㈠ 生物實驗的玻璃儀器
玻璃燒杯,三角燒瓶,玻璃培養皿,玻璃試管,透氣硅膠塞,碘量瓶,廣口瓶,滴瓶,膠頭滴管,試劑瓶,下口瓶,龍頭瓶,抽濾瓶,玻璃乾燥器,玻璃缸(帶蓋),短徑玻璃漏,長徑玻璃漏斗,酒精燈,稱量瓶,酸用滴定管,鹼用滴定管,玻璃量筒,容量瓶,容量瓶,刻度玻璃移液管,移液管架,溫度計,玻璃棒,毛細管,載玻片,蓋玻片
石英亞沸蒸餾水可用於極譜催化法,陽極溶出伏安法、差肪沖極譜、微服技術分析專、中子活化分析、同屬位素稱釋、火花源質譜、化學電離質譜、電感藉合等源的原子發射光譜、無焰原子吸收光譜、氣相色譜、及高壓氣相色譜、核子共振、電子探針、X射線熒光、電子熊譜學俄顯電子能諾學等用水
石英亞沸高純水蒸餾器原理是利用大自然的熱輻射原理,保持液相溫度低於沸點溫度蒸發冷凝而製取高純水。在提純過程中因冷凝空間溫度高可製取無菌無熱超純水,加熱絲封閉在殼體內,接受水又不接觸空氣,整個提純過程不受環境污染。
㈢ 關於微量元素的論文
磨盤草微量元素的初級形態分析 收費畢業論文 [2010-08-23 04:14] 4 作者:張燕,張洪斌,陳忠蔭,林偉,胡海強 【摘要】 目的對磨盤草微量元素的初級形態進行分析。方法用電感耦合等離子體質譜法測定了磨盤草中Ca,Mg,Zn,Fe,Mn,Cu,Ni,Cr的含量,並進行了初級形態研究。結果初級形態結果表明,8種元素在原葯中的含量特徵如下:CaMg - 作者:張燕,張洪斌,陳忠蔭,林偉,胡海強【摘要】 目的對磨盤草微量元素的初級形態進行分析。方法用電感耦合等離子體質譜法測定了磨盤草中Ca,Mg,Zn,Fe,Mn,Cu,Ni,Cr的含量,並進行了初級形態研究。結果初級形態結果表明,8種元素在原葯中的含量特徵如下:Ca>Mg>Zn>Fe>Mn>Cu>Ni>Cr;總提取率中Mg超過了50%,其次是Ni(39.05%),其他元素均在35%以下;各元素殘留率中,Zn、Cu、Ca的頭煎殘留率最高(86.48%,80.63%,80.54%),Mg的頭煎殘留率最低(60.08%);Cu的顆粒吸附率最高。結論為進一步探討磨盤草微量元素與葯效之間的關系提供了參考依據。 【關鍵詞】 磨盤草; 微量元素; 初級形態Abstract:ObjectiveTo analyze the primary speciation of trace elements in Abutilon indicum (L.) Sweet. MethodsThe contents of Ca, Mg, Zn, Fe, Mn, Cu, Ni and Cr of Abutilon indicum (L.) Sweet were determined by ICP-MS,and their primary speciation was studied. ResultsThe results of primary speciation showed that the content characters of eight trace elements in primary sample were as follows: Ca>Mg>Zn>Fe>Mn>Cu>Ni>Cr. The total extraction rate of Mg was more than 50% , the next was Ni (39.05%) and those of the rest elements were less than 35%. The first decocted resial rates of Zn, Cu and Ca were higher (86.48%,80.63% and 80.54%) than those of other elements, the first decocted resial rate of Mg was the least(60.08%). The absorption rate of Cu was the highest . ConclusionThe study provides reference information for further study of the relationship between the trace element and the medicine efficacy in Abutilon indicum (L.) Sweet.Key words:Abutilon indicum (L.) Sweet; Trace elements; Primary speciation
