DEAE52隻有蒸餾水的峰

A. 請問蒸餾水的拉曼峰是什麼意思

-- 拉曼光譜小常識
拉曼是一種光散射過程 Raman Effect = Light Scattering
激光能量 - 振動譜能量 = 拉曼散射光能量 (振動譜能量對應分子結構)
激光能量 - 拉曼散射光能量 = 振動譜能量 （所得拉曼譜即為分子的指紋）
拉曼光譜系統常用激光波長
拉曼光譜系統組成部分拉曼光譜的優點和特點
• Fingerprint for Qualitative identification 指紋性振動譜
•No sample preparation 不用樣品制備
• Fast and non destructive 快速，無損
• Highly selective technique 高選擇度北 為何使用微區拉曼 高空間解析度； 所須樣品量少
拉曼散射光譜應用
拉曼光譜是直接聯系於分子結構的振動譜，可對物質進行指紋性認證。物質結構的任何微小變化會非常敏感反映在拉曼光譜中，因而可用來研究物質的物理化學等各方面性質隨結構的變化。
廣泛的應用領域：
* 高分子聚合物 * 納米材料 * 電化學 * 半導體 * 薄膜 * 礦物學 * 生物 * 醫學葯品 * 碳化物 * 在線過程監測 * 質量控制
* 刑偵：
- 玻璃材料 - 氧化物 - 油漆和顏料 - 氫氧化物 - 高分子 - 硫化物 - 爆炸 - 碳酸鹽 - 纖維 - 硫酸鹽 - 化學殘留物 - 磷酸鹽 - 顆粒性包裹體 - 麻醉劑和可控制物質 等等……

http://www.oacc.com.cn/printpage.asp?BoardID=4&ID=137

http://www.instrument.com.cn/show/download/shtml/001309.shtml

B. 紫菜多糖用deae提取為什麼出現兩個波峰

EDAE是哪種凝膠柱？ 是不是弱陰離子交換柱DEAE？ 如果是DEAE的話給你一點清洗的參考 一，在位清洗 1， 用2M的NaCl至少清洗2個柱體積。
2， 用1M的NaOH 至少清洗4個柱體積。 3， 用2M的NaCl至少清洗2個柱體積。 4， 用至少2個柱體積的蒸餾水潤洗。

C. 為什麼分子量較大的部分經DEAE-52洗脫後分子量變小

分子量大的多元醇相對柔軟，分子量小的相對硬，所以就如你問的問題一樣。軟的做軟泡，硬的做硬泡。這些都可以通過實驗可以體會得到的。

D. DEAE-52離子交換層析中怎樣確定Nacl濃度范圍

要是沒有任何文獻報道過的，預試驗建議作全部的0%-100%，然後看最後的內OD值合並峰值附近的收集液SephadexG-25除鹽，容然後測定活性，確定你要收集的峰。這樣肯定不會漏掉你要的峰。然後你就可以重復實驗了。

E. 您好！請教：我在處理DEAE-52纖維素，剛開始用鹼洗都很好抽濾，可是後來酸浸泡之後用水洗很難抽濾

..............這個底下不是有。。一層膜嗎！不用可以塞棉花的。

F. DEAE-52纖維素柱求助

DEAE-纖維素復 DEAE cellulose DEAE-纖維素 DEAE cellulose 為二乙氨乙基纖制維素。是陰離子交換纖維素之一。 DEAE—纖維素的活化：稱取IgDEAE32或52，放入5ml量筒中，加蒸餾水浸泡過夜，觀察溶脹後DEAE的體積。根據所需層析柱的柱床體積計算所需DEAE

G. 過完deae52柱子，怎麼把nacl 洗脫干凈

DEAE-52因是離子型介質，一般常用酸鹼處理，先用0.5mol
NaOH鹼洗，蒸餾水洗至中性後，再用0.5molHCl酸洗，蒸餾水洗至中性，再用0.5mol
NaOH鹼洗，蒸餾水洗至中性。然後用你的初始洗脫液平衡後上樣正常分離就可以了。

