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稀釋塗布法用蒸餾水稀釋

發布時間:2022-03-03 21:05:43

『壹』 什麼是稀釋塗布平板法

顯微鏡計數法即血球計數法,事先把菌液稀釋到一定的倍數,然後通過血球計數板在顯微鏡下計數。此法計數比較精準。

活菌計數法是將待測樣品經一系列 10 倍稀釋,然後選擇三個稀釋度的菌液,分別取 0.2ml 放入無菌平皿,再倒入適量的已熔化並冷至 45 ℃ 左右的培養基,與菌液混勻,冷卻、待凝固後,放入適宜溫度的培養箱或溫室培養,長出菌落後,計數,按下面公式計算出原菌液的含菌數:
每毫升原菌液活菌數=同一稀釋度三個以上重復平皿
菌落平均數×稀釋倍數× 5
稀釋塗布平板法是一種粗略的活菌計數法,即通過一定的稀釋倍數,塗布到平板上,在適宜的條件下培養後,觀察活菌數。
平板劃線法是用來分離單菌落的一種方法,不是計數的方法。

『貳』 關於稀釋塗布平板法

簡單的數學問題:因為你要計算的是菌體的濃度,不是菌體的個數,與體積無關。
濃度
=
菌體個數/菌液體積。稀釋到10-4濃度時,取出的1ml和取出的0.1ml二者濃度一樣。0.1ml培養出來的菌落數雖然是1ml培養出來的菌落數的十分之一,但體積也是它的十分之一(0.1ml是1ml的十分之一)。計算原來菌液的濃度,直接將二者得出的菌液濃度乘以1×10^4即可。

『叄』 稀釋塗布法是怎麼樣的

稀釋塗布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基表面,進行培養。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個菌落。

稀釋平板塗布大部分是用於統計細菌數目的,不知道哪個稀釋濃度最後長出來有適合統計的菌落數,所以必須每個稀釋度都塗板子。

倒平板的方法

如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落,這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨後挑取該單個菌落,或重復以上操作數次,便可得到純培養。

平板培養基的冷凝方法有兩種,一種是將平板一個個攤開在桌面上冷凝,另一方法是將幾個平板疊在一起冷凝。前者冷凝速度較快,在室溫較高時採用;而後者冷凝速度較慢,可在室溫較低時採用,其優點是形成冷凝水少,尤其適用於平板劃線等的需要。

以上內容參考:網路-稀釋倒平板法

『肆』 稀釋塗布平板法是什麼

由於將含菌材料現加到還較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡,而且採用稀釋倒平板法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長,因此在微生物學研究中更常用的純種分離方法是稀釋塗布平板法。

用於部分成品的驗證、生物製品的檢驗、土壤中細菌含量的測定以及食品和水源污染程度的檢驗。將待測樣品製成均勻的系列稀釋液,盡量分散樣品中的微生物細胞,使其以單細胞形式存在。

其特徵:

稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落,即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特徵設計的計數方法,即一個菌落代表一個單細胞。

計數時,首先將待測樣品製成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中的微生物細胞分散開,使成單個細胞存在(否則一個菌落就不只是代表一個細胞),再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分布於平板中的培養基內。

經培養後,由單個細胞生長繁殖形成菌落,統計菌落數目,即可計算出樣品中的含菌數。此法所計算的菌數是培養基上長出來的菌落數,故又稱活菌計數。一般用於某些成品檢定(如殺蟲菌劑等)、生物製品檢驗、土壤含菌量測定及食品、水源的污染程度的檢驗。

『伍』 稀釋塗布平板法和稀釋倒平板法操作和適用范圍有什麼區別

稀釋塗布。

簡單說一下兩者的優點來方便你判斷什麼時候用什麼吧:

稀釋塗布平板法的結果是整個平板都是單菌落,可以得到大量的單菌落,要是平板劃線法接影印,我建議不用影印了直接把你能從劃線法中pick到的單菌落分別扔到篩選培養液中去搖,反而還省事些;

平板劃線法相當於自帶梯度稀釋,比較適合是由固體培養基菌落之類的不太好判斷具體菌量的菌源去篩選單菌落(否則用稀釋法不熟悉的話還要設置梯度,麻煩),再一個就是本身菌源就基本是單一的,只是想保險起見分個單菌落挑個一兩個菌落這種,比如從冰凍中復甦細菌就比較適合劃個線,如果用稀釋塗布的話要的菌太多了浪費。
兩種方法基本相同,無菌操作也一樣,不同的是先分別吸取0.5mol10^(-4)、10^(-5)、10^(-6)稀釋度的土壤懸液對號放入平皿,然後再倒入溶化後冷卻到45℃左右的培養基,邊倒入邊搖勻,使樣品基中的微生物與培養基混合均勻,待冷凝成平板後,分別倒至於28℃和37℃溫室中培養後,再挑取單個菌落,直接獲得純培養

『陸』 稀釋塗布平板法為什麼要稀釋

稀釋塗布平板的目的是降低菌的濃度。濃度過高的菌會在培養基上長出過多的菌落,以至於沒法挑出單菌落,那樣就無法獲得單一種類的菌,或者無法統計菌落數來計算菌液濃度了。

明白否?

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在塗平板計數計算菌液濃度時,不同稀釋濃度下的平板菌落數可作為參考使用。

需要做梯度稀釋。如果菌多的話就會長成一片。

『柒』 稀釋塗布平板法

稀釋平板塗布大部分是用於統計細菌數目的,你不知道哪個稀釋濃度最後長出來有適合統計的菌落數,所以必須每個稀釋度都塗板子。

『捌』 稀釋塗布平板法稀釋後塗布的原因

稀釋操作:
1、將分別盛有9ml水的6支試管滅菌,並按10^1到10^6的順序進行編號.
2、用移液試管吸取1ml培養的菌夜,注入10^1倍稀釋的試管中.用手指輕壓移夜管上的橡皮,吹吸三次,使菌液與水充分混勻.
3、從10^1倍稀釋的試管中吸取1ml稀釋液,注入10^2倍稀釋的試管中,重復第二步的混勻操作.以此類推,直到完成最後一支試管的稀釋.注意:移夜管需要經過滅菌.操作時,試管口和移夜管應在離火焰1~2cm處
塗布操作:1、將塗布器浸在盛有酒精的燒杯中.
2、取少量菌夜(不超過0.1ml)滴加到培養基表面.
3、將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃,待酒精燃盡後,冷卻8~10s.4、用塗布器將菌液均勻地塗布在培養基表面,塗布時可轉動培養皿,使菌液分布均勻.
注意:1.將塗布器末端浸在盛有體積分數為百分之七十的酒精的燒杯中.取出時,要讓多餘的酒精在燒杯中滴盡,然後將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃.

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