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培養基超濾作用

發布時間:2021-10-27 09:31:26

1. 配備液體培養基時硫酸亞鐵為什麼要過濾除菌

硫酸亞鐵加熱過濾會分解。
FeSO4 =加熱= FeS + 2O2↑ 2. FeSO4 =加熱= FeO + SO2↑ 3. 2FeSO4 =加熱= Fe2O3 + SO2↑+ SO3↑
所以如果用加熱除菌的方法,那麼硫酸亞鐵就在培養基中起不到作用。因此採用過濾除菌的方法。用濾器把雜質和細菌清楚出去,保證無菌狀態,也沒有破壞硫酸亞鐵的成分。
硫酸亞鐵的實驗室製法:
1、可以用鐵粉與稀硫酸反應直接製得。Fe+H2SO4(稀)=H2↑+FeSO4
2、可以用硫酸銅溶液與鐵反應獲得,反應方程式為:CuSO4+Fe=FeSO4+Cu(此反應類型為置換反應)

2. 細胞培養過濾培養基和PBS時所用的0.22的濾膜是水膜還是有機膜或者是混合膜

0.22um除菌濾膜有多種不同的材質,常用的有醋酸纖維素、聚醚碸、PVDF、聚四氟乙烯、尼龍等。若過濾水溶液的濾膜為疏水材質,濾膜表面一般有一層親水配體。過濾細胞培養基常用的濾膜材質為醋酸纖維素和聚醚碸。希望對你有幫助。GOOD LUCK :)

3. 在培養基上接種微生物時的 過濾風 是啥,有啥用

一) 實驗室要求: 1實驗室環境應清潔、衛生、安靜,實驗室內嚴禁吸煙和飲食。 2實驗人員必須穿戴工作衣帽,工作服經常洗滌、消毒、保持清潔。 3操作前後或離開實驗室必須用肥皂或消毒液洗手。 4發生菌液污染檯面或地面,應立即用3%甲醛或5%碳酸等消毒液由外向內傾覆其上,1小時後再擦拭,如為破傷風梭菌,則應隔夜後再擦洗。 5工作衣、帽、口罩受到菌液污染時,應立即脫下使污染部位包裹在內部,高壓滅菌後再清洗。 6如有傳染性培養物污染手部,應先用75%乙醇棉球擦拭,再浸入01新潔爾滅消毒液內泡手,然後再用肥皂及清水徹底洗干凈。 7接種環(針),每次使用前後,必須通過火焰滅菌,冷卻後方可接種培養物,接種帶有蠟質、油質的培養物或菌苔殘留多時,不應立即在火焰上灼燒,應先在內焰里將油質培養物烘乾後再移至火焰上滅菌,以免活菌外濺污染環境及感染操作者。 8帶菌的吸管應浸泡在5%甲酚消毒液內24h後取出清洗,帶菌的試管或培養物應在121℃高壓滅菌後再取出清洗。 9在接種黴菌、放線菌時應在鋪有浸過消毒液的紗布上操作,防止孢子散落傳播。 10凡帶活菌的物品,必須消毒後才能清洗,嚴禁污染下水道。 (二) 無菌操作要求: 無菌操作是指在無菌的環境條件下,使用無菌器材,防止微生物污染的操作技術。即保持待檢樣品在操作時不被污染,又要防止被檢的微生物及陽性對照菌在操作中污染環境或感染操作人員。從事無菌及微生物操作的工作人員必須經過無菌技術及基礎微生物學專業知識的學習及培訓才具備上崗操作的資格,微生物專業檢驗人員也不應該頻繁地變換工作崗位。 1無菌室應每次使用前後用01新潔爾滅消毒液或2%甲醛液擦拭工作檯面及可能污染的死角,濕拖地面,打開無菌空氣過濾器及超凈工作台的開關30分鍾,紫外線殺菌燈照射1小時。 2操作人員用肥皂洗手後進入緩沖間換拖鞋,用75%乙醇棉球擦手,穿戴工作衣帽、口罩。將所需物品剝去牛皮紙及外包裝,從傳遞窗移入操作間,再用01新潔爾滅泡手後進入操作間,在乙醇(或煤氣燈)火焰區(火焰高度3-5cm)操作。 3供試品表面消毒,如為安瓿先用砂輪劃痕後用2%碘酒棉球擦拭,再用75%乙醇棉球擦拭、待干,也可以用消毒液浸泡消毒。

4. 請問制備培養基時如何過濾除菌

1、滅菌方法
培養基的滅菌方法主要有兩種,高壓除菌及.22um微孔濾膜過濾除菌。與過濾相比,高壓滅菌的工作強度小,成本較低,但易造成營養成分的流失,而且在多次加樣(無菌谷氨醯胺溶液,無菌碳酸氫鈉溶液等)過程中容易造成二次污染。大多數培養基採用0.1~0.2μm孔徑的微孔濾膜進行過濾滅菌,並且已成為培養基除菌的發展方向,它可低限度地減少培養基的營養損失。
1.1 高壓滅菌

