proteing瓊脂糖樹脂

❶ protein g agarose / salmon sperm dna 可用於免疫沉澱嗎

免疫共沉澱相互作用
目蛋白結合Fc蛋白Fc蛋白結合Protein AProtein A結合瓊脂糖基質
SEPHAROSEAGAROSE都瓊脂糖屬於同公司同類型同名稱
所理論都用
建議多看看書
別人的只能參考

❷ 低熔點瓊脂糖凝膠怎麼配製

你好，瓊脂糖凝膠的配製是分子實驗室比較基本的操作，因此正確地操作對整個實驗來講很有必要，大體流程如下：稱量、熔膠、倒膠、拔梳。
1.稱量
我們通常所說的0.8%、1%的膠都是指的質量體積分數，即所稱取的瓊脂糖粉的質量（g）比所加的tbe緩沖液的體積（ml）即膠的濃度。緩沖液的體積根據膠板的大小而定。如小膠板0.8%的膠需要瓊脂粉0.104g，tbe13ml。
2.熔膠
將所稱量的瓊脂粉與tbe在錐形瓶中混合，在微波爐內反復加熱2~3次至瓊脂粉溶解並無氣泡。
3.倒膠
干凈的膠槽內擺好梳子，往膠內滴加1ul左右核酸染料，混勻，待冷卻至不燙手，輕輕倒入膠板內。
4.拔梳.待大約20min後，輕輕拔掉梳子（若不好拔，可以滴加適量的tbe緩沖液）。

❸ 瓊脂糖凝膠電泳時，瓊脂糖的濃度為2%,膠不凝是怎麼回事啊還要繼續增大瓊脂糖的濃度嗎

一般來說1%的濃度就夠了，如果你的樣品分子量比較大，可以用2%的，濃度越大，膠越硬。你做的膠不能拿，用的是TBE緩沖液嗎？配完後，需要加熱至沸騰，然後再冷卻。 還有，你用的是瓊脂粉還是瓊脂糖？做膠用瓊脂糖，配培養基用瓊脂粉。

❹ 免疫磁珠和瓊脂糖珠進行免疫共沉澱的區別

免疫磁珠和瓊脂糖珠進行免疫共沉澱的區別
（1）轉染後24-48 h 可收獲細胞，加入適量細胞裂解緩沖液（含蛋白酶抑制劑），冰上裂解30min, 細胞裂解液於4°C， 最大轉速離心30 min後取上清；
（2）取少量裂解液以備Western blot分析，剩餘裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液，4°C緩慢搖晃孵育過夜；
（3）取10μl protein A 瓊脂糖珠，用適量裂解緩沖液洗3 次，每次3,000 rpm離心3 min；
（4）將預處理過的10μl protein A 瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過夜的細胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h，使抗體與protein A瓊脂糖珠耦聯；
（5）免疫沉澱反應後，在4°C 以3,000 rpm 速度離心3 min，將瓊脂糖珠離心至管底；將上清小心吸去，瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3－4次；最後加入15μl的2×SDS 上樣緩沖液，沸水煮5分鍾；
（6）SDS-PAGE, Western blotting或質譜儀分析。
注意的問題：
（1）細胞裂解採用溫和的裂解條件，不能破壞細胞內存在的所有蛋白質－蛋白質相互作用，多採用非離子變性劑（NP40或Triton X-100)。每種細胞的裂解條件是不一樣的，通過經驗確定。不能用高濃度的變性劑（0.2%SDS)，細胞裂解液中要加各種酶抑制劑，如商品化的cocktailer。
（2）使用明確的抗體，可以將幾種抗體共同使用。
（3）使用對照抗體：

❺ 免疫共沉澱，就是IP，中用的瓊脂糖珠是什麼東西，比如說我要做A蛋白的相關蛋白，

IP是研究兩個蛋白或者一個片段和一個蛋白之間有沒有相互作用的 pull down是研究是否存在該蛋白的 至於前面的問題我還不太確定 應該是作為固相載體分離蛋白的

❻ 瓊脂糖凝膠怎麼配製

把瓊脂糖，即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂，溶於熱水，倒入玻璃杯中，冷卻製成的凝膠。融化後在37°C下可維持液態數小時，30°C時凝固成膠。即完成瓊脂糖凝膠的配置。

製成的小顆粒用於凝膠過濾，適於用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾，若使用5%以下濃度的凝膠，也能夠分級分離細胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點，有時用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內沉降反應的支持物。

(6)proteing瓊脂糖樹脂擴展閱讀：

瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經化學修飾後熔點降低的低熔點瓊脂糖，瓊脂糖的熔點在62〜65°C之間，多用於對染色體DNA在凝膠內進行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠由於孔徑大常用於大分子蛋白質、DNA的分離。

瓊脂由瓊脂糖和瓊脂果膠兩部分組成：

作為膠凝劑的瓊脂糖是不含硫酸酯的非離子型多糖，是形成凝膠的組分，其大分子鏈鏈節著1，3苷鍵交替相連的β-D-半乳糖殘基和3,6-內醚-L-半乳糖殘基 。而瓊脂果膠是非凝膠部分，是帶有硫酸酯、葡萄糖醛酸和丙酮酸醛的復雜多糖，也是商業提取中力圖去掉的部分。

商品瓊脂一般帶有2%～7%的硫酸酯，0%～3%的丙酮酸醛及1%～3%的甲乙基。在工業上的瓊脂 色澤由白到微黃，具有膠質感，無氣味或有輕微的特徵性氣味，瓊脂不溶於冷水，易溶於沸水。

瓊脂系選用優質天然石花菜、江蘺菜、紫菜等海藻為原料，採用科學方法精煉提純的天然高分子多糖物質。

瓊脂為親水性膠體，分有條狀和粉末狀，不溶於冷水，易溶於熱水。瓊脂在工業上具有獨特的重要性，瓊脂的濃度即使低至1%仍能形成相當穩定的凝膠，是食品工業、化學工業、醫學科研所必需之原料。

❼ 請問高手，免疫共沉澱中protein A 瓊脂糖珠的作用原理謝謝

prorein
A或者
Protein
G能特異性地結合到免疫球蛋白的FC片段，所以能和抗體結合，抗體和你的目標蛋白結合，目標蛋白和相互作用的蛋白結合。

❽ 請問高手，免疫共沉澱中protein A 瓊脂糖珠的作用原理謝謝

protein A 可以特異性的和IgG結合。

❾ 免疫共沉澱中proteinA/G的工作原理Western blot中封閉原理

我說下個人理解，我認為加入ProteinA/G是一方面與抗體結合，另一部位與瓊脂糖珠子結合，便於後續分離，至於問題2我就不清楚了

❿ protein g與fc哪一段結合

hi-trap是柱子的型號
protein G是填料的名字，是來自G鏈球菌組的細胞表面蛋白偶聯在瓊脂糖基質上。protein G通過非免疫機制結合抗體的Fc區域。protein G可以特異性的結合IgG的Fc區域，但是對於一些多克隆抗體IgGs對人源的IgG抗體能夠有更強的結合。