蛋白質蒸餾裝置的水蒸氣發生器中的水為何要用硫酸調成酸性

❶ 凱氏定氮法，為什麼蒸餾時，液體變成藍綠色透明後，還要繼續加熱

一、實驗原理
蛋白質是含氮的有機化合物。蛋白質與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液 滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，蛋白質含量。含氮量*6.25=蛋白含量
1.有機物中的胺根在強熱和CuSO4，濃H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4

凱氏定氮法
凱氏定氮法反應式為：
2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 （其中CuSO4做催化劑）
2.在凱氏定氮器中與鹼作用，通過蒸餾釋放出NH3 ，收集於H3BO3 溶液中反應式為:
(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4

2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O

3. 用已知濃度的H2SO4（或HCI）標准溶液滴定，根據HCI消耗的量計算出氮的含量，然後乘以相應的換算因子，既得蛋白質的含量

反應式為：

(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3

(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3

二、操作
1、 樣品處理：精密稱取0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸取10-20ml液體樣品（約相當氮30-40mg），移入乾燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，6g硫酸鉀及20毫升硫酸，稍搖勻後於瓶口放一小漏斗，將瓶以45度角斜支於有小孔的石棉網上，小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止後，加強火力，並保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明後，再繼續加熱0.5小時。取下放冷，小心加20ml水，放冷後，移入100ml容量瓶中，並用少量水洗定氮瓶，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸同一方法做試劑空白試驗。但是此法比較危險，不易在實驗室演示，現在大多數實驗室有消煮儀一次可以進行多個（一次可以消煮16個樣品）樣品處理，並有通風櫥進行通風，溫度可以自己設定，更加安全和可操作性，因此逐步成為主要的凱氏定氮法的首選處理方法。
一般消解溫度都設在240度及240度以上，如果想快速消解可以適當提高溫度甚至可以用最大溫度進行消解。
2、按圖裝好定氮裝置，於水蒸氣發生器內裝水約2/3處加甲基紅 指示劑數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數粒玻璃珠以防暴沸，用調壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。
3、向接收瓶內加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示劑1滴，並使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化液由小玻璃杯流入反應室，並以10ml水洗滌小燒杯使流入反應室內，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將10ml 40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應室，不能立即將玻璃蓋塞緊，這樣易使玻璃塞粘在進樣口，應先用蒸餾水沖洗然後再蓋，並加水於小玻璃杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾，蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內，蒸餾5min。移動接收瓶，使冷凝管下端離開液皿，再蒸餾1min，然後用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.05N硫酸或0.05N鹽酸標准溶液定至灰色或藍紫色為終點。
同時吸取10.0ml試劑空白消化液按3操作。

三、計算
X =(（V1-V2）*N*0.014)/( m*（10/100）) *F*100%
X：樣品中蛋白質的百分含量，g；
V1：樣品消耗硫酸或鹽酸標准液的體積，ml；
V2：試劑空白消耗硫酸或鹽酸標准溶液的體積，ml；
N：硫酸或鹽酸標准溶液的當量濃度；
0.014：1N硫酸或鹽酸標准溶液1ml相當於氮克數；
m：樣品的質量（體積），g（ml）；
F：氮換算為蛋白質的系數 。蛋白質中的氮含量一般為15～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.70，玉米、高粱為6.24，花生為5.46，米為5.95，大豆及其製品為5.71，肉與肉製品為6.25，大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83，芝麻、向日葵為 5.30。