某些培養基(如MEM)可進行高壓滅菌,例如清大天一的MEM培養基中的MD605、MD609等。這類培養基一般不含有L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉,一般是在培養基高壓滅菌後加入L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉的無菌的液體。另外可高壓的谷氨酸鹽(如L-丙氨醯-L-谷氨醯胺)可代替L-谷氨醯胺。
可高壓滅菌的培養基在121℃、15psi,15分鍾的條件下完全可達到滅菌效果及營養成分的最小損失,不需將滅菌時間延長。為保證高壓滅菌的效果,滅菌設備的驗證很關鍵。
1.2 過濾滅菌
可供過濾滅菌使用的濾膜很多,其材料多為polyethersulphone(PES)、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。一般情況下採取正壓過濾,正壓過濾較之負壓過濾具有流速高、過濾快、不易污染,可避免蛋白質產生大量氣泡等優點。一般使用過濾器可參照各供應商的產品說明書。
目前大多數實驗室和制葯企業採用微孔濾膜濾器(如Zeiss濾器)或立式微孔濾器(Millipore、Pall)除菌。微孔濾膜濾器為不銹鋼,中間可夾放0.22um濾膜。使用這種濾器最重要步驟是安裝濾膜及無菌過濾過程。如在使用Zeiss濾器時,先要用培養用水將濾膜充分潤濕,在安裝濾膜時可在其上放置一層定性濾紙再固定。消毒時旋鈕不要扭太緊,凡與空氣接觸部位都要包好(可用牛皮紙、紗布、無紡布等);高壓滅菌後,在無菌環境中立即將旋鈕扭緊。過濾除菌結束後,要打開濾器,檢查濾膜是否完整,如果濾膜破裂,需重新進行過濾除菌過程。立式微孔濾器可以選用不同的微孔濾柱體積,因為濾膜的折疊,膜面積顯著增大,液體處理量大,而且不容易發生堵塞現象。

