離子交換色譜洗脫劑

A. 離子交換層析中，為什麼用氯離子洗脫陰離子

離子交換層析中，為什麼用氯離子洗脫陰離子
陰離子交換柱的填料是正電填專料,在低鹽條件下可以屬通過電荷相互作用吸附樣品中的陰離子和負電荷物質（如DNA）.這些帶負電的物質由於其帶電量不同,分子大小不同,因而與正電填料之間的結合力也就不同.用梯度的氯離子（一般用氯化鈉梯度,例如從100mM氯化鈉線性梯度升高到1M氯化鈉）洗脫掛柱樣品時,氯離子會和結合上的物質競爭結合正電填料,伴隨著氯離子濃度的不斷升高,氯離子的競爭作用越來越強,與填料結合的物質會按照親和力從弱到強依次洗脫下來,形成獨立的洗脫峰,從而將這些物質分開.
陽離子交換柱與之正好相反,柱子填料為負電荷,用鈉離子洗脫結合的正電物質.

B. 離子交換樹脂的洗脫順序和什麼有關

和樹脂的親和力有關，主要是靜電吸引，其次是疏水作用。

樹脂的交聯度，即樹脂基體版聚合時所用二權乙烯苯的百分數，對樹脂的性質有很大影響。通常，交聯度高的樹脂聚合得比較緊密，堅牢而耐用，密度較高，內部空隙較少，對離子的選擇性較強。

而交聯度低的樹脂孔隙較大，脫色能力較強，反應速度較快，但在工作時的膨脹性較大，機械強度稍低，比較脆而易碎。

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大孔樹脂內部的孔隙又多又大，表面積很大，活性中心多，離子擴散速度快，離子交換速度也快很多，約比凝膠型樹脂快約十倍。使用時的作用快、效率高，所需處理時間縮短。

大孔樹脂還有多種優點耐溶脹，不易碎裂，耐氧化，耐磨損，耐熱及耐溫度變化，以及對有機大分子物質較易吸附和交換，因而抗污染力強，並較容易再生。

交聯度高的樹脂對離子的選擇性較強，大孔結構樹脂的選擇性小於凝膠型樹脂。這種選擇性在稀溶液中較大，在濃溶液中較小。

C. 吸附柱色譜分離中怎麼選擇洗脫劑

在進行吸附柱色譜分離時，應根據樣品的性質、吸附劑的性能、流動相的極性三方面的影響因素加於選擇。一般的選擇規律是：樣品極性較大，在極性吸附劑柱上進行分離，則應選用吸附性較弱（即活性較低）的吸附劑，用極性較大的溶劑進行洗脫。組分的極性較弱，就應選用吸附性較強（即活性較高）的吸附劑，用極性較小的溶劑進行洗脫。
化合物極性與其結構有關。按結構的特徵，各種有機物的極性大小順序為：

烷烴 <烯烴 <醚類 <硝基化合物 <酯類 <酮類 <醛類 <胺類 <醇類 <酚類 <酸類

常用溶劑的極性大小順序為：

石油醚 < 環己烷 < 四氯化碳 < 苯 < 乙醚 < 乙酸乙酯 < 丙酮 < 乙醇 < 水

D. 過離子交換柱時，pH梯度洗脫緩沖液一般用什麼緩沖液

如果不限定純抄化方法，可以考慮親和層析或離子交換，但根據你問題的意思，是選定離子交換。
此時就要考慮你蛋白的等電點了，如果等電點在你穩定pH之上，就用陽離子交換柱：
設計陽離子交換層析：將你的樣品置換到你所指的穩定pH的running
buffer。同時裝柱，平衡，然後上樣，平衡，洗脫（因為你的pH不穩定，建議鹽洗脫），收峰。得你的蛋白；
如果你的等電點在穩定pH之下，就用陰離子交換柱，其步驟如上，只是改變柱子類型。

E. 什麼叫色譜柱，什麼叫離子交換劑，什麼叫固定相啊

色譜是利用待抄分離組分在兩種萃取劑中的分配比差異來進行分離的。 實際操作中，會把一種萃取劑裝填到一根玻璃管或者不銹鋼管里，加上待分離組分以後，用另一種萃取劑去洗脫。 這根裝有萃取劑的管子就是色譜柱，裡面填充的萃取劑因為不會移動，就叫做固定相。聰明的你一定就明白另一種用來洗脫的萃取劑就叫做流動相了。

在離子色譜里不是這么簡單的吸附-洗脫過程 ，而是用離子交換的過程來替代，因此用到的就是離子交換劑，其實也是固定相，但是利用的是離子交換速率的差異了。

F. 離子交換色譜和疏水性相互作用色譜的洗脫原理有何異同

離子交換色譜法是利用離子交換原理和液相色譜技術的結合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種專分離屬分析方法。凡在溶液中能夠電離的物質通常都可以用離子交換色譜法進行分離。現在它不僅適用於無機離子混合物的分離，亦可用於有機物的分離，例如氨基酸、核酸、蛋白質等生物大分子，因此應用范圍較廣。

G. 離子交換色譜的低級問題

會交換一部分，但因為存在競爭的關系，而且也與濃度有關。所以色譜柱會有再生的過程。詳細的建議你去「色譜世界」網站看看，這個網站在色譜方面非常專業，對你會有較大的幫助的。

H. 液相色譜法，吸附色譜中的吸附劑和洗脫劑

首先吸附劑是固定在固定相中的 洗脫劑為所用的流動相 作用是攜帶待測組分在色譜柱內向前移動並流出色譜柱

I. DEAE-52離子交換色譜柱精製多糖 在加洗脫劑前會不會有多糖出來

這個理論上來說是不會有多糖出來的，但是實際上會有很少的部分會流出，這取決於吸附劑的多少，和能力的強弱