❷ 蛋白質蒸餾裝置的水蒸氣發生器中的水為何要用硫酸調成酸性

防止氮元素生成氨氣揮發。

❸ 求花生粕和豆粕用定氮儀測定粗蛋白含量的方法

凱氏定氮法

用於測定有機物的含氮量,若蛋白質的含氮量已知時，則可用此法測定樣品中蛋白質的含量。當蛋白質與濃硫酸共熱時，其中的碳、氫兩元素被氧化成二氧化碳和水，而氮則轉變成氨，並進一步與硫酸作用生成硫酸銨。此過程通常稱為「消化」。但是，這個反應進行得比較緩慢，通常需要加入硫酸鉀或硫酸鈉以提高反應液的沸點，並加入硫酸銅作為催化劑，以促進反應的進行。消化完成後，在凱氏定氮儀中加入濃鹼，可使消化液中的硫酸銨分解，游離出氨，藉助水蒸汽蒸餾法，將產生的氨蒸餾到一定量、一定濃度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨後，氨與溶液中氫離子結合，使溶液中的氫離子濃度降低，指示劑顏色改變，然後用標准無機鹽酸滴定，直至恢復溶液中原來的氫離子濃度為止。根據所用標准鹽酸的量可計算出待測物中的總氮量。蛋白質的含氮量為16%，即1克蛋白質中的氮相當於6.25克蛋白質，用凱氏定氮法測出的含氮量乘以6.25,即得樣品中蛋白質的含量。

1實驗材料1.1器材1.2試劑2實驗步驟

實驗材料

器材

微量凱氏定氮儀1套；

50ml凱氏燒瓶4個；

移液管；錐形瓶；

試管；

小玻璃珠

試劑

濃硫酸；

30％氫氧化鈉溶液；

2％硼酸溶液；

標准鹽酸溶液(0.01mol／L)。

粉末硫酸鉀—硫酸銅混合物：K2SO4與CuSO4·5H2O以3：1配比研磨混合。

混合指示劑(田氏指示劑)：由50ml0.1％甲烯藍乙醇溶液與200ml0.1％甲基紅乙醇溶液混合配成，貯於棕色瓶中備用。

樣品溶液：配製3mg/ml的牛血清白蛋白溶液作為樣品。

實驗步驟

安裝凱氏定氮儀。

消化：取4個50ml凱氏燒瓶並標號,各加1顆玻璃珠，在1號及2號瓶中各加樣品1ml，催化劑(K2SO4-CuSO4·5H2O)200mg，濃硫酸5ml。注意加樣品時應直接送入瓶底，而不要沾在瓶口和瓶頸上。在3號及4號瓶中各加1ml蒸餾水和與1、2號瓶相同量的催化劑和濃硫酸，作為對照。在通風櫥內進行消化。在消化開始時應控制火力，不要使液體沖到瓶頸。待硫酸開始分解並放出SO2白煙後，適當加強火力，繼續消化，直至消化液呈透明淡綠色為止。撤掉火力，冷卻至室溫。

蒸餾：

蒸餾器的洗滌：用水洗滌干凈微量凱氏定氮儀，在蒸汽發生器中加入用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑，用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀。約15分鍾後，在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶，繼續蒸汽洗滌2分鍾，觀察錐形瓶內的溶液是否變色，如不變色則證明蒸餾裝置內部已洗滌干凈。移走錐形瓶，停止加熱，打開夾子。

蒸餾：取下棒狀玻塞，用吸管吸取消化液，細心地插到反應室小玻璃杯的下方，塞緊棒狀玻塞。將一個含有硼酸和指示劑的錐形瓶放在冷凝器下方，使冷凝器下端浸沒在液體內。取30％的氫氧化鈉溶液10ml放入小玻璃杯中，輕提棒狀玻璃塞使之流入反應室(為了防止冷凝管倒吸，液體流入反應室必須緩慢)。尚未完全流入時，將玻璃塞蓋緊，向玻璃杯中加入蒸餾水約5ml。再輕提玻璃塞，使一半蒸餾水慢慢流入反應室，一半留在玻璃杯中作水封。加熱水蒸汽發生器，沸騰後夾緊夾子，開始蒸餾。氨氣進入錐形瓶，瓶中的酸溶液由紫色變成綠色。變色時起記時，再蒸餾5分鍾。移動錐形瓶，使硼酸液面離開冷凝管約1厘米，並用少量蒸餾水洗滌冷凝管口外面，繼續蒸餾1分鍾，移開錐形瓶，用表面皿覆蓋錐形瓶。蒸餾完畢後，須將反應室洗滌干凈，再繼續下一個蒸餾操作。待樣品和對照均蒸餾完畢後，同時進行滴定。