5. DMEM培養基為什麼要通過0.2um微膜過濾

DMEM培養基中含有大量的不耐高壓高溫的有機物,無法通過溫度來滅菌,只能通過過濾除菌,而過濾除菌通常採用0.2微米孔徑的過濾膜過濾。

6. 培養基過濾

WC型微孔濾膜使用說明書

本廠用二醋酸——三醋酸纖維素為基材,以流涎法製成微孔濾膜(簡稱MC濾膜),是現在國內新型的一個品種,它克服了目前常用的硝酸—酸酸混合纖維素微孔濾膜(簡稱混合濾膜)的質脆、易斷裂、有靜電吸引、易燃,遇75%以上酒精易膨脹與溶解及在偏鹼性溶液中易產生有毒的硝酸根和亞硝酸根等的不足之處。本廠MC濾膜在國內上百家葯廠、醫院、科研所等廣泛用於大輸液、針劑及各種溶液精濾,使用效果極佳,澄明度合格率普遍提高。目前該產品暢銷全國,深受用戶歡迎。同時微孔濾膜不但用於制葯業,而且在生物製品、醫學微生物學、化工、電子工業、冶金工業、臨床化驗、釀造、鍾表、航空等工業方面超純水的制備、空氣凈化、醫葯用油、潤滑、燃料用油及科研實驗化驗室濾除細菌和微粒方面等將有越來越廣泛的推廣和應用。
一、 要用途
(1) 醫葯工業:用於水針劑,大輸液及結晶前溶液的微粒和細菌過濾,抗菌素、球蛋白,疫苗血清及組織培養等過濾。
(2) 電子工業:用於半導體器件和集成電路車間的空氣凈化,制備洗滌用的高純水質,對溶劑、顯影劑、光刻膠等進行凈化處理。
(3) 日化工業:用於日用化妝品中含乙醇和油脂類溶液的微粒過濾。
(4) 公共衛生:用於飲水過濾,河塘水質細菌過濾檢查、工作地區粉塵微粒過濾檢驗。
(5) 食品工業:飲料果汁、酒類、油類等的滅菌和懸浮雜質的過濾。
(6) 亦可用於無菌檢查——濾膜過濾法及其它科學研究中的分析測定等。
二、 MC型濾膜性能介紹
(1) 孔徑均勻:用汞壓法測定額定孔徑分布均勻,並用放大電鏡掃描圖象分析,額定孔徑基本一致。
(2) 孔隙率高:每平厘米濾膜中可包含一千萬至一億個額定微孔,以孔隙率測定法測得孔隙率在80%以上。
(3) 濾膜透水率高、濾速快:用透水率測定法測得0.8UM微孔濾膜透水率可達215亳升/平方厘米。分,1.2UM透水率可達311亳升/平方厘米。分。
(4) 強度高有韌性,因MC型濾膜生產過程中的三醋酸纖維素分子乙醯化完全、張力強度高,爆破強度法測定厚度0.10~0.15毫米膜,爆破強度≥3公斤/平方厘米,膜有韌性,即使對折數次也不易斷裂,所以使用壽命長。
(5) 濾膜的各向同性:MC型濾膜為各向同性,不分正反面,對額定孔徑以上的固體微粒能起到絕對截留作用。
(6) 熱穩定性:在120度熱壓滅茵30分鍾,熱穩定性良好。
(7) 化學穩定性:可過濾PH2~11各種葯液,還可過濾儀表油、5%醋酸、6N硫酸、6N氫氧化鉀、無水乙醇、丙三醇、甲醇、正丙醇、導丙醇、偏笨三酸三辛酯、聚乙二醇、各種酒類、飲料、醋等。
(8) MC型濾膜還具有無毒、無媒質遷移等優點。
三、 可供規格
孔徑(微米):0.22 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2 3~5
直徑(毫米):Ф25 Ф35 Ф50 Ф100 Ф150 Ф200 Ф300 Ф400 (如需特殊規格可定製)
各種孔徑適用范圍
(1)濾除微粒:應選用0.65um 0.8um 1.2um的濾膜.
(2)濾除細菌:應選用0.45um 0.3um 0.22um的濾膜.
四、 使用方法
(1) 將濾膜於70度左右的蒸餾水中浸泡4小時以上,使用前再用適量新鮮蒸餾水沖洗一二次,然後裝入已洗過的濾器中備用。
(2) 過濾方法:可採用加壓法、真空法或位差液壓法、加壓法的濾速隨著壓力提高而加快,一般不超過3~4公斤/平方厘米,採用抽氣過濾時應防止外界空氣的細菌、微粒污染。利用位差過濾,一般位差應考慮在3~5米以上(約相當於0.5個大氣壓),否則影響濾速。
五、 注意事項
(1) MC型濾膜適宜於PH2~11,對強酸強咸或某些有機溶劑不宜使用。
(2) 本品一般耐溫120度,熱壓30分鍾,耐2~4公斤/平方厘米。
(3) 微孔濾膜只能作為最後過濾階段,濾液必須經過沙濾棒、濾紙、濾球等粗過濾材料,可避免濾膜堵塞。
(4) 操作MC型濾膜時不可觸及尖硬物品,以免引起穿孔現象。在裝濾膜前要嚴格檢查微孔濾膜是否有漏孔,不合格不得使用。

混合纖維素酯微孔濾膜使用說明書

混合纖維素製成的薄膜濾材,經有關單位多次廣泛使用,質量符合標准,其產品表面平滑、質地輕薄、孔隙率高、且微孔結構均勻,因此且有流速快,不易吸附的特點。

一. 用途
本品用於制葯業、生物製品、礦泉飲料、釀造、電子等工業方面的水質、醫葯用油、潤滑用油、燃料用油及科研實驗化驗室等濾除細菌和微粒,一般0。65微米以上可除微粒,0。45以下可濾除細菌。

二. 規格
混合纖維素酯微孔濾膜各種規格如下:
公稱孔徑(直徑微米)0.2 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2
膜片直徑(毫米)25 35 50 60 100 150 200 300 400
(如需特殊規格另行定製)

三. 使用方法
1. 將濾膜平放於清潔盛器內,用70度左右的蒸餾水浸泡,使全部潤濕,數小時後(約4小時以上)傾去水,再用上法浸泡過夜,使用前再用適量溫蒸餾水清洗一次。
2. 將洗清的濾膜(濕)裝入適宜的濾器中,防止周圍漏液,自進液口放進濾液,並在:排氣口排出空氣,即可進行過濾。

四. 注意事項
1. 水膜片適宜於PH2-9的葯液,對強酸鹼或有機溶劑包括酒精等不宜使用。
2. 本品一般能耐溫120度,耐壓3~4公斤/平方厘米。
3. 微孔濾膜只能作為最後階段過濾,濾液必須先經過沙棒或其它濾材預過濾,以免濾膜堵塞。
上述使用方法,僅適用於水劑葯液或其它水溶劑的過濾。

7. 配好的細胞培養基用過濾么

孔徑為0.22微米的濾膜
這種濾膜可以過濾掉細菌和病毒。
孔徑0.45微米的濾膜已經可以過濾掉細菌,但是不能過濾病毒。
為了防止噬菌體污染,一般還是用0.22微米的濾膜比較好。

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