① 求實驗室減壓蒸餾裝置圖
實驗室減壓蒸餾裝置圖如下圖所示:
實驗原理
1.減壓蒸餾適用對象
在常壓蒸餾時回未達沸點即已答受熱分解、氧化或聚合的物質
2、減壓下的沸點
(1)通常液體的沸點是指其表面的蒸氣壓等於外界大氣壓時的溫度;
(2)液體沸騰時溫度是與外界的壓力相關的,即外界壓力降低沸點也降低;
(3)利用外界壓力和液體沸點之間的關系,將液體置於一可減壓的裝置中,隨體系壓力的減小,液體沸騰的溫度即可降低,這種在較低壓力下進行蒸餾的操作被稱為減壓蒸餾。
注意事項
1.真空油泵的好壞決定於其機械結構和真空泵油的質量,如果是蒸餾揮發性較大的有機溶劑,其蒸氣被油吸收後,會增加油的蒸氣壓,影響泵的抽真空效果;如果是酸性的蒸氣,還會腐蝕泵的機件;
另外,由於水蒸氣凝結後會與油形成濃稠的乳濁液,破壞了油泵的正常工作。因此,在真空油泵的使用中,應安裝必要的保護裝置。
2.測壓計的作用是指示減壓蒸餾系統內部的壓力,通常採用水銀測壓計,一般可分為封閉式和開口式兩種。使用時必須注意勿使水或臟物侵入測壓計內。水銀柱中也不得有小氣泡存在。否則,將影響測定壓力的准確性。
② 植物組織培養的流程
植物組織培養的流程:
第一步,將采來的植物材料除去不用的部分,將需要的部分仔細洗干凈,如用適當的刷子等刷洗。把材料切割成適當大小,即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鍾至數小時,沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料,可裝入紗布袋內沖洗。
第二步是對材料的表面浸潤滅菌。要在超凈台或接種箱內完成,准備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手錶等。用70%酒精浸10~30秒。由於酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用,加之70%酒精穿透力強,也很易殺傷植物細胞,所以浸潤時間不能過長。
第三步是用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多,可根據情況選取1~2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗,涮洗要每次3min左右,視採用的消毒液種類,涮洗3~10次左右。
(2)水浴鍋蒸餾法擴展閱讀
組織培養技術是在人為創造的無菌條件下將生活的離體器官(如根、莖、葉、莖段、原生質體)、組織或細胞置於培養基內,並放在適宜的環境中,進行連續培養以獲得細胞、組織或個體的技術。
組織培養技術原理
植物組織培養的原理是細胞全能性。也就是說每個植物細胞里都含有一整套遺傳物質,只不過在特定條件下才會表達。
組織培養基於此原理就可以將已處於分化終端或正在分化的植物組織脫分化,誘導形成愈傷組織,再在愈傷組織上形成新的叢生芽。
組織培養技術的應用
(1)改良作物:增加遺傳變異性。
(2)繁殖植物:組織培養中從一個單細胞,一塊愈傷組織,一個芽(或其它器官)都可以獲得無性系。無性系就是用植物體細胞繁殖所獲得的後代。
(3)有用化合物:有用化合物包括葯物、橡膠、香精油、色素等。這些化合物許多都是高等植物的次生代謝物,有些化合物還不能大規模地人工合成,而靠植物產生這些化合物來源有限。因此,利用組織培養方法,培養植物的某些器官或愈傷組織,並篩選出高產、高合成能力、生長快的細胞株系,以進行工業化生產,是一條行之有效的途徑。
③ 具塞刻度試管怎麼加到水浴鍋加熱
幾乎所有植物中都存在澱粉酶,尤其是萌發的禾穀類種子,澱粉酶活性最強。主要是α-澱粉酶和β-澱粉酶。種子萌發時,澱粉酶活性隨萌發時間迅速增加,將澱粉分解成小分子糖類,供幼苗生長。α-澱粉酶隨機水解澱粉的α-1,4-糖苷鍵,作為澱粉分解的起始酶而起主要作用;其水解產物為麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原性糖;β-澱粉酶水解非還原端的第二個α-1,4-糖苷鍵,水解產物為麥芽糖,並能使一部分糊精糖化。本實驗以萌發種子為材料,測定其中α-澱粉酶和β-澱粉酶活性的差異。
【原理】
兩種澱粉酶具有不同理化特性,α-澱粉酶不耐酸,在PH3?6以下迅速鈍化;β-澱粉酶不耐熱,在70℃下15Min則被鈍化。據此,在測定時鈍化其中之一,就可以測定出另一種酶的活力,本實驗採用加熱鈍化β-澱粉酶測出α-澱粉酶活力,再與非鈍化條件下測得的總澱粉酶活力比較,求出β-澱粉酶活力。澱粉的水解產物麥芽糖及其他還原性糖能與3,5-二硝基水楊酸試劑反應,使其還原生成紅色3-氨基-5-硝基水楊酸。在一定范圍內,其顏色深淺與澱粉酶水解產物的濃度成正比,可用麥芽糖(或葡萄糖)濃度表示,用比色法測定澱粉生成的還原糖的量,以單位重量樣品在一定時間內生成的麥芽糖的量表示酶活力。