滴定：用0.01mol／L的標准鹽酸溶液滴定各錐形瓶中收集的氨量，硼酸指示劑溶液由綠色變淡紫色為滴定終點。

結果計算：

其中：

A為滴定樣品用去的鹽酸溶液平均ml數；

B為滴定對照液用去的鹽酸溶液平均ml數；

C為所取樣品溶液的ml數。

現在的公司有現成的儀器可以使用，上面是教材中的原理，哈哈

可以參考下面的網址

❹ GB 6432-1986 飼料粗蛋白測定方法是什麼呢

不知道，只知道現在用凱氏定氮法

一、原理

蛋白質是含氮的有機化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質含量。

1.有機物中的胺根在強熱和CuSO4，濃H2SO4作用下，硝化生成（NH4）2SO4

反應式為：

2NH2+H2S04+2H＝(NH4)2S04（其中CuSO4做催化劑）

2.在凱氏定氮器中與鹼作用，通過蒸餾釋放出NH3，收集於H3BO3溶液中

反應式為:

(NH4)2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO4

2NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2O

3.用已知濃度的H2SO4（或HCI）標准溶液滴定，根據HCI消耗的量計算出氮的含量，然後乘以相應的換算因子，既得蛋白質的含量

反應式為：

(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O＝(NH4)2SO4+4H3BO3

(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3

二、試劑

所有試劑均用不含氨的蒸餾水配製。

2.1硫酸銅。

2.2硫酸鉀。

2.3硫酸。

2.42%硼酸溶液。

2.5混合指示液：1份0.1%甲基紅乙醇溶液與5份0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。也可用2份0.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混合。

2.640%氫氧化鈉溶液。

2.70.025mol/L硫酸標准溶液或0.05mol/L鹽酸標准溶液。

三、儀器

定氮蒸餾裝置：如圖所示。

凱氏定氮法儀器1.安全管

2.導管

3.汽水分離管

4.樣品入口

5.塞子

6.冷凝管

7.吸收瓶

8.隔熱液套

9.反應管

10.蒸汽發生瓶

四、操作方法

1、樣品處理：精密稱取0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸取10-20ml液體樣品（約相當氮30-40mg），移入乾燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，6g硫酸鉀及20毫升硫酸，稍搖勻後於瓶口放一小漏斗，將瓶以45度角斜支於有小孔的石棉網上，小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止後，加強火力，並保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明後，再繼續加熱0.5小時。取下放冷，小心加20ml水，放冷後，移入100ml容量瓶中，並用少量水洗定氮瓶，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸同一方法做試劑空白試驗。

2、按圖裝好定氮裝置，於水蒸氣發生器內裝水約2/3處加甲基紅指示劑數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數粒玻璃珠以防暴沸，用調壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。

3、向接收瓶內加入10ml2%硼酸溶液及混合指示劑1滴，並使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化液由小玻璃杯流入反應室，並以10ml水洗滌小燒杯使流入反應室內，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將10ml40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應室，立即將玻璃蓋塞緊，並加水於小玻璃杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾，蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內，蒸餾5min。移動接收瓶，使冷凝管下端離開液皿，再蒸餾1min，然後用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.01N硫酸或0.01N鹽酸標准溶液定至灰色或藍紫色為終點。

同時吸取10.0ml試劑空白消化液按3操作。

計算：

X=(（V1-V2）*N*0.014)/(m*（10/100）)*F*100%

X：樣品中蛋白質的百分含量，g；

V1：樣品消耗硫酸或鹽酸標准液的體積，ml；

V2：試劑空白消耗硫酸或鹽酸標准溶液的體積，ml；

N：硫酸或鹽酸標准溶液的當量濃度；

0.014：1N硫酸或鹽酸標准溶液1ml相當於氮克數；

m：樣品的質量（體積），g（ml）；

F：氮換算為蛋白質的系數。蛋白質中的氮含量一般為15～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.70，玉米、高粱為6.24，花生為5.46，米為5.95，大豆及其製品為5.71，肉與肉製品為6.25，大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83，芝麻、向日葵為5.30。

