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超濾管處理多糖

發布時間:2021-03-10 07:57:39

Ⅰ 怎麼分離多糖和蛋白。要去除多糖,保留蛋白。

1、超濾法:適用於多糖和蛋白的分子量差別比較大的樣品,可以考慮用不同孔徑的小超濾離心管試用結果
2、層析:親和、離子等

Ⅱ 求助:第一次使用超濾離心管應該怎麼處理

可能不同廠家的產品保存運輸條件不一樣。
如果有甘油等保護劑,那就一定要洗干凈再加樣品。版權
乾的超濾管也要先潤濕再用,否則可能不能完全利用膜面積。
最好,用樣品buffer潤洗下再加樣,最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好,使膜充分浸潤。

降低吸附的辦法有:
1,蛋白濃度不要過低
2,盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3,用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗(不影響蛋白活性的前提下)
4,加入保護蛋白,如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中,4C保存,防止長菌,依不同樣品可以重復使用不同的次數。

Ⅲ 超濾是什麼意思超濾膜應用水處理的什麼方面

超濾是什麼?

超濾是以壓力為推動力的膜分離技術之一。以大分子與小分子分離為版目的,膜孔權徑在20-1000A°之間。中空纖維超濾器(膜)具有單位容器內充填密度高,佔地面積小等優點。


超濾膜在水處理方面的應用:

超濾膜作用分別技巧被廣泛天時用於飲用水制備、食物工業、制葯工業、工業廢水處理、金屬加工塗料、生物產物加工、石油加工等范疇。年夜范圍的水處理凡是集中在以下方面:飲用水供水終端、地表水處理、海水處理和污水回用

Ⅳ 多糖會堵超濾膜嗎

是否堵膜考慮兩個方面,1、過濾孔徑大小 2、過濾物質是否會粘附架橋, 多糖分子量一般內不會超過10000 現有容超濾膜截流分子量一般范圍6000-50萬之間(有廠家聲稱可做到2000、3000),如果是單純的多糖溶於水,只要選擇大於多糖分子量的過濾孔徑,一般是不會堵的 其次就是考慮溶液粘度 每個廠家都會根據自己產品特性提粘度要求,一般要求不超過20

Ⅳ 為什麼超濾離心管那麼貴,離心管與超濾離心管的區別

離心管就是抄一個簡單的可以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉澱。
離心超濾管會有一個類似於內管和外管的兩個部分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內管中),就是超濾的原理。。。。常用於濃縮樣品。

Ⅵ 超濾管能用於強鹼或強酸溶液的超濾嗎

1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截留分子量版不應大於目的蛋白分子量的權1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。
然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。
操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。
質量和重心二者都要達到平衡。
注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。
注意,一定要等離心機達到目的轉速之後,方可離開
離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理,後果不可預測。
膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。
在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。

Ⅶ 超濾濃縮離心管使用前要怎麼處理

可能不來同廠家的產品保存運輸條源件不一樣。
如果有甘油等保護劑,那就一定要洗干凈再加樣品。
乾的超濾管也要先潤濕再用,否則可能不能完全利用膜面積。
最好,用樣品buffer潤洗下再加樣,最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好,使膜充分浸潤。

降低吸附的辦法有:
1,蛋白濃度不要過低
2,盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3,用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗(不影響蛋白活性的前提下)
4,加入保護蛋白,如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中,4C保存,防止長菌,依不同樣品可以重復使用不同的次數。

Ⅷ 我們用超濾法提取多糖,多糖分子量是63000和263000,對應的超濾孔徑應該是多少

1、一種玉米浸泡水中提取、提純脂多糖的方法,其特徵是本方法通過分別採用超濾法、等電點法、三氯乙酸法三種方法分離玉米浸泡水中的蛋白質,再用納濾膜將浸泡水濃縮,並通過乙醇沉澱法進一步分離浸泡水中的蛋白質,最後,用活性炭將脂多糖從浸泡水中提取出來:(1)等電點法分離蛋白及普通多糖:用飽和氫氧化鈉溶液調節浸泡水中的PH值到7.3,將浸泡液通過分離機分離,在每分鍾3000轉轉速下離心25分鍾,分離沉澱上清液;(2)超濾法分離蛋白及普通多糖:選用截留分子量10萬的超濾膜,對上述上清液進行超濾,取過濾液;(3)三氯乙酸法分離蛋白及普通多糖:在上述濾液中加入占其體積0.5%的三氯乙酸,攪拌30分鍾,於每分鍾3000轉條件下離心25分鍾,分離出含蛋白及普通多糖的上清液;(4)濃縮:採用納米過濾裝置,將分離蛋白及普通多糖後的浸泡水濃縮6-10倍,經納濾膜過濾,取濃縮後的浸泡水;(5)再分離:在上述濃縮浸泡水中加入濃度為95%的乙醇,使浸泡水中乙醇濃度達到30%,攪拌5分鍾,於每分鍾2600轉下離心30分鍾,分離後取上清液;(6)提取:將上述上清液PH值調整為6.50,加入占其重量1.5-2.5%的經處理的活性炭,攪拌15分鍾,靜置10分鍾,最後過濾,分離取出吸附了脂多糖活性炭;(7)提純:將吸附了脂多糖的活性炭裝填於1.6×90厘米的色譜柱中,用10毫摩爾每升三羥甲基氨基甲烷-鹽酸/10毫摩爾每升氯化鈉進行洗脫,洗脫液流速為每小時8毫升,分步收集洗脫液,每管收集4毫升,共收集52管,將第27~36管洗脫液合並,冷凍乾燥;將DEAE-葡聚糖凝膠A-50裝填於1.6×40厘米的色譜柱中。取上述乾燥產物0.25克,溶於6毫升的10毫摩爾每升三羥甲基氨基甲烷-鹽酸/10毫摩爾每升氯化鈉中,將其加入色譜柱。用濃度依次增加的三羥甲基氨基甲烷-鹽酸/氯化鈉溶液進行洗脫,同時進行分步收集。每管收集6毫升,共收集60根管,洗脫劑流速為每小時8毫升;(8)脫鹽:將第34~52根管的洗脫液合並,用葡聚糖凝膠G-15層析柱進行脫鹽,以超純水洗脫,最後凍幹得到脂多糖成品。

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