【儀器與用具】
分光光度計;離心機;恆溫水浴器;研缽;具塞刻度試管25Ml 13支,刻度吸管1ml、2ml、5Ml各1支;容量瓶50Ml 2支。
【試劑】
麥芽糖標准液(1Mg/Ml):稱取100Mg麥芽糖,用蒸餾水溶解並定容至100Ml。
DNS試劑(3,5-二硝基水楊酸):精確稱取3,5-二硝基水楊酸1g,溶於20Ml 12Mol/L NAOH溶液中,加入50Ml蒸餾水,再加入30g酒石酸鉀鈉,待溶解後用蒸餾水定容至100Ml。蓋緊瓶塞,勿使CO2進入。若溶液混濁,可過濾後使用。
0?1Mol/L PH5?6的檸檬酸緩沖液:A液(0?1Mol/L檸檬酸):稱取分析純檸檬酸21?01g,用蒸餾水溶解並定容至1L;B液(0?1Mol/L檸檬酸鈉):稱取檸檬酸鈉29?41g用蒸餾水溶解並定容至1L;取A液55Ml與B液145Ml混勻,即為0?1Mol/L PH5?6的檸檬酸緩沖液。
1%澱粉溶液:稱取1g澱粉溶於100Ml 0?1Mol/L PH5?6的檸檬酸緩沖液中。
【方法】
1.酶液提取稱取25℃下萌發3~4天的小麥種子1?0g(芽長1?0~1?5CM),置研缽中,加少量石英砂和2Ml蒸餾水,研磨成勻漿後轉入離心管中,用7Ml蒸餾水分次將殘渣洗入離心管,提取液在室溫下放置提取15~20Min,每隔數分鍾攪動1次,使其充分提取。然後在3000r/Min轉速下離心10Min,將上清液倒入50Ml容量瓶中,加蒸餾水定容至刻度,搖勻,即為澱粉酶原液。吸取上述澱粉酶原液5Ml,放入50Ml容量瓶中,用蒸餾水定容至刻度搖勻,即為澱粉酶稀釋液。
2?麥芽糖標准曲線製作取7支幹凈的具塞刻度試管,編號,按表18-1加入試劑:
表18-1製作麥芽糖標准曲線配方表
試劑管號1234567麥芽糖標准液(ml)00.20.40.81.21.62.0蒸餾水(ml)2.01.81.61.20.80.40麥芽糖含量(mg)00.20.40.81.21.62.03,5-二硝基水楊酸(ml)2222222搖勻,置沸水浴中煮沸5Min。取出後流水冷卻,加蒸餾水定容至20Ml。以1號管作為空白調零點,在540nM波長下比色測定。以麥芽糖含量為橫坐標,吸光度值為縱坐標,繪制標准曲線。
3?酶活力的測定取6支幹凈的具塞刻度試管,編號,按表18-2進行操作。
表18-2酶活力的測定配方表
操作項目管號Ⅰ-1Ⅰ-2Ⅰ-3Ⅱ-1Ⅱ-2Ⅱ-3澱粉酶原液(ml)1.01.01.0000鈍化β-澱粉酶置70℃水浴中15Min,取出後在流水中冷卻澱粉酶稀釋液(ml)000111DNS試劑(ml)2.0002.000預保溫40℃恆溫水浴中保溫10Min1%澱粉溶液(ml)(40℃)1.01.01.01.01.01.0保溫40℃恆溫水浴中准確保溫5MinDNS試劑(ml)02.02.002.02.0搖勻,置沸水浴中5Min,取出後冷卻,加蒸餾水至20Ml,搖勻,在540nM波長下比色,記錄測定結果。
4?結果計算 用Ⅰ-2、Ⅰ-3吸光度平均值與Ⅰ-1吸光度值之差,在標准曲線上查出相應的麥芽糖含量(Mg),再按下式計算α-澱粉酶的活力(Aα),澱粉酶活性以每克鮮重所含麥芽糖毫克數(Mg/g·Min)表示: Aα=CαVTFW×t×V1(18-1)
Ⅱ-2、Ⅱ-3吸光度平均值與Ⅱ-1吸光度值之差,在標准曲線上查出相應的麥芽糖含量(Mg),按式18-1計算(α+β)-澱粉酶的活性AT?AT=CT×VTFW×t×V1
式中A:澱粉酶活性,Aα為α-澱粉酶的活性,AT為澱粉酶總活性,主要是α、β-澱粉酶的活性;
Cα:α-澱粉酶水解澱粉生成的麥芽糖量(查標准曲線求值,以下同); CT:(α+β)澱粉酶共同水解澱粉生成的麥芽糖量;
V1:顯色所用酶液體積(Ml);
T:酶作用時間(Min);
VT:樣品稀釋液總體積(α-澱粉酶為50Ml,α+β澱粉酶為500Ml);
FW:樣品鮮重(g)。
④ 能否把水浴鍋放在電爐上蒸餾乙醚為什麼
不能把水浴鍋放在電爐上蒸餾乙醚,因為乙醚既易揮發,又容易著火,不能。
⑤ 為什麼測定酶活力的試劑要在40℃蒸餾水浴鍋中預熱
讓其先達到最適溫度 再進行測試 因為酶的催化速率是很驚人的 所以必須讓其一測試 就是最佳狀態
⑥ 檢驗葡萄酒酒精度用蒸餾法,蒸餾出來還用恆溫水浴鍋里放置15分鍾嗎
是的 恆溫水浴鍋溫度控制的精度比較高,像電爐就不行了,電爐表面溫度很難控制,還是用恆溫水浴鍋進行蒸餾的好
⑦ 恆溫水浴鍋里的水是蒸餾水還是自來水
最好用蒸餾水,這樣使用過程中避免產生水垢,日後難於清理。