五、注意事項

（1）樣品應是均勻的。固體樣品應預先研細混勻，液體樣品應振搖或攪拌均勻。

（2）樣品放入定氮瓶內時，不要沾附頸上。萬一沾附可用少量水沖下，以免被檢樣消化不完全，結果偏低。

（3）硝化時如不容易呈透明溶液，可將定氮瓶放冷後，慢慢加入30%過氧化氫（H2O2）2-3ml，促使氧化。

（4）在整個消化過程中，不要用強火。保持和緩的沸騰，使火力集中在凱氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白質在無硫酸存在的情況下，使氮有損失。

（5）如硫酸缺少，過多的硫酸鉀會引起氨的損失，這樣會形成硫酸氫鉀，而不與氨作用。因此，當硫酸過多的被消耗或樣品中脂肪含量過高時，要增加硫酸的量。

（6）加入硫酸鉀的作用為增加溶液的沸點，硫酸銅為催化劑，硫酸銅在蒸餾時作鹼性反應的指示劑。

（7）混合指示劑在鹼性溶液中呈綠色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色。如果沒有溴甲酚綠，可單獨使用0.1%甲基紅乙醇溶液。

（8）氨是否完全蒸餾出來，可用PH試紙試餾出液是否為鹼性。

（9）吸收液也可以用0.01當量的酸代表硼酸，過剩的酸液用0.01N鹼液滴定，計算時，A為試劑空白消耗鹼液數，B為樣品消耗鹼液數，N為鹼液濃度，其餘均相同。

（10）以硼酸為氨的吸收液，可省去標定鹼液的操作，且硼酸的體積要求並不嚴格，亦可免去用移液管，操作比較簡便。

（11）向蒸餾瓶中加入濃鹼時，往往出現褐色沉澱物，這是由於分解促進鹼與加入的硫酸銅反應，生成氫氧化銅，經加熱後又分解生成氧化銅的沉澱。有時銅離子與氨作用，生成深l藍色的結合物[Cu(NH3)4]2+

（12）這種測算方法本質是測出氮的含量，再作蛋白質含量的估算。只有在被測物的組成是蛋白質時才能用此方法來估算蛋白質含量。

❺ 蒸餾出來的硫酸屬於什麼級別

溶並且放熱。來有時，在工業自製造過程中，硫酸也可能被染成暗褐色以提高人們對它的警惕性。作為二元酸的硫酸在不同濃度下可能會有不同的特性，而其對不同物質，如金屬、皮肉及其他生物組織、甚至岩石等的腐蝕性，都歸根於它的強酸性，以及它在高濃度下的強烈脫水性與氧化性。硫酸能對肉體造成極大的傷害，因為它除了會透過酸性水解反應分解蛋白質及脂肪造成化學燒傷外，還會與碳水化合物發生脫水反應並造成二級火焰性灼傷；若不慎入眼，更會破壞視網膜造成永久失明。故在使用時，應做足安全措施。另外，硫酸也是潮解性的，會吸取空氣中的水蒸氣。正因為硫酸有不同的特性，它也有不同的應用，如家用強酸通渠劑,鉛酸蓄電池的電解質，肥料，煉油廠材料及化學合成劑等。硫酸被廣泛生產，最常用的工業方法為接觸法。

❻ 飼料中蛋白氮和非蛋白氮的測定有什麼快速法嗎

一、硫酸銅沉澱法
根據非蛋白氮的化學性質來看，大部分溶於水，一部分在常溫下不溶水，但在沸水中溶解。根據此種性質，可以先將樣品煮沸，用硫酸銅將樣品中的蛋白質沉澱下來，由於非蛋白氮已經溶於水，故可用過濾方法將其與樣品中的蛋白質分離。在過濾時，水的溫度一定不能太低，否則象雙縮脲一類的物質會因為不溶於常溫水而不能被過濾掉。用此種方法測定出的蛋白質含量稱為樣品的真蛋白質。但實際上，此種方法有很大的局限性。如果非蛋白氮不溶於沸水，或者將一般的非蛋白氮微囊化，此種方法測出的結果會與樣品中的實際真蛋白有很大的差異。

