① 飼料中蛋白氮和非蛋白氮的測定有什麼快速法嗎
一、硫酸銅沉澱法
根據非蛋白氮的化學性質來看，大部分溶於水，一部分在常溫下不溶水，但在沸水中溶解。根據此種性質，可以先將樣品煮沸，用硫酸銅將樣品中的蛋白質沉澱下來，由於非蛋白氮已經溶於水，故可用過濾方法將其與樣品中的蛋白質分離。在過濾時，水的溫度一定不能太低，否則象雙縮脲一類的物質會因為不溶於常溫水而不能被過濾掉。用此種方法測定出的蛋白質含量稱為樣品的真蛋白質。但實際上，此種方法有很大的局限性。如果非蛋白氮不溶於沸水，或者將一般的非蛋白氮微囊化，此種方法測出的結果會與樣品中的實際真蛋白有很大的差異。
二、氨基酸測定法
為了真正能夠判定樣品中是否摻有非蛋白氮，需測定樣品中的氨基酸含量。無論採用經典的氨基酸自動分析儀分析（柱後衍生），還是採用比較快捷的HPLC分析（往前衍生），將所測定的氨基酸總量相加得到一個總氨基酸數值，然後將此數值乘以6.25為M，和用凱氏定氮法測定的粗蛋白質N相比較，M至少為N的85％（M可能略大於N）。如果低於此數值，則可以判定該樣品中摻有非蛋白氮。
三、水解蒸餾法
1、原理：非蛋白氮主要包括五類：尿素及其衍生物類、氨態氮類、銨類、肽類及其衍生物、動物糞便及其它廢棄物類。如果在原料中摻有氨態氮類、銨類和糞便比較容易判斷（可採用硫酸銅沉澱法加鏡檢），一般很少將肽類及其衍生物摻入其中，剩下比較難鑒別的就是尿素及其衍生物。尿素和尿素衍生物經過強酸或強鹼水解為氨鹽或氨和其它的物質，在強鹼的條件下可以蒸餾出氨氣，原料中的蛋白質經過水解成氨基酸鹽，氨基酸鹽在強鹼條件下穩定，從而可將非蛋白氮和真蛋白氮進行分離。
2、儀器和設備：酒精噴燈，試管和其它常用的儀器。
3、試劑與溶液：6mol/l的鹽酸溶液和其它常用的試劑。
4、測定方法：本文只列出用酸水解的方法。採集有代表性樣品約100g，混勻後用四分法縮分出209左右，將其粉碎，使其全部通過60目樣品篩。精確稱取0.3000g的樣品，置於容積為60ml的試管底部（注意樣品勿沾在管壁上），加入30ml 6mol/l的鹽酸溶液，將試管在距試管口1～2cm處用噴燈加熱並封口。將封好的試管置於乾燥箱內，於110℃下水解24h。冷卻後打開試管，將水解液過濾至100ml容量瓶中，用蒸餾水反復多次沖洗試管和濾紙，然後定容至刻度。用10ml移液管移取10ml樣液移入半微量式定氮儀的反應室中，加入20ml 1∶1的氫氧化鈉溶液蒸餾10 min，餘下的步驟按照測定粗蛋白的方法進行操作，得出樣品所消耗的鹽酸的體積為V1（ml）。同時作空白滴定可得消耗的鹽酸的體積為V0，設所稱樣品的質量為M（g）。
5、非蛋白氮的粗蛋白質計算公式
CP(%)＝（V1-V0）×C×O.14×6.25/M 蛋白就用凱氏定氮法1、 樣品處理：精密稱取0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸取10-20ml液體樣品（約相當氮30-40mg），移入乾燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，3g硫酸鉀及20毫升硫酸，稍搖勻後於瓶口放一小漏斗，將瓶以45度角斜支於有小孔的石棉網上，小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止後，加強火力，並保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明後，再繼續加熱0.5小時。取下放冷，小心加20ml水，放冷後，移入100ml容量瓶中，並用少量水洗定氮瓶，洗液並入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸銨同一方法做試劑空白試驗。