H. 纖維素DE-52的提取方法

纖維素DE-52提取法純化多克隆抗體
該法提取IgG簡便，既可小量提取，也可大量制備。
1．批量提取法 稱取DEAE-纖維素(DE52)50g，置於1000ml燒杯中，先以蒸餾水漂浮除去細顆粒，再經酸鹼處理後，用0.01～0.05mol/L，pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡。將水分抽干，或用布氏濾斗(內放兩層濾紙)過濾，收集濕纖維素，以降低其離子強度。按1ml血清加濕重5g DE52，經過充分攪拌，置4℃吸附1h。上清液可再如此處理一次，即獲得較純的IgG。該法提取IgG簡便，既可小量提取，也可大量制備。
2．Tris-Cl離子交換層析法(Ion-exchange chromatography)
【材料和試劑】
（1）DE52纖維素。
（2）HCl；NaOH；0.01～0.05mol/L，pH8.0 PB；0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl；0.5mol/L NaCl。
（3）待純化標本：雜交瘤腹水或培養上清，免疫血清或飽和硫酸銨粗提品。
（4）1.5×50cm 層析柱；透析袋；紫外分光光度計及其他透析和層析所需的試劑和器材。
【操作步驟】
（1）DE52纖維素的處理：DE52經酸、鹼處理，0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl平衡。
（2）裝柱：將層析柱固定於滴定架上，柱底墊一圓形尼龍紗，出口接一細塑料管並關閉出水。將浸泡於0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl中的DE52沿玻璃棒倒入柱中，待DE52自然沉降3～5cm高時，吸除0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl，或松開出水口螺旋夾，控制流速1～2ml/min，同時連續加入DE52至所需高度。待DE52完全沉降後，柱面放一圓形濾紙片。
（3）平衡：松開出水口螺旋夾，以0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl平衡，控制流速為15滴/min，待流出液與洗脫液之pH值達到一致時，停止平衡。
（4）待提取樣品的准備：將蛋白裝入透析袋裡，置4℃冰箱，對0.01mol/L pH8.6 Tris-Cl透析過夜。
（5）加樣、洗脫與收集：用吸管吸去柱面液體，以毛細吸管沿柱壁加入樣品，樣品體積相當於柱床體積的1%～2%，蛋白濃度為50～70mg。啟開出水口螺旋夾使樣品緩慢進入柱床內，並用少量洗脫液清洗柱壁；待液體進入柱床後，以0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl洗脫，控制流速為14～16滴/min。分部收集器收集，紫外監測，或人工收集，以紫外分光光度計分別測定每管280nm OD值，描繪洗脫液峰。
（6）濃縮：將洗脫液的280nm OD上峰段與下峰段各管分別合並，裝入透析袋，以PEG濃縮至所需體積。
Tris-PO4離子交換層析法
該法在上述方法的基礎上稍加改良，即通過梯度洗脫，可用於血清中IgG和IgM的提取。
【材料和試劑】
（1）DE52纖維素。
（2）待純化標本：雜交瘤腹水或培養上清，免疫血清或飽和硫酸銨粗提品。
（3）1.5×50cm 層析柱；透析袋及其他透析和層析所需的試劑和器材。
（4）梯度洗脫液包括：0.005 mol/L，pH8.6 Tris-PO4；0.055mol/L，pH6.0 Tris-PO4；.5mol/L，pH5.1 Tris-PO4。
【操作步驟】
（1）蛋白標本對0.005mol/L，pH8.6 Tris-PO4透析。
（2）DE52裝柱，並以0.005mol/L，pH8.6 Tris-PO4平衡。
（3）加樣，以0.005mol/L，pH8.6 Tris-PO4洗脫，紫外監測直至洗脫液280nm OD回到基線。這一步驟可除去血清中其他蛋白。
（4）以350ml 0.055mol/L，pH6.0 Tris-PO4洗脫，這一步驟可用於純化血清IgG和IgM。
（5）以125ml 0.055mol/L，pH6.0 Tris-PO4和125ml 0.5mol/L，pH5.1 Tris-PO4梯度洗脫，總量收集250ml；重復步驟（5）。
（6）根據280nm峰值合並蛋白峰，透析濃縮和保存同上。
用過的DE52可用0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl和0.5mol/L NaCl、0.01mol/L，pH8.6 Tris-Cl梯度洗脫回收。再用蒸餾水洗至中性，加入0.02%疊氮鈉於4℃保存備用。

I. DEAE-52交換層析洗脫曲線為什麼那麼平緩呢

洗脫什麼物質？