二、氨基酸測定法
為了真正能夠判定樣品中是否摻有非蛋白氮，需測定樣品中的氨基酸含量。無論採用經典的氨基酸自動分析儀分析（柱後衍生），還是採用比較快捷的HPLC分析（往前衍生），將所測定的氨基酸總量相加得到一個總氨基酸數值，然後將此數值乘以6.25為M，和用凱氏定氮法測定的粗蛋白質N相比較，M至少為N的85％（M可能略大於N）。如果低於此數值，則可以判定該樣品中摻有非蛋白氮。

三、水解蒸餾法
1、原理：非蛋白氮主要包括五類：尿素及其衍生物類、氨態氮類、銨類、肽類及其衍生物、動物糞便及其它廢棄物類。如果在原料中摻有氨態氮類、銨類和糞便比較容易判斷（可採用硫酸銅沉澱法加鏡檢），一般很少將肽類及其衍生物摻入其中，剩下比較難鑒別的就是尿素及其衍生物。尿素和尿素衍生物經過強酸或強鹼水解為氨鹽或氨和其它的物質，在強鹼的條件下可以蒸餾出氨氣，原料中的蛋白質經過水解成氨基酸鹽，氨基酸鹽在強鹼條件下穩定，從而可將非蛋白氮和真蛋白氮進行分離。

2、儀器和設備：酒精噴燈，試管和其它常用的儀器。

3、試劑與溶液：6mol/l的鹽酸溶液和其它常用的試劑。

4、測定方法：本文只列出用酸水解的方法。採集有代表性樣品約100g，混勻後用四分法縮分出209左右，將其粉碎，使其全部通過60目樣品篩。精確稱取0.3000g的樣品，置於容積為60ml的試管底部（注意樣品勿沾在管壁上），加入30ml 6mol/l的鹽酸溶液，將試管在距試管口1～2cm處用噴燈加熱並封口。將封好的試管置於乾燥箱內，於110℃下水解24h。冷卻後打開試管，將水解液過濾至100ml容量瓶中，用蒸餾水反復多次沖洗試管和濾紙，然後定容至刻度。用10ml移液管移取10ml樣液移入半微量式定氮儀的反應室中，加入20ml 1∶1的氫氧化鈉溶液蒸餾10 min，餘下的步驟按照測定粗蛋白的方法進行操作，得出樣品所消耗的鹽酸的體積為V1（ml）。同時作空白滴定可得消耗的鹽酸的體積為V0，設所稱樣品的質量為M（g）。

5、非蛋白氮的粗蛋白質計算公式

CP(%)＝（V1-V0）×C×O.14×6.25/M 蛋白就用凱氏定氮法1、 樣品處理：精密稱取0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸取10-20ml液體樣品（約相當氮30-40mg），移入乾燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，3g硫酸鉀及20毫升硫酸，稍搖勻後於瓶口放一小漏斗，將瓶以45度角斜支於有小孔的石棉網上，小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止後，加強火力，並保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明後，再繼續加熱0.5小時。取下放冷，小心加20ml水，放冷後，移入100ml容量瓶中，並用少量水洗定氮瓶，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸銨同一方法做試劑空白試驗。
2、 按圖裝好定氮裝置，於水蒸氣發生器內裝水約2/3處加甲基紅指示劑數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數粒玻璃珠以防暴沸，用調壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。
3、 想接收瓶內加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示劑1滴，並使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化液由小玻璃杯流入反應室，並以10ml水洗滌小燒杯使流入反應室內，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將10ml 40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應室，立即將玻璃蓋塞緊，並加水於小玻璃杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾，蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內，蒸餾5min。移動接收瓶，使冷凝管下端離開液皿，再蒸餾1min，然後用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.01N硫酸或0.01N鹽酸標准溶液定至灰色或藍紫色為終點。
同時吸取10.0ml試劑空白消化液按3操作。
計算：
X =(（V1-V2）*N*0.014)/( m*（10/100）) +F*100
X：樣品中蛋白質的含量，g；
V1：樣品消耗硫酸或鹽酸標准液的體積，ml；
V2：試劑空白消耗硫酸或鹽酸標准溶液的體積，ml；
N：硫酸或鹽酸標准溶液的當量濃度；
0.014：1N硫酸或鹽酸標准溶液1ml相當於氮克數；
m：樣品的質量（體積），g（ml）；
F：氮換算為蛋白質的系數。蛋白質中的氮含量一般為15～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.70，玉米、高粱為6.24，花生為5.46，米為5.95，大豆及其製品為5.71，肉與肉製品為6.25，大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83，芝麻、向日葵為 5.30。