研究和開發中草葯內的微量元素是現代中醫臨床的重要課題。現代研究表明,中草葯中的微量元素的含量與形態影響其葯理、毒理、生物學活性和生物利用率[1], 因此對元素作用的研究,不但要對元素的總量進行分析,更重要的是對元素的存在形態進行研究[2]。磨盤草Abutilon indicum (L.) Sweet為錦葵科苘麻屬植物,為一年生或多年生亞灌木狀草本,全草入葯。甘淡平,疏風清熱、益氣通竅、祛痰、利尿,用於治療感冒、久熱不退、流行性腮腺炎、耳鳴、耳聾、肺結核、小便不利。全草含有萜類、甾類、酚類、黃酮苷、氨基酸、有機酸和糖等。生於砂地、曠野或路旁,分布於廣西、廣東、海南、貴州、雲南、福建、台灣等地[3]。目前對磨盤草的研究集中在葯理作用、化學成分方面[4,5],而對磨盤草微量元素形態分析的研究未見報道。因此,本研究結合中草葯中微量元素形態分析的層次模式,用ICP-MS法對磨盤草的8種微量元素進行了初級形態分析,計算了有關形態分析參數,為磨盤草葯效功能的進一步的開發與利用、探究微量元素的含量和形態與葯效之間的關系提供科學依據。1 器材1.1 儀器X7型電感耦合等離子體質譜儀(美國熱電公司);1810-B型石英雙重純水蒸餾器(上海雷磁儀器廠);FA1604型電子天平(上海天平儀器廠);TG16台式高速離心機(湖南儀器儀表總廠離心機廠);SKP-01電熱恆溫乾燥箱(湖北省黃石市醫療器械廠);0.45 μm濾膜(上海市新亞凈化器件廠)。
試驗中所用玻璃器皿均用10% HNO3浸泡清洗。1.2 試劑HNO3,HClO4均為優級純;實驗水均為二次蒸餾水;鎂、鈣、鐵、鋅、鉻、錳、鎳、銅標准儲備液(濃度均為100 mg·L-1),使用時配製至所需濃度。1.3 材料磨盤草(采自五指山市文化村),經瓊州學院生命科學系林偉教授鑒定為磨盤草Abutilon indicum (L.) Sweet全草。2 方法2.1 樣品制備2.1.1 干樣的制備 將磨盤草用二次蒸餾水洗凈,置於60℃烘箱中烘乾至恆重,在葯物粉碎機上粉碎,過40目篩,得到原葯樣品。2.1.2 煎液制備將原葯樣品准確稱取50 g(原葯A)置於燒杯中加二次蒸餾水250 ml,浸泡1 h,煮沸,然後用文火保持微沸40 min。稍冷,用4層紗布濾擰,再用約20 ml熱二次蒸餾水淋洗3次,濾液濃縮後定容於50 ml容量瓶中,得到頭煎殘渣B和相當於原葯1.00 g·ml-1頭煎液C。
殘渣B烘乾稱重,1/5留著用於直接測試的頭渣B試樣。另4/5加二次蒸餾水100 ml,煮沸,文火保持微沸30 min,用紗布過濾同前操作,得殘渣D及二煎液E。E濃縮定容於40 ml(E為相當於原葯1.00 g·ml-1二煎液)。將殘渣D烘乾稱重,作為測定的二煎殘渣D試樣。
取C、E溶液各25 ml,充分混勻,高速離心之後,離心液用0.45 μm微孔濾膜抽濾,濾液為F (相當於原葯0.50 g·ml-1 ),即可溶態。離心及濾膜上殘渣烘乾,准確稱重,得到用於測試的顆粒物G試樣。2.2 樣品分析2.2.1 測定條件 以鎂、鈣、鐵、鋅、鉻、錳、鎳、銅等8種元素,濃度分別為0,20,50,100 μg·l-1的混合標准系列溶液,按ICP-MS儀器的優化工作參數(見表1),測定信號強度,建立各元素的標准工作曲線。表1 ICP-MS工作參數(略)2.2.2 樣品測定準確稱取原葯A、殘渣B、D、顆粒物G各0.5 g置於50 ml燒杯中,另取C10.00 ml、E10.00 ml分別濃縮至5ml。在A、B、D 和G,濃縮的C、E中分別加入混合酸(HNO3∶HClO4 = 4∶1) 20 ml,放置過夜,在電爐上消化,加熱先產生棕色煙霧再蒸發至白煙冒盡,溶液澄清透亮近干,加入2%HNO3,冷卻,轉移至50ml容量瓶中,定容備用。按工作條件用電感耦合等離子體質譜法測定元素含量。3 結果3.1 分析方法的精密度和准確度採用ICP-MS建立的分析方法,標准曲線的線性相關系數為0.999 7~1.000 0之間。該方法測定磨盤草中微量元素含量的RSD為0.3%~4.8%。該方法測定了國家一級標准物質灌木枝葉(GBW07603)中微量元素含量,回收率在89.2%~110.6%之間。由此可見,實驗所建立的分析方法線性好,精密度高,可靠性好。3.2 葯物浸出情況按初級形態分析流程得到的頭渣B、二渣D和顆粒物G烘乾稱重,得到磨盤草浸出結果如表2所示。其中:
頭煎浸出率(%) =(WA-WB)/ WA×100%
總浸出率(%)=(WA-WD)/WA×100%3.3 初級形態分析3.3.1 初級形態測定結果在測出磨盤草原葯中微量元素種類和含量的基礎上,再測定按初級形態分析流程制備的試樣中各成分的含量。結果見表3。表3 初級形態分析測定結果(略)3.3.2 形態分析參數根據周天澤對形態分析的探討[6],各形態分析參數導出如下:令Wi、Pi(i=A、B......G)分別表示某級份的總重量及某元素在該級份中的含量。
頭煎提取率T1= (WC×PC)/(WA×PA)×100%;二煎提取率T2= (WE×PE)/(WA×PA)×100%;頭煎殘留率L1= (WB×PB)/(WA×PA)×100%;二煎殘留率L2= (WD×PD)/(WA×PA)×100%;顆粒吸附率U=(WG×PG)/(WA×PA)×100%;總提取率T = T1+T2;頭煎浸留比Q1= T1/L1;二煎浸留比Q2= T2/L2;總浸留比Q = T/L2。
