉米麵粉、大米和稻草,等等,針對工業過程的離子色譜法,母液凈化處理和回收廢液糖技術,不僅有效地降低成本,而且對檸檬酸生產的副產品,理性地通過優化技術、廢棄物排放少有利於環境保護。
當玉米產生檸檬酸時,只使用玉米中的澱粉。玉米中的其他營養素可在生產過程中回收、純化和開發,生產玉米蛋白粉、纖維飼料和高附加值玉米油等副產品。「吃了就擠」的生產理念有效地提高了經濟效益。
4、 為了提高培養基的溶解氧效果,在生產過程中應及時去除培養基中的雜質(固體)和過量營養素,使培養基呈現出清晰的液態,增強溶解氧能力,縮短發酵周期。
此外,經過合理調整後,不需要添加微量元素、生長素、氮源、無機鹽等,使各種成分比例適當的培養基可以大大提高轉化率和產酸率。在常壓條件下採用低溫液化技術,既能保證介質的質量,又能滿足完全液化的要求。
5、當種植玉米,誘變育種的方法,選擇合適的生產檸檬酸(如澱粉含量高的突變品種)的玉米品種和大量繁殖,使用高濃度的玉米麵粉檸檬酸高新技術的平板馴化,培育和選擇轉化率高、發酵周期短的速度和高酸菌株質量。將高新技術方法應用於大規模發酵過程中,實現了經濟效益和環境效益的雙豐收。
(2)如何用離子交換分離檸檬酸擴展閱讀:
電滲析技術電滲析:
是一種高效的膜分離技術,其原理是利用陰陽離子交換膜的選擇透過性的電場力的作用下,使檸檬酸根和氫離子結合為檸檬酸,整個過程中檸檬酸的損失少,平均收率達到92.7%。
相對於傳統檸檬酸提取工序中酸化沉澱的檸檬酸鈣方法而言,這種改進後的工藝不需要添加鈣成分,更加簡單,便於實現自動化生產,對環境影響小,生產周期短容易進行自動化生產。其缺點在於會增加檸檬酸的生產成本(電滲析的膜費較高),消耗的電能較多。
傳統工藝使用粗玉米粉生產檸檬酸時,由於粗玉米粉中的蛋白質含量豐富,在發酵時無用成分較多且易於造成菌體瘋長,不利於產酸。而用玉米清夜進行檸檬酸的發酵時有明顯的優勢。
③ 求問怎麼用離子交換樹脂層析分離混合氨基酸
【原理】離子交換樹脂是一種合成的高聚物,不溶於水,能吸水膨脹。高聚物分子由能電離的極性基團及非極性的樹脂組成。極性基團上的離子能與溶液中的離子起交換作用,而非極性的樹脂本身物性不變。通常離子交換樹脂按所帶的基團分為強酸(=R=S03H)、弱(=COOH)、強鹼 (=N+=R:)和弱鹼(=NH2=NHR=NR2)。
離子交換樹脂分離小分子物質如氨基酸、腺苷、腺苷酸等是比較理想的。但對生物大於物質如蛋白質是不適當的,因為它們不能擴散到樹脂的鏈狀結構中。故如分離生物大子、可選用以多糖聚合物如纖維素、葡聚糖為載體的離子交換劑。
本實驗用磺酸陽離子交換樹脂分離酸性氨基酸(天冬氨酸)、中性氨基酸(丙氨酸)鹼性氨基酸(賴氨酸)的混合液。在特定的pH條件下,它們解離程度不同,通過改變脫液的pH或離子強度可分別洗脫分離。
【材料】1.實驗器材層析柱(1.6X20cm);恆流泵;梯度混合器;試管及試管架;紫外分光光度計、磺酸陽離子交換樹脂(Dowex 50)
2.實驗試劑
(1)2mol/L HCl
(2)2mol/L NaOH
(3)0.1mOl/L HCl
(4) 0.1mol/L NaOH
(5)pH4.2的檸檬酸緩沖液:0.lmol/L檸檬酸54m1加0.1mol/L檸檬酸鈉46ml
(6)pH5的醋酸緩沖液:0.2mol/L NaAc 70ml加 0.2mol/L HAc 30ml
(7)0.2%中性茚三酮溶液:0.2g茚三酮加100ml丙酮
(8)氨基酸混合液:丙氨酸、天冬氨酸、賴氨酸各10m1加0.1mol/L HCl 3m【方法】
1. 樹脂的處理
100ml燒杯中置約10g樹脂,加25ml 12mo1/L HCl攪拌2h,傾棄酸液,用蒸餾水充洗滌樹脂至中性。加25ml 12mol/L NaOH至上述樹脂中攪拌2h,傾棄鹼液,用蒸餾水洗滌至中性。將樹脂懸浮於50ml pH4.2檸檬酸緩沖液中備用。
