葡聚糖凝膠樹脂幹了能用么

❶ 交聯葡聚糖凝膠的使用方法

1. 乙醇浸泡：
在室溫下，將乾粉浸泡於50-60%乙醇中至少24小時，並不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;
2.無鹽水浸泡：
室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的完全溶脹，然後；
3. 鹽酸浸泡：
在常溫下再用0.2N HCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗至中性；
4. 將溶脹好的凝膠脫氣後（真空抽濾或超聲波）根據裝柱要求一次性置入柱內，注意保持濕態裝柱，並避免柱內產生氣泡或斷層；
5. 上樣前平衡層析柱至少3-5 個柱體積直到記錄儀基線變得平穩為止（流出液的PH值等於上柱的Buffer 的PH值）；
6. 凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調整；脫鹽時上樣量可以達到20% 的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關，柱高控制在40-50cm 以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應當盡可能避免。難分離物質要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1 即可；
7. 洗脫方法：
可以用無鹽水，也可以採用上柱時的緩沖液洗脫；在上柱Buffer 中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以完全分離純化；
8. 在位清洗（CIP）
凝膠使用十次後作一次CIP，目的是去除柱床內沉澱的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h 用1M 氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。