本實驗固體級份單位為g,液體級份體積以ml計,含量單位均為μg/g或μg/ml。同時根據物料平衡,T1+L1=T1+T2+L2=100%。由形態分析結果算出有關參數見表4。表4 初級形態分析參數(略)4 討論
初級形態分析目的是探討中草葯服用劑型中哪些元素在發揮作用。中葯水煎液(湯劑)是傳統常用劑型,水煎液中微量元素的含量才是實際服入的量,因此研究中葯水煎液中微量元素的存在形態對探討中葯真正的有效成分及葯理作用具有重要意義。從表3的結果可見,8種元素在原葯、渣和煎汁中的含量差別很大。其總含量特徵如下:Ca>Mg>Zn>Fe>Mn>Cu>Ni>Cr,說明中草葯中不同元素具有一定比例,處於一個相對的元素平衡體系中。和原葯相比,除鎂外,其他元素頭渣和二渣的含量均大於原葯含量,表明這些元素以某種結合形態吸附在渣體中不易浸出,相應鎂更易浸出。在表3的結果中,所有元素的顆粒物濃度均較大,說明它們明顯吸附於膠體上。從顆粒物來看,鈣、鎂、鐵的濃度較高,可能與它們水解產生的沉澱吸附在顆粒上有關。
形態分析參數在於對形態作出定量的表徵,反映某一元素在葯渣及煎汁中的不同分布,各參數中以提取率和浸留比最重要。提取率表示該葯的實際服用部分,是其葯效或毒性的作用量,所以水煎液中微量元素提取率是制定中葯劑量或考察其毒性的重要依據。浸留比則為該元素發揮葯效的標度,浸留比最大的元素,可以認為是該葯中作用最大的元素[6]。表4表明,各元素頭煎提取率雖然都高於二煎提取率,但二煎提取率仍然較大,說明傳統中葯煎煮方式(一般為3次)是有其科學道理的。總提取率中只有Mg超過了50%,其次是Ni(39.05%),其它元素的提取率較低,小於35%。而各元素殘留率中,Zn,Cu,Ca的頭煎殘留率最高,其次是Mn,Fe,Cr,Ni, Mg的頭煎殘留率最低(60.08%),表明葯渣中還有相當多可再利用的微量元素。鎂的浸留比最大,說明這8種元素中鎂為作用最大元素或是最特徵的元素。顆粒吸附率最大的是銅,其次是錳、鐵,可能與其水解有關。
研究磨盤草微量元素的初級形態,可為進一步探討磨盤草微量元素與葯效之間的關系提供依據。【參考文獻】
[1]弓曉峰,謝明勇,楊妙峰,等.黑靈芝中微量元素的形態分布[J].理化檢驗·化學分冊,2005,41(7):461.
[2]胡雪梅,郭榮輝,李 暉. 川芎中鋅、錳、鐵、鈣、鎂元素的次級形態分析[J].微量元素與健康研究, 2005, 22(1): 16.
[3]中華本草編委會. 中華本草(第14卷)[M]. 上海:上海科學技術出版社,1999:336.
[4]劉娜,賈凌雲,孫啟時. 中葯磨盤草的化學成分[J].沈陽葯科大學學報,2009,26(3):196.
[5]Matlawska I,Sikorska M. Flavonoid compounds in the flowers of Abutilon indicum (L.)Sweet (Malvaceae)[J].Acta Poloniae Pharmaceutica,2002,59(3):227.
[6]周天澤. 中草葯微量元素形態分析的幾個問題[J].中草葯,1990,21(10):37.
㈣ 詳細介紹多效蒸餾器的工作原理及操作使用方法
太陽能海抄水蒸餾器 主題詞或關鍵詞: 太陽能 能源科學 蒸餾器 內容第二次世界大戰中,美國國防部製造了許多軍用海水淡化急救裝置,供飛行員和船員落水後取水用,這種裝置實際上是一種簡易的太陽能蒸餾容器。
對於微小的壓力降就會引起蒸汽的流動。在1mbar下運行要求在沸騰面和冷凝面之間非常短的距離,基於這個原理製作的蒸餾器稱為短程蒸餾器。短程蒸餾器(分子蒸餾)有一個內置冷凝器在加熱面的對面,並使操作壓力降到0.001mbar。
㈤ 石英自動雙重純水蒸餾器的作用
石英自動雙重抄純水蒸餾器制出的蒸餾水可用於極譜催化法,陽極溶出伏安法、差肪沖極譜、微服技術分析、中子活化分析、同位素稱釋、火花源質譜、化學電離質譜、電感藉合等源的原子發射光譜、無焰原子吸收光譜儀、氣相色譜儀、及高壓氣相色譜儀、核子共振、電子探針、X射線熒光、電子熊譜學俄顯電子能諾學等用水--精達儀器在線問答為你解答
㈥ 如何選擇蒸餾器
蒸餾器的選擇是要看你的需求,例如實驗室的和一般的就不一樣,這得分情況,具體情況請加
QQ296555828他將會專業幫您解答
㈦ 石英高超純水蒸餾器原理,是否發生化學發應
用蒸餾方法制備的純水。可分一次和多次蒸餾水。水經過一次蒸餾,不揮發的組分(鹽類)殘留在容器中被除去,揮發的組分(氨、二氧化碳、有機物)進入蒸餾水的初始餾分中,通常只收集餾分的中間部分,約佔60%。要得到更純的水,可在一次蒸餾水中加入鹼性高錳酸鉀溶液,除去有機物和二氧化碳;加入非揮發性的酸(硫酸或磷酸),使氨成為不揮發的銨鹽。由於玻璃中含有少量能溶於水的組分,因此進行二次或多次蒸餾時,要使用石英蒸餾器皿,才能得到很純的水,所得純水應保存在石英或銀制容器內。