❼ 國際的測量法，測蛋白質

蛋白質測定的國標規定方法——凱氏定氮法介紹
食品中蛋白質的測定方法

本標准適用於各類食品中蛋白質的測定。
1原理
蛋白質是含氮的有機化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質含量。
2試劑
所有試劑均用不含氨的蒸餾水配製。
2.1硫酸銅。
2.2硫酸鉀。
2.3硫酸。
2.42%硼酸溶液。
2.5混合指示液：1份0.1%甲基紅乙醇溶液與5份0.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。也可用2份0.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混合。
2.640%氫氧化鈉溶液。
2.70.05N硫酸標准溶液或0.05N鹽酸標准溶液。
3儀器
定氮蒸餾裝置：如圖所示。
（圖略）
4操作方法
4.1樣品處理：精密稱取0.2～2.0g固體樣品或2～5g半固體樣品或吸取10～20ml液體樣品(約相當氮30～40mg)，移入乾燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，3g硫酸鉀及20ml硫酸，稍搖勻後於瓶口放一小漏斗，將瓶以45°角斜支於有小孔的石棉網上。小心加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止後，加強火力，並保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明後，再繼續加熱0.5h。取下放冷，小心加20ml水。放冷後，移入100ml容量瓶中，並用少量水洗定氮瓶，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸按同一方法做試劑空白試驗。
4.2按圖裝好定氮裝置，於水蒸氣發生瓶內裝水至約2/3處，加甲基紅指示液數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數粒玻璃珠以防暴沸，用調壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。
4.3向接收瓶內加入10ml2%硼酸溶液及混合指示液1滴，並使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應室，並以10ml水洗滌小燒杯使流入反應室內，塞緊小玻杯的棒狀玻塞。將10ml40%氫氧化鈉溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其緩緩流入反應室，立即將玻塞蓋緊，並加水於小玻杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾。蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內，蒸餾5min。移動接受瓶，使冷凝管下端離開液面，再蒸餾1min。然後用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.05N硫酸或0.05N鹽酸標准溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。
同時吸取10.0ml試劑空白消化液按4.3操作。
4.4計算

式中：X——樣品中蛋白質的含量，%；
V1——樣品消耗硫酸或鹽酸標准液的體積，ml；
V2——試劑空白消耗硫酸或鹽酸標准液的體積，ml；
N——硫酸或鹽酸標准溶液的當量濃度；
0.014——1N硫酸或鹽酸標准溶液1ml相當於氮克數；
m——樣品的質量(體積)，g(ml)；
F——氮換算為蛋白質的系數。蛋白質中的氮含量一般為15～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.70，玉米、高粱為6.24，花生為5.46，米為5.95，大豆及其製品為5.71，肉與肉製品為6.25，大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83，芝麻、向日葵為5.30。

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❽ 蛋白質怎麼檢驗(小學四年級上冊)