2、 按圖裝好定氮裝置，於水蒸氣發生器內裝水約2/3處加甲基紅指示劑數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數粒玻璃珠以防暴沸，用調壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。
3、 想接收瓶內加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示劑1滴，並使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化液由小玻璃杯流入反應室，並以10ml水洗滌小燒杯使流入反應室內，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將10ml 40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應室，立即將玻璃蓋塞緊，並加水於小玻璃杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾，蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內，蒸餾5min。移動接收瓶，使冷凝管下端離開液皿，再蒸餾1min，然後用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.01N硫酸或0.01N鹽酸標准溶液定至灰色或藍紫色為終點。
同時吸取10.0ml試劑空白消化液按3操作。
計算：
X =(（V1-V2）*N*0.014)/( m*（10/100）) +F*100
X：樣品中蛋白質的含量，g；
V1：樣品消耗硫酸或鹽酸標准液的體積，ml；
V2：試劑空白消耗硫酸或鹽酸標准溶液的體積，ml；
N：硫酸或鹽酸標准溶液的當量濃度；
0.014：1N硫酸或鹽酸標准溶液1ml相當於氮克數；
m：樣品的質量（體積），g（ml）；
F：氮換算為蛋白質的系數。蛋白質中的氮含量一般為15～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.70，玉米、高粱為6.24，花生為5.46，米為5.95，大豆及其製品為5.71，肉與肉製品為6.25，大麥、小米、燕麥、裸麥為5.83，芝麻、向日葵為 5.30。
② 飼料化驗 粗蛋白消化後加蒸餾水為什麼變紅
不應該是紅色，如果變紅色，一定是水中或消化液中有金屬雜物。不能繼續化驗了，重新做。
③ 飼料中蛋白質的檢測方法的詳細步驟
准確稱取飼料的重量按重量體積比加入一定量的緩沖液（或者直接定容），充分抽提（可以超聲破碎儀多超聲幾次以便充分提取），至於測定的方法有很多：考馬斯亮蘭法 BCA法等等
④ 化驗飼料中真蛋白含量使用的氫氧化鈉溶液的配製與標定
一、原理 蛋白質在一定鹼性條件下能與重金屬鹽類發生鹽析作用而析出沉澱．此沉澱物不溶於熱水。而非蛋白氮類物質易溶於水。用熱水洗滌沉澱．將水溶性含氮物質洗去，剩下的沉澱物質再用凱氏定氮法測定即可得出飼料真蛋白質的含量。 二、測定所需的材料 1．儀器和設備 實驗室用台式粉碎機、分樣篩(20目)、分析天平(感量0．1mg)、燒杯(250m1)、玻璃棒、玻璃漏斗、中速定量濾紙(直徑15cm)、表面皿(直徑10cm)、乾燥箱(可控溫度65～70℃)、凱氏燒瓶(100m1)、燒煮爐或電爐、半微量定氮蒸餾器、容量瓶(100m1)、錐形瓶(250m1)、酸式滴定管(50m1)。 2．試劑與試液 硫酸AR、10％ 硫酸銅水溶液、硫酸鉀或無水硫酸鈉AR、氫氧化鈉AR、40％ 氫氧化鈉水溶液、2．5％氫氧化鈉水溶液、2％ 硼酸水溶液、0．05％mo]／]鹽酸標准溶液、氯化鋇試液、5％氯化鋇水溶液、0．1％ 甲基紅乙醇溶液、0．5％ 溴甲酚綠乙醇溶液。 