理論上蒸餾是物理變化,實際上在加入葯品過程中發生的是化學變化
㈧ 烏骨藤裡面Mg、Zn、Cr、Ni含量多嗎
磨盤草微量元素的初級形態分析 收費畢業論文 [2011-08-23 04:14] 4 作者:張燕,張洪斌,陳忠蔭,林偉,胡海強 【摘要】 目的對磨盤草微量元素的初級形態進行分析。方法用電感耦合等離子體質譜法測定了磨盤草中Ca,Mg,Zn,Fe,Mn,Cu,Ni,Cr的含量,並進行了初級形態研究。結果初級形態結果表明,8種元素在原葯中的含量特徵如下:CaMg - 作者:張燕,張洪斌,陳忠蔭,林偉,胡海強【摘要】 目的對磨盤草微量元素的初級形態進行分析。方法用電感耦合等離子體質譜法測定了磨盤草中Ca,Mg,Zn,Fe,Mn,Cu,Ni,Cr的含量,並進行了初級形態研究。結果初級形態結果表明,8種元素在原葯中的含量特徵如下:Ca>Mg>Zn>Fe>Mn>Cu>Ni>Cr;總提取率中Mg超過了50%,其次是Ni(39.05%),其他元素均在35%以下;各元素殘留率中,Zn、Cu、Ca的頭煎殘留率最高(86.48%,80.63%,80.54%),Mg的頭煎殘留率最低(60.08%);Cu的顆粒吸附率最高。結論為進一步探討磨盤草微量元素與葯效之間的關系提供了參考依據。 【關鍵詞】 磨盤草; 微量元素; 初級形態Abstract:ObjectiveTo analyze the primary speciation of trace elements in Abutilon indicum (L.) Sweet. MethodsThe contents of Ca, Mg, Zn, Fe, Mn, Cu, Ni and Cr of Abutilon indicum (L.) Sweet were determined by ICP-MS,and their primary speciation was studied. ResultsThe results of primary speciation showed that the content characters of eight trace elements in primary sample were as follows: Ca>Mg>Zn>Fe>Mn>Cu>Ni>Cr. The total extraction rate of Mg was more than 50% , the next was Ni (39.05%) and those of the rest elements were less than 35%. The first decocted resial rates of Zn, Cu and Ca were higher (86.48%,80.63% and 80.54%) than those of other elements, the first decocted resial rate of Mg was the least(60.08%). The absorption rate of Cu was the highest . ConclusionThe study provides reference information for further study of the relationship between the trace element and the medicine efficacy in Abutilon indicum (L.) Sweet.Key words:Abutilon indicum (L.) Sweet; Trace elements; Primary speciation
研究和開發中草葯內的微量元素是現代中醫臨床的重要課題。現代研究表明,中草葯中的微量元素的含量與形態影響其葯理、毒理、生物學活性和生物利用率[1], 因此對元素作用的研究,不但要對元素的總量進行分析,更重要的是對元素的存在形態進行研究[2]。磨盤草Abutilon indicum (L.) Sweet為錦葵科苘麻屬植物,為一年生或多年生亞灌木狀草本,全草入葯。甘淡平,疏風清熱、益氣通竅、祛痰、利尿,用於治療感冒、久熱不退、流行性腮腺炎、耳鳴、耳聾、肺結核、小便不利。全草含有萜類、甾類、酚類、黃酮苷、氨基酸、有機酸和糖等。生於砂地、曠野或路旁,分布於廣西、廣東、海南、貴州、雲南、福建、台灣等地[3]。目前對磨盤草的研究集中在葯理作用、化學成分方面[4,5],而對磨盤草微量元素形態分析的研究未見報道。因此,本研究結合中草葯中微量元素形態分析的層次模式,用ICP-MS法對磨盤草的8種微量元素進行了初級形態分析,計算了有關形態分析參數,為磨盤草葯效功能的進一步的開發與利用、探究微量元素的含量和形態與葯效之間的關系提供科學依據。1 器材1.1 儀器X7型電感耦合等離子體質譜儀(美國熱電公司);1810-B型石英雙重純水蒸餾器(上海雷磁儀器廠);FA1604型電子天平(上海天平儀器廠);TG16台式高速離心機(湖南儀器儀表總廠離心機廠);SKP-01電熱恆溫乾燥箱(湖北省黃石市醫療器械廠);0.45 μm濾膜(上海市新亞凈化器件廠)。