（一）蛋白質的鹽析
取1.5mL蛋白質溶液，加入等體積飽和硫酸銨溶液（濃度為50%飽和），微微搖動試管，使溶液混合均勻後，靜置數分鍾，球蛋白即析出呈絮狀沉澱（如無沉澱可再加少許飽和硫酸銨），用濾紙濾取上清液，濾液中再加入固體硫酸銨粉末至不再溶解，析出的即為清蛋白，再加水稀釋，觀察沉澱是否溶解。
（二）蛋白質的沉澱
1．用重金屬鹽沉澱蛋白質
取三支試管，各加1mL蛋白質溶液，分別各加3滴6%醋酸鉛溶液、3滴2%硫酸銅溶液和3滴1%硝酸銀溶液，觀察蛋白質沉澱的析出。
2．用有機酸沉澱蛋白質
取二支試管，各加1mL蛋白質溶液，並加5%醋酸溶液使之呈酸性（該沉澱反應最好在弱酸中進行）。然後分別滴加飽和苦味酸、飽鞣酸溶液，直至沉澱產生為止。
用10%三氯醋酸溶液、3%磺柳酸溶液進行類似實驗（用量同前），觀察現象。
（三）蛋白質的顏色反應
1．黃蛋白反應
於試管中，加1mL蛋白質溶液和10滴濃硝酸溶液，直火加熱煮沸，觀察溶液和沉澱顏色。冷卻後，再加入20滴10%氫氯化鈉溶液，觀察顏色變化。
2．與茚三酮的反應
在二支試管中，分別加1%賴氨酸溶液和1mL蛋白質溶液，分別加2滴茚三酮溶液，加熱至沸，觀察有什麼現象？
3．與硝酸汞試劑作用——米倫反應
在二支試管中，分別加1mL 0.5%苯酚溶液和1mL蛋白質溶液，再各加0.5mL米倫試劑（不可太多），苯酚溶液出現玫瑰紅色，而蛋白質溶液加熱後出現沉澱，加熱凝固的蛋白質呈磚紅色，有時溶液也呈紅色。
4．蛋白質的雙縮脲反應
(1) 雙縮脲的生成
於乾燥試管中，加0.2g～0.3g尿素，微火加熱，尿素熔化並形成雙縮脲，放出的氨可用紅色石蕊試紙試驗。試管內有白色固體出現後，停止加熱。
(2) 雙縮脲反應
上述產物冷卻後，加1mL10%氫氧化鈉溶液，搖勻，再加2滴2%硫酸酮溶液，混勻，觀察有無紫色出現。
於試管中，加1mL清蛋白溶液和1mL10%氫氧化銅溶液，再加1滴～2滴2%硫酸銅溶液共熱，由於蛋白質與硫酸銅生成絡合物而呈紫色。取1%賴氨酸溶液作對照，觀察顏色變化。
(四) 核蛋白組成的鑒定
1．核蛋白的水解
取20mL酵母核蛋白混懸液於離心管中離心分離，棄去清液，將沉澱轉入小燒杯中，加15mL 5%硫酸，蓋上表面皿在水浴上煮沸約1h（煮沸過程中保持原有體積），水解畢，離心分離，取上層清液作以下檢查。
2．核糖的鑒定
於試管中，加1mL 20%間苯二酚鹽酸溶液，以小火加熱至沸，迅速加入5滴水解液，呈現紅色，（如紅色不顯可再稍加熱）。
3．磷酸的鑒定
取10滴水解液，置於試管中，加5滴7%鉬酸銨溶液和2滴濃硝酸溶液，小心於火上加熱，即有黃色沉澱生成。
4．嘌呤與嘧啶的鑒定
取約4mL水解液，置於小燒杯中，加入氨水至微鹼性，過濾，在濾液中加1mL 5%硝酸銀銨溶液，靜置片刻，即有絮狀的嘌呤或嘧啶銀鹽沉澱生成。

