① 酵母基因敲除後用回補驗證嗎
通過敲除來研究基因的功能，所謂的敲除不外乎有三種情況：1）單交換插入抗性基因使原基因失活；2）抗性基因雙交換替換掉原基因；3）同框缺失即完整的使原基因敲除掉。第三種情況得到的突變株比較好但篩選工作量很大，前兩種情況因為插入了抗性基因比較好篩選突變子，但是由於外源的插入了抗性基因容易引起polar effect，所以拿到突變株後要做回補實驗來排除是由polar effect引起的，如果是第三種情況得到的突變株不做回補也沒關系，做了會更好。祝實驗順利！