試驗中所用玻璃器皿均用10% HNO3浸泡清洗。1.2 試劑HNO3,HClO4均為優級純;實驗水均為二次蒸餾水;鎂、鈣、鐵、鋅、鉻、錳、鎳、銅標准儲備液(濃度均為100 mg·L-1),使用時配製至所需濃度。1.3 材料磨盤草(采自五指山市文化村),經瓊州學院生命科學系林偉教授鑒定為磨盤草Abutilon indicum (L.) Sweet全草。2 方法2.1 樣品制備2.1.1 干樣的制備 將磨盤草用二次蒸餾水洗凈,置於60℃烘箱中烘乾至恆重,在葯物粉碎機上粉碎,過40目篩,得到原葯樣品。2.1.2 煎液制備將原葯樣品准確稱取50 g(原葯A)置於燒杯中加二次蒸餾水250 ml,浸泡1 h,煮沸,然後用文火保持微沸40 min。稍冷,用4層紗布濾擰,再用約20 ml熱二次蒸餾水淋洗3次,濾液濃縮後定容於50 ml容量瓶中,得到頭煎殘渣B和相當於原葯1.00 g·ml-1頭煎液C。
殘渣B烘乾稱重,1/5留著用於直接測試的頭渣B試樣。另4/5加二次蒸餾水100 ml,煮沸,文火保持微沸30 min,用紗布過濾同前操作,得殘渣D及二煎液E。E濃縮定容於40 ml(E為相當於原葯1.00 g·ml-1二煎液)。將殘渣D烘乾稱重,作為測定的二煎殘渣D試樣。
取C、E溶液各25 ml,充分混勻,高速離心之後,離心液用0.45 μm微孔濾膜抽濾,濾液為F (相當於原葯0.50 g·ml-1 ),即可溶態。離心及濾膜上殘渣烘乾,准確稱重,得到用於測試的顆粒物G試樣。2.2 樣品分析2.2.1 測定條件 以鎂、鈣、鐵、鋅、鉻、錳、鎳、銅等8種元素,濃度分別為0,20,50,100 μg·l-1的混合標准系列溶液,按ICP-MS儀器的優化工作參數(見表1),測定信號強度,建立各元素的標准工作曲線。表1 ICP-MS工作參數(略)2.2.2 樣品測定準確稱取原葯A、殘渣B、D、顆粒物G各0.5 g置於50 ml燒杯中,另取C10.00 ml、E10.00 ml分別濃縮至5ml。在A、B、D 和G,濃縮的C、E中分別加入混合酸(HNO3∶HClO4 = 4∶1) 20 ml,放置過夜,在電爐上消化,加熱先產生棕色煙霧再蒸發至白煙冒盡,溶液澄清透亮近干,加入2%HNO3,冷卻,轉移至50ml容量瓶中,定容備用。按工作條件用電感耦合等離子體質譜法測定元素含量。3 結果3.1 分析方法的精密度和准確度採用ICP-MS建立的分析方法,標准曲線的線性相關系數為0.999 7~1.000 0之間。該方法測定磨盤草中微量元素含量的RSD為0.3%~4.8%。該方法測定了國家一級標准物質灌木枝葉(GBW07603)中微量元素含量,回收率在89.2%~110.6%之間。由此可見,實驗所建立的分析方法線性好,精密度高,可靠性好。3.2 葯物浸出情況按初級形態分析流程得到的頭渣B、二渣D和顆粒物G烘乾稱重,得到磨盤草浸出結果如表2所示。其中:
頭煎浸出率(%) =(WA-WB)/ WA×100%
總浸出率(%)=(WA-WD)/WA×100%3.3 初級形態分析3.3.1 初級形態測定結果在測出磨盤草原葯中微量元素種類和含量的基礎上,再測定按初級形態分析流程制備的試樣中各成分的含量。結果見表3。表3 初級形態分析測定結果(略)3.3.2 形態分析參數根據周天澤對形態分析的探討[6],各形態分析參數導出如下:令Wi、Pi(i=A、B......G)分別表示某級份的總重量及某元素在該級份中的含量。
頭煎提取率T1= (WC×PC)/(WA×PA)×100%;二煎提取率T2= (WE×PE)/(WA×PA)×100%;頭煎殘留率L1= (WB×PB)/(WA×PA)×100%;二煎殘留率L2= (WD×PD)/(WA×PA)×100%;顆粒吸附率U=(WG×PG)/(WA×PA)×100%;總提取率T = T1+T2;頭煎浸留比Q1= T1/L1;二煎浸留比Q2= T2/L2;總浸留比Q = T/L2。
本實驗固體級份單位為g,液體級份體積以ml計,含量單位均為μg/g或μg/ml。同時根據物料平衡,T1+L1=T1+T2+L2=100%。由形態分析結果算出有關參數見表4。表4 初級形態分析參數(略)4 討論
初級形態分析目的是探討中草葯服用劑型中哪些元素在發揮作用。中葯水煎液(湯劑)是傳統常用劑型,水煎液中微量元素的含量才是實際服入的量,因此研究中葯水煎液中微量元素的存在形態對探討中葯真正的有效成分及葯理作用具有重要意義。從表3的結果可見,8種元素在原葯、渣和煎汁中的含量差別很大。其總含量特徵如下:Ca>Mg>Zn>Fe>Mn>Cu>Ni>Cr,說明中草葯中不同元素具有一定比例,處於一個相對的元素平衡體系中。和原葯相比,除鎂外,其他元素頭渣和二渣的含量均大於原葯含量,表明這些元素以某種結合形態吸附在渣體中不易浸出,相應鎂更易浸出。在表3的結果中,所有元素的顆粒物濃度均較大,說明它們明顯吸附於膠體上。從顆粒物來看,鈣、鎂、鐵的濃度較高,可能與它們水解產生的沉澱吸附在顆粒上有關。