注意事項
米倫試劑是硝酸、亞硝酸、硝酸汞及亞硝酸汞之混合物，能與苯酚及某些酚類起顏色反應。

❾ 蛋白質蒸餾裝置的水蒸氣發生器中為什麼要用硫酸調成酸性

避免揮發性的鹼性物質進入蒸餾產物，影響氨的測定。

❿ 豆粕中用粗蛋白計算賴氨酸的公式是什麼或者已知豆粕粗蛋白，如何計算出其中的賴氨酸含量

怎樣測定花生粕和豆粕用定氮儀測定粗蛋白含量

用上海沛歐定氮儀怎樣測定花生粕和豆粕用定氮儀測定粗蛋白含量？

用於測定有機物的含氮量,若蛋白質的含氮量已知時，則可用此法測定樣品中蛋白質的含量。當蛋白質與濃硫酸共熱時，其中的碳、氫兩元素被氧化成二氧化碳和水，而氮則轉變成氨，並進一步與硫酸作用天生硫酸銨。此過程通常稱為「消化」。但是，這個反應進行得比較緩慢，通常需要加進硫酸鉀或硫酸鈉以進步反應液的沸點，並加進硫酸銅作為催化劑，以促進反應的進行。消化完成後，在凱氏定氮儀中加進濃鹼，可使消化液中的硫酸銨分解，游離出氨，藉助水蒸汽蒸餾法，將產生的氨蒸餾到一定量、一定濃度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨後，氨與溶液中氫離子結合，使溶液中的氫離子濃度降低，指示劑顏色改變，然後用標准無機鹽酸滴定，直至恢復溶液中原來的氫離子濃度為止。根據所用標准鹽酸的量可計算出待測物中的總氮量。蛋白質的含氮量為16%，即1克蛋白質中的氮相當於6.25克蛋白質，用凱氏定氮法測出的含氮量乘以6.25,即得樣品中蛋白質的含量。

1 實驗材料 1.1 器材 上海沛歐SKD-100定氮儀 、消化爐SKD-08S2 1.2 試劑2 實驗步驟
實驗材料
器材
上海沛歐凱氏定氮儀 1套（SKD-08S2消化爐可以任意選擇消化孔數，而不影響熱量散失）；
300ml凱氏燒瓶 4個；
移液管；錐形瓶；
試管；
小玻璃珠
試劑
98%濃硫酸分析純；
35％氫氧化鈉溶液；
2％硼酸溶液；
標准鹽酸溶液（0.01mol／L）。
粉末硫酸鉀-硫酸銅混合物 ：K2SO4與CuSO4·5H2O以3：1配比研磨混合。
混合指示劑（田氏指示劑）：由50ml 0.1％甲烯藍乙醇溶液與200ml 0.1％甲基紅乙醇溶液混合配成，貯於棕色瓶中備用。
樣品溶液：配製3mg/ml的牛血清白蛋白溶液作為樣品。
實驗步驟
安裝凱氏定氮儀。
消化：取4個300ml凱氏燒瓶並標號,各加1顆玻璃珠，在1號及2號瓶中各加樣品1ml，催化劑（K2SO4- CuSO4·5H2O）200 mg，濃硫酸5 ml。留意加樣品時應直接送進瓶底，而不要沾在瓶口和瓶頸上。在3號及4號瓶中各加1 ml蒸餾水和與1、2號瓶相同量的催化劑和濃硫酸，作為對照。在透風櫥內進行消化。在消化開始時應控制火力，不要使液體沖到瓶頸。待硫酸開始分解並放出SO2白煙後，適當加強火力，繼續消化，直至消化液呈透明淡綠色為止。撤掉火力，冷卻至室溫。 （上海沛歐SKD-08S2消化爐可編程設定消化爐消化樣品的升溫曲線）
蒸餾：
蒸餾器的洗滌：用水洗滌干凈微量凱氏定氮儀，在蒸汽發生器中加進用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑，用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀。約15分鍾後，在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶，繼續蒸汽洗滌2分鍾，觀察錐形瓶內的溶液是否變色，如不變色則證實蒸餾裝置內部已洗滌干凈。移走錐形瓶，停止加熱，打開夾子。 （沛歐skd-100可以設定清洗程序）
蒸餾：設定取30％的氫氧化鈉溶液10ml，向玻璃杯中加進蒸餾水約5ml稀釋液，設定蒸餾時間5分鍾，開始蒸餾。氨氣進進錐形瓶，瓶中的酸溶液由紫色變成綠色。再繼續下一個蒸餾操縱。待樣品和對照均蒸餾完畢後，同時進行滴定。
滴定：用0.01mol／L的標准鹽酸溶液滴定各錐形瓶中收集的氨量，硼酸指示劑溶液由綠色變淡紫色為滴定終點。
結果計算：

其中：

A為滴定樣品用往的鹽酸溶液均勻ml數；

B為滴定對照液用往的鹽酸溶液均勻ml數；

C為所取樣品溶液的ml數。