『壹』 牛奶里酪蛋白的提取實驗里遇到一個問題
冷靜下來，好好考慮一下過去所學的知識及技能，我不相信你沒辦法做下去。
沒有乙醚可以不做專這一步，乙醇也能部屬分去脂；沒有離心更好，免得離心後產品因離心在試管底部緻密沉積，採用震盪的方法處理，時間延長；震盪後傾入濾紙過濾即可乾燥。
『貳』 在制備酪蛋白過程中,在第一步中用緩沖液洗滌沉澱與用蒸餾水洗滌沉澱提取酪蛋白理論上是不是應該緩沖液那個
從牛奶中分離酪蛋白和乳糖
一、引言
牛奶中主要的蛋白質是酪蛋白，含量約為35g/l。酪蛋白在乳中是以酪蛋白酸鈣-磷酸鈣復合體膠粒存在，
膠粒直徑約為20～800納米，平均為100納米。在酸或凝乳酶的作用下酪蛋白會沉澱，加工後可製得乾酪或乾酪素。本實驗利用加酸，當達到酪蛋白等電點PH=4.7時，酪蛋白沉澱。脫脂乳中除去酪蛋白後剩下的液體為乳清，在乳清中含有乳白蛋白和乳球蛋白，還有溶解狀態的乳糖，乳中糖類的99.8%以上是乳糖，可通過濃縮、結晶製取乳糖。
二、實驗材料和試劑
脫脂乳或脫脂奶粉。
醋酸-醋酸鈉緩沖溶液（PH=4.7），95%乙醇，乙醚，碳酸鈣粉末，苯肼試劑。
三、實驗步驟
1. 從牛奶中分離酪蛋白
在燒杯中加入2g脫脂奶粉，再加入40ml40℃，PH=4.7的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液40ml，
用PH精密試紙檢驗液體的PH值。靜置冷卻至室溫，傾去上層清液（留作分離乳糖用），剩下的懸浮液分別裝入兩支離心試管中，用轉速為2000轉/分離心分離3～5分鍾，傾出上層清液，（合並於上一清液中），得酪蛋白粗品。於離心管中加入5ml蒸餾水，用玻棒充分攪拌，洗滌除去其中的水溶性雜質（如乳清蛋白，乳糖以及殘留的緩沖溶液），離心後棄去上層液，再用蒸餾水洗一次。於試管中加入5ml95%乙醇，充分攪拌，離心後棄去乙醇溶液，用乙醇洗滌主要是除去磷脂類物質。最後再用5ml乙醚以同樣方法洗滌，以除去脂肪類物質。將酪蛋白沉澱物涼干，稱重、並計算得率。
2. 從牛奶中分離乳糖
在除去酪蛋白的乳清中，加入1.5g CaCO3粉末，攪拌均勻後加熱至沸。加CaCO3的目的一方面是中和溶液的酸性，防止加熱時乳糖水解，另方面又能使乳白蛋白沉澱。過濾除去沉澱，在濾液中加入1～2粒沸石，加熱濃縮至3～5ml，加入10ml 95%乙醇（注意離開火焰）和少量活性炭，攪拌均勻後在水浴上加熱至沸騰，趁熱過濾，濾液必須澄清。加塞放置過夜，乳糖結晶析出，抽濾，用95%乙醇洗滌產品。
3. 乳糖成脎試驗
取自製乳糖溶於少量水中，濃度約為5%，在試管中加入1ml乳糖溶液，1ml苯肼試劑①，搖勻，試管口用棉花塞住，在沸水浴中加熱，並不時振搖，加熱10～15分鍾後，取出放置冷卻，乳糖脎成結晶析出。取少量乳糖脎在顯微鏡下觀察其結晶形態，可證實為乳糖。
①苯阱試劑有毒，小心使用，勿觸及皮膚，如觸及皮膚先用稀醋酸洗，再用水洗。
另外附上：
蛋白質分離純化的一般程序可分為以下幾個步驟：
（一）材料的預處理及細胞破碎
分離提純某一種蛋白質時，首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來並保持原來的天然狀態，不喪失活性。所以要採用適當的方法將組織和細胞破碎。常用的破碎組織細胞的方法有：
1. 機械破碎法
這種方法是利用機械力的剪切作用，使細胞破碎。常用設備有，高速組織搗碎機、勻漿器、研缽等。
2. 滲透破碎法
這種方法是在低滲條件使細胞溶脹而破碎。
3. 反復凍融法
生物組織經凍結後，細胞內液結冰膨脹而使細胞脹破。這種方法簡單方便，但要注意那些對溫度變化敏感的蛋白質不宜採用此法。
4. 超聲波法
使用超聲波震盪器使細胞膜上所受張力不均而使細胞破碎。
5. 酶法
如用溶菌酶破壞微生物細胞等。
(二) 蛋白質的抽提
通常選擇適當的緩沖液溶劑把蛋白質提取出來。抽提所用緩沖液的pH、離子強度、組成成分等條件的選擇應根據欲制備的蛋白質的性質而定。如膜蛋白的抽提，抽提緩沖液中一般要加入表面活性劑（十二烷基磺酸鈉、tritonX-100等），使膜結構破壞，利於蛋白質與膜分離。在抽提過程中，應注意溫度，避免劇烈攪拌等，以防止蛋白質的變性。
（三）蛋白質粗製品的獲得
選用適當的方法將所要的蛋白質與其它雜蛋白分離開來。比較方便的有效方法是根據蛋白質溶解度的差異進行的分離。常用的有下列幾種方法：
1. 等電點沉澱法
不同蛋白質的等電點不同，可用等電點沉澱法使它們相互分離。
2. 鹽析法
不同蛋白質鹽析所需要的鹽飽和度不同，所以可通過調節鹽濃度將目的蛋白沉澱析出。被鹽析沉澱下來的蛋白質仍保持其天然性質，並能再度溶解而不變性。
3. 有機溶劑沉澱法
中性有機溶劑如乙醇、丙酮，它們的介電常數比水低。能使大多數球狀蛋白質在水溶液中的溶解度降低，進而從溶液中沉澱出來，因此可用來沉澱蛋白質。此外，有機溶劑會破壞蛋白質表面的水化層，促使蛋白質分子變得不穩定而析出。由於有機溶劑會使蛋白質變性，使用該法時，要注意在低溫下操作，選擇合適的有機溶劑濃度。
（四）樣品的進一步分離純化
用等電點沉澱法、鹽析法所得到的蛋白質一般含有其他蛋白質雜質，須進一步分離提純才能得到有一定純度的樣品。常用的純化方法有：凝膠過濾層析、離子交換纖維素層析、親和層析等等。有時還需要這幾種方法聯合使用才能得到較高純度的蛋白質樣品。