形態分析參數在於對形態作出定量的表徵,反映某一元素在葯渣及煎汁中的不同分布,各參數中以提取率和浸留比最重要。提取率表示該葯的實際服用部分,是其葯效或毒性的作用量,所以水煎液中微量元素提取率是制定中葯劑量或考察其毒性的重要依據。浸留比則為該元素發揮葯效的標度,浸留比最大的元素,可以認為是該葯中作用最大的元素[6]。表4表明,各元素頭煎提取率雖然都高於二煎提取率,但二煎提取率仍然較大,說明傳統中葯煎煮方式(一般為3次)是有其科學道理的。總提取率中只有Mg超過了50%,其次是Ni(39.05%),其它元素的提取率較低,小於35%。而各元素殘留率中,Zn,Cu,Ca的頭煎殘留率最高,其次是Mn,Fe,Cr,Ni, Mg的頭煎殘留率最低(60.08%),表明葯渣中還有相當多可再利用的微量元素。鎂的浸留比最大,說明這8種元素中鎂為作用最大元素或是最特徵的元素。顆粒吸附率最大的是銅,其次是錳、鐵,可能與其水解有關。
研究磨盤草微量元素的初級形態,可為進一步探討磨盤草微量元素與葯效之間的關系提供依據。【參考文獻】
[1]弓曉峰,謝明勇,楊妙峰,等.黑靈芝中微量元素的形態分布[J].理化檢驗·化學分冊,2005,41(7):461.
[2]胡雪梅,郭榮輝,李 暉. 川芎中鋅、錳、鐵、鈣、鎂元素的次級形態分析[J].微量元素與健康研究, 2005, 22(1): 16.
[3]中華本草編委會. 中華本草(第14卷)[M]. 上海:上海科學技術出版社,1999:336.
[4]劉娜,賈凌雲,孫啟時. 中葯磨盤草的化學成分[J].沈陽葯科大學學報,2009,26(3):196.
[5]Matlawska I,Sikorska M. Flavonoid compounds in the flowers of Abutilon indicum (L.)Sweet (Malvaceae)[J].Acta Poloniae Pharmaceutica,2002,59(3):227.
[6]周天澤. 中草葯微量元素形態分析的幾個問題[J].中草葯,1990,21(10):37.
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㈨ 求分子生物學實驗講義
【實驗目的】
(1)了解實驗的常規儀器、設備、耗材。
(2)掌握本實驗所用儀器的功能和使用方法。
【實驗內容】
一、驗室的常規儀器、設備
(一) 溫度控制系統:
1. 冰箱: 根據葯品、試劑及多種生物制劑保存的需要,必須具備不同控溫級別的冰箱,最常使用的有:4℃、-20℃、-80℃冰箱。
4℃適合儲存某些溶液、試劑、葯品等。
-20℃適用於某些試劑、葯品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質樣品等。
-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液等的保存。
0-10℃的冷櫃適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實驗。
2.液氮罐:有些實驗材料、某些器官組織、細胞株、菌株及純化的樣品等,要求速凍和長期保存在超低溫環境下,就需要一個液氮罐(-196℃)具有經濟、省力和較好地保持細胞生物學特性的優點。
3.培養箱:37℃恆溫箱用於細菌的固體培養和細胞培養。
CO2培養箱適用於培養各種細胞,可恆定地提供一定量的CO2(通常5%),用來維持培養液的酸度(pH值)。
37℃恆溫空氣搖床可進行液體細菌的培養。
4. 水浴鍋:用於保溫。
25-100℃水浴搖床可用於分子雜交試驗,各種生物化學酶反應等試驗的保溫。
25-100℃水浴箱用於常規試驗。
5. 烘箱:主用於烘乾實驗器皿,有些需要溫度高些,有些需要溫度低些。用於RNA方面的實驗用具,需要在250℃烤箱中烘乾,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進行烘乾。
(二)水的凈化裝置:隨著分子生物學的飛速發展,許多實驗對水純度的要求越來越高。
1. 蒸餾水皿:單蒸水常難以滿足實驗要求。雙蒸水、三蒸水配液,許多實驗要去離子水。
多次蒸餾水可除去水中揮發性雜質,不能完全除去水中溶解的氣體雜質(Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ))。
2. 離子交換器:去離子水—用離子交換法製取的水,稱去離子水。
去離子效果好,但不能除去水中的非離子型雜質,其中常含有微量的有機物(樹脂等)。