2. 裝柱取直徑0.8cm~1.2cm、長度 10cm~12cm的層析柱,底部墊玻璃棉或海綿圓墊,自頂部注入經處理的上述樹脂懸浮液,關閉層柱出口,待樹脂沉降後,放出過量的溶液,在加入一些樹脂,至樹脂沉積至8cm~10cm高度即可。於柱子頂部繼續加入pH4.2檸檬酸緩沖液洗滌,使流出液pH為4.2為止,關閉柱子出口,保持液面高出樹脂表面1cm左右。
3. 加樣、洗脫及洗脫液收集
打開山口使緩沖液流出,待液面幾乎平齊樹脂表面時關閉出口(不可使樹脂表面乾燥)。用長滴管將15滴氨基酸混合液仔細直接加到樹脂頂部,打開出口使其緩慢流入柱內。當液面剛平樹脂表面時,加入0.1mol/L HCl 3ml,以10滴/min~12滴/min的流速洗脫,收集洗脫液,每管20滴,逐管收存。當HCl液面剛平樹脂表面時,用1m1 pH4.2檸檬酸緩沖液沖洗柱壁一次,接著用2ml pH4.2檸檬酸緩沖液洗脫,保持流速10滴/min~12滴/min並注意勿使樹脂表面乾燥。
在收集洗脫液的過程中,逐管用茚三酮檢驗氨基酸的洗脫情況,方法是:於各管洗脫液中加10滴pH5醋酸緩沖液和10滴中性茚三酮溶液,沸水浴中煮10min,如溶液呈紫藍色,表示已有氨基酸洗脫下來。顯色的深度可代表洗脫的氨基酸濃度,可比色測。
在用pH4.2檸檬酸緩沖液把第二個氨基酸洗脫出來之後,再收集兩管茚三酮反應陰性部分,關閉層析柱出口,將樹脂頂部剩餘的pH4.2檸檬酸緩沖液移去。
於樹脂頂部加入2ml 0.1mo1/L NaOH,打開出口使其緩慢流入柱內,按上面I續用0.1mo1/L NaOH洗脫並逐管收集 (注意仍然保持流速10滴/min~12滴/min),每管20滴。做洗脫液中氨基酸檢驗,在第三個氨基酸用0.1mo1/L NaOH洗脫下來以後,再繼續收集兩管茚三酮反應陰性部分。
最後以洗脫液管號為橫坐標,洗脫液各管光密度(以水作空白,在570nm波長讀取吸光度)或顏色深淺(以 -,±,+,++...表示)為縱坐標作圖,即可畫出一條洗脫曲線。
【注意事項】
1. 一直保持流速10滴/min~12滴/min,並注意勿使樹脂表面乾燥。
2. 在裝柱時必須防止氣泡、分層及柱子液面在樹脂表面以下等現象發生。
④ 離子交換分離法
磺酸型陽離子交換樹脂在稀鹽酸介質中,可吸附鋯氧離子,經1~2mol/LHCl淋洗,僅釷和稀專土留在屬交換柱上,鈦則部分分離,其他多數元素均能分離。再用4mol/LHCl淋洗,即可使鋯與釷和稀土分離。
此外,在鹽酸-過氧化氫溶液中,鋯(鉿)均可吸附於陽離子交換柱上,再用檸檬酸或草酸淋洗可進行定量分離。
某些陰離子交換樹脂在鹽酸溶液中,能吸附鋯、鉿、鈾和鈰,釷不被吸附。在氫氟酸介質中,鋯被吸附而與鋁、鐵分離。
⑤ 離子交換法富集分離陽離子和陰離子的原理各是什麼
離子交換樹脂是利用被分離離子交換能力的差別而實現分離的,一般情況下價內態高的離子選擇系容數大,如鐵離子的交換順序大於鈣離子,具體情況如下:對陽離子的吸附
高價離子通常被優先吸附,而低價離子的吸附較弱。在同價的同類離子中,直徑較大的離子的被吸附較強。一些陽離子被吸附的順序如下:fe3+
>
al3+
>
pb2+
>
ca2+
>
mg2+
>
k+
>
na+
>
h+
對陰離子的吸附
強鹼性陰離子樹脂對無機酸根的吸附的一般順序為:so42->
no3-
>
cl-
>
hco3-
>
oh-
弱鹼性陰離子樹脂對陰離子的吸附的一般順序如下:oh->
檸檬酸根3-
>
so42-
>
酒石酸根2-
>草酸根2-
>
po43-
>no2-
>
cl-
>醋酸根-
>
hco3-