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3.超純水:用蒸餾水、離子交換水、反滲透純水做為供水,磁鐵耦合齒輪泵作用使水循環。用於PCR、PCR氨基酸分析、DNA測序、酶反應、組織和細胞培養等。
(三)菌消毒設備:分子生物學所用大部分試劑,而且實驗用具都應嚴格消毒滅菌。。
1.蒸汽消毒鍋:用於小批量物品的隨時消毒。大批實驗物品、試劑、培養基可使用大型消毒且定時進行消毒
2. 紫外線:75%乙醇 、0.1%SDS(消毒劑)
一些耐高壓、高溫消毒且可用紫外線照射或乙醇和SDS浸泡。
紫外線照射使用方便,且很方便,但滅菌效果與距離有關,且產生臭氧污染安全,用於無菌室,超凈台和塑料用具的消毒。
3. 濾器濾膜:不耐高溫、高壓的試劑用其處菌。
4. 煮沸消毒:主用於金屬器械和針急需時採用。
(四) 計量系統:
1. 稱量系統:(各種天平)台秤、托盤天平、鈕力擺動天平、
光電分子天平、精密電子分析天平
2. 液體體積的度量:精:量筒、移液管、微量取液器
粗:刻度試管、燒杯、錐形瓶
3. pH值測量:
pH計:測定溶液中H+的直接電位的儀器,主要通過一對電極,在不同的pH溶液中產生不同的電動勢用pH值表示出來。
pH試紙:只適用於培養液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計。而大部分試劑的配製要求嚴格的pH值,需精確度高(小數點後兩位)的pH計。
4. OD值測量:光密度、分光光度計是利用物質在可見光和紫外線區域中的吸收光譜來鑒定該物質的性質及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質定量的方便指標之一,通過所產生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值,利用它可進行核酸溶液定量和純度的初步判斷。
(五)離心機:離心技術是研究生物的結構和功能中不可缺少的一種物理技術手段。因為各種物質在沉澱系數、浮力、和質量等方面有差異,可利用強大的離心力場,使其分離、純化和濃縮。目前有各種各樣的離心機。可供少於0.05ml到幾升的樣品離心之用。離心技術應用廣泛,包括收集和分離細胞、細胞器和生物大分子等。據其轉速的不同,可分為以下幾種類型:
1. 普通離心機:最大轉速6000 r/m ,最大離心力6000g
①醫用或台式離心機:是離心機中最簡單而廉價的,最常用於收集快速沉降系數的物質,如紅細胞、粗大的沉澱物、酵母菌和細菌等。
②低速冷凍離心機:主要用於細胞、細胞核、細胞膜和細菌的沉澱和收集等。 2
2. 高速離心機:最大轉速25000 r/m ,最大離心力89000g
有冷凍和常溫兩種,多用於制備和手收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸銨沉澱物以及免疫沉澱物等。
3. 超速離心機:最大轉速9000 r/m ,最大離心力694000g。
4. 台式超速離心機:最大轉速12000r/m ,最大離心力625000g。
(六)超凈工作台:內有紫外燈、照明燈、還應有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設備,是一種提供局部潔凈度的設備。其原理是鼓風機驅動空氣,經過低、中效的過濾器後,通過工作檯面,使實驗操作區域成為無菌的環境。超凈台按氣流方向的不同大致有幾種類型:
①側流式:凈化後氣流,從左側或右側通過工作檯面,流向對側,或者從上往下或從下往上流向對側,他們都能形成氣流屏障而保障檯面無菌。
缺點:在凈化氣流和外邊氣體交界處,可因氣體的流向而出現負壓,使少量的未凈化氣體混入,而造成污染。
②外流式:氣流是面向操作人員的方向流動,從而保證外面氣體不能混入。
缺點:在進行有害物質實驗時,對操作人員不利,但可採用有機玻璃把上半部分遮擋起來,使氣流往下方流出。(七)電泳系統:電泳技術是檢測、鑒定各種生物大分子的純度、含量及描述它們的特徵,甚至還是分離、純化、回收和濃縮樣品的工具之一。核酸和蛋白質等都帶有電荷,當它們被置於電場中時,能夠移動。
電泳裝置由兩部分組成:電源裝置和電泳槽裝置。
① 電泳裝置:電源需經穩流通過穩壓器,既能提供穩定的直流電,又能輸出穩定的電壓。可用於三種:
常度穩壓電泳儀:輸出電壓0-500v 0-15mA
中度穩壓電泳儀:輸出電壓400-1000v
高度穩壓電泳儀:輸出電壓1000以上的電源裝置。
② 電泳槽裝置:分兩種
水平式電泳槽:一般分為微型電泳槽和大號水平式電泳槽
垂直式電泳槽:分垂直平板電泳槽和圓柱形電泳槽裝置。
(八)PCR儀:Polymerase Chain Reaction儀,也稱DNA熱循環儀,基因擴增,它是使一對寡核苷酸引物結合到正負DNA鏈上的靶序列兩側,從而酶促合成拷貝數百萬倍的靶序列DNA片段,它的每一循環包括在三種不同溫度進行的DNA變性,引物復性,DNA聚合酶催化的延伸反應三個過程。
(九)凝膠成像分析系統:
對電泳後含溴乙錠(EB)核酸樣品的觀察分析。
(十)乾燥設備: 3
1. 真空加熱乾燥箱:核酸在硝酸纖維素膜和尼龍膜上固定,用於雜交實驗。
2. 電泳凝膠乾燥箱:電泳後的凝膠進行脫水乾燥的儀器,一般可將凝膠乾燥到一些玻璃紙上,乾燥後的凝膠易於保存。
3. 液氮冷凍乾燥:適用於活性蛋白質樣品的乾燥與結晶。
4. 真空泵:許多實驗都需要抽真空。如:乙醇沉澱後核酸樣品的乾燥,電泳凝膠的乾燥等。
(十一) 其他
1. 微波爐:便於一些溶液的快速加熱和定溫加熱,電泳瓊脂糖凝膠配製、溶化等。
2. 製冰機:用於製造大多數核酸、蛋白質的實驗操作所需的低溫環境,以減少核酸酶或蛋白質酶的水解。
3. 層析裝置:(色譜分離)是一種分離多組分混合物的有效物理方法。
真空印記系統,DNA合成/測序儀:這些都是對核酸進行深入研究的必備儀器。
4. 磁力攪拌器:多角度旋轉混勻器、快速振盪混合器:用於混合儀器。
5. 組織勻漿器:超聲組織及細胞破碎器,用其進行樣品的分離提純實驗。
6. 通風櫥:很多溶劑能逸出毒氣,必備櫃 ,放射性試驗還要有有機玻璃屏蔽。
7. 玻璃蒸餾器、電熱加帽、變壓器:用於酚等有機溶劑的蒸餾。
8. Tip頭、Eppendorf管:
微管移液器tip頭(吸液尖)、Eppendorf管(微量離心管)可洗滌,硅化消毒後反復使用。對一些要求嚴格的實驗,如RNA的提取、保存等操作,應使用新的消毒tip頭與Eppendorf管。另外還應備有常用規格的離心管(1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等)及96孔、24孔、12孔、6孔的細胞培養塑料平板等。
9. 小型設備、用具:
定時器、濾膜、保鮮膜、防護眼鏡鴨嘴鑷、常規的玻璃或塑料器皿(包括平皿、試管、燒杯、量瓶、試劑分液漏斗、避光保存的試劑應使用棕色試劑瓶,如飽和酚、巰基乙醇等)、記號筆、各種手套PE、乳膠、家用、防酸的等)
二、本期實驗所用主要儀器、 設備的功能及操作
1. 酚的重蒸餾裝置:空氣冷凝式玻璃蒸餾器。
一般酚是無色透明的結晶,如呈粉色或黃色,表明其中含有酚的氧化產物,如醌、二酸等,變色的酚不能用於實驗,因其中的酚氧化物可破壞核酸的磷酸二酯鍵,並引起DNA鏈的交聯。使用前必須在160℃-180℃重蒸餾以去除能引起RNA和DNA斷裂和交聯的污染雜質,從而得到純凈的酚。
2. 磁力攪拌器:81-2型恆溫磁力攪拌器
將導電溫度表用導線與二芯插頭連接,插入後面的溫度表孔內,當溫度上升到預先調整好的度數時即自動停止加熱(控溫攪拌)。主要用於物質的快速攪拌、溶解和混勻。如配製試劑,制備酚的水飽和液等。 4
3. 蒸餾水器:1810B自動雙重純水蒸餾器,石英管加熱式,本器的一次及二次蒸餾均有保護裝置,使用安全可靠,熱繼電器當冷卻水突然中斷或缺水的情況下,即自動切斷電源。干簧繼電器控制二次蒸餾瓶內的水位,其高度應以在水位降低時能自動切斷電源為准,從而達到自動控制水位的目的。
該儀器主要用於制備雙蒸水和三蒸水。
4. 離心機:TGL-16G台式高速離心機,最大轉速20000rpm,主要用於核酸提取時蛋白質的沉澱和有機相與水相的分層,PCR檢測的瞬時離心。
5. 微量取液器:主要用於精確量取微量液體體積和核酸水相的轉移。
6. 勻漿器:5ml、10ml玻璃勻漿器。
主用於組織細胞的破碎。
7. 凝膠成像分析系統
主用於核酸樣品瓊脂糖凝膠和PCR電泳結果的紫外觀察和照像。
8. PCR儀:PTC-200基因擴增儀
體外擴增核酸的儀器
9. 蒸汽消毒鍋:用於實驗用試劑、器皿、用具等的滅菌清毒
有電加熱式、電爐加熱式兩種。
10. 超凈台:JJT-1300型潔凈工作台,側流式。
原理:吸進氣經過初、中級過濾皿(無紡布濾過)後,再通過風機經高級過濾器(超細玻璃纖維濾紙製成)而形成潔凈空氣。主要是在局部空氣造成潔凈空氣環境,以使工作區域中的懸浮粒子及微生物控制在最低限度內。
本台操作壓為垂直層流壓,因此出風面與操作位置不應放置多餘的物品,以免妨礙氣流的正常流動,影響潔凈度,檯面板上的孔作為通風孔,使用時避免有液體或其他物品漏入空中,以免影響內部構件。風速可調。
使用:75%乙醇消毒2-3次,擺放好實驗用品。插上電源,紫外消毒30分鍾,啟動風機5m後關燈,關燈後10分鍾打開照明燈,即可使用。
11. 電泳系統:
①電泳儀:HV-3000型高度三恆多用電泳儀(恆壓、恆流、恆功率)
②電泳槽:水平式兩種。
12.微波爐:主要用於瓊脂糖的快速溶解。
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是的,要合同可以給對方有一些約束力。合同可要也可不要,信譽度高的公司不要合同也罷。要問一下供方的供貨期時間是多長。