三、樣品的選取與制備 取有代表性的樣品約lkg。用四分法分為兩份。一份裝瓶加封作為留用樣品。另一份粉碎過20目。裝於廣口瓶中貼標簽待測。 四、測定步驟 1．試樣的前處理 准確稱取試樣1～2g(精確到0．1mg)於250ml燒杯中，加蒸餾水50ml煮沸．依次加入10％硫酸銅水溶液20ml和25％氫氧化鈉溶液20rnl，邊加邊攪拌，加完後繼續攪拌幾分鍾。放置2小時或靜置過夜，沉澱物以中速定量濾紙過濾。用70℃以上熱水18ml反復洗滌沉澱．直至濾液無沉澱為止(取氯化鋇試液滴於表面皿中。加2mol／l鹽酸溶液1滴．滴人濾液．在黑色背景下觀察應無白色沉澱)。然後，將濾紙和沉澱物包好，放人烘箱中在65～70℃下乾燥2小時。 2．試樣的消化 將烘乾的試樣連同濾紙一起放人凱氏燒瓶中．依次加入硫酸鉀或無水硫酸鈉9 硫酸銅1 濃硫酸25ml，搖勻，爾後置於電爐上先低溫(100～200~C)加熱，注意防止泡沫浮起，待泡沫消失後再提高加熱溫度(約410~C)至沸騰，消化至溶液澄清無黑點並呈藍綠色，再繼續加熱30分鍾，然後將凱氏燒瓶移出電爐放冷。 3．定容 將冷卻後的消化液加蒸餾水約10～20ml，』搖勻後轉入100ml容量瓶中，再加10～20ml蒸餾水洗滌凱氏燒瓶。溶液並入容量瓶中，如此反復洗滌，直至消化液全部轉入容量瓶中。待冷卻至室溫後，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。即為試樣分解液。 4．蒸餾 採用半微量凱氏定氮蒸餾法。先將水蒸汽發生器與半微量凱氏定氮蒸餾器連接好。在水蒸汽發生器的水中加入甲基紅指示劑3滴與硫酸數滴，使水溶液保持橙紅色，否則應補加少許硫酸。取20ml2％硼酸水溶液於250ml錐形瓶中，加0．1％甲基紅乙醇溶液5～6滴，0．5％溴甲酚綠乙醇溶液2～3滴，搖勻。然後將錐形瓶置於半微量凱氏定氮蒸餾器的末端．使冷凝管末端浸入此吸收液面下2／3處。准確移取試樣分解液10～15ml注入半微量定氮蒸餾器中，用少量蒸餾水沖洗進樣口，爾後緩慢加入40％氫氧化鈉水溶液20ml。用少量蒸餾水沖洗進樣口，用玻璃塞塞好進樣口。再加適量蒸餾水封住進樣口以防止漏氣。蒸餾3～5分鍾以後待冷凝管末端管口之餾出液呈中性(紅色石蕊試紙不變色)時將冷凝管末端離開吸收液面並沖洗冷凝管末端管口，洗液並入吸收液。再蒸餾1～2分鍾後用蒸餾水沖洗冷凝管末端管口，洗液並入吸收液。然後將錐形瓶移出，准備滴定。此時應夾斷氣源。排出廢液，准備下一個樣品的測定。 5．滴定 吸收氨後的吸收液立即用0．05tool／1的鹽酸標准溶液滴定使溶液顏色由藍綠色變為灰紅色即為滴定終點。同時記錄鹽酸標准溶液的耗用量。 6．空白 在進行樣品測定的同時進行空白測定。空白測定除不加試樣外其他操作步驟與試樣相同。空白試驗消耗的鹽酸標准溶液的體積不得超過0．5ml。 7．結果計算 五、注意事項 1．在試樣的前處理過程中，「煮沸」要求是加熱至沸並保持30分鍾，目的是使試樣中的非蛋白氮類物質充分溶解於水中。加10％硫酸銅溶液和25％氫氧化鈉溶液時最好採用移液管移取，然後沿著燒杯內壁緩慢滴加，一方面防止局部氫氧化鈉太濃將溶解部分蛋白質，這樣會導致最終結果偏低；另一方面是為了使試樣中的真蛋白質充分鹽析：放置2小時或靜置過夜也是這個道理。沉澱物宜以雙層中速定量濾紙過濾，雙層濾紙可以加快過濾速度，同時又不致於將沉澱物過濾掉。濾液無SO+2表明了已充分洗滌沉澱物，因為如果濾液中仍有SO+2 。則表明沉澱物中間仍可能夾雜有部分可溶性非蛋白氮類物質(如NH )，若不繼續洗滌則將導致最終結果偏高。將濾紙和殘渣(沉澱物)包好放入烘箱中於65～70cc下乾燥2小時是為了使沉澱物充分乾燥。一方面是為了避免沉澱物中仍夾雜有一些氨類物質(盡管這種情況一般不會發生。因為濾液已經過了氯化鋇試液的檢驗，但仍不能排除因人眼觀察的局限性使其中間仍夾雜有部分熱烘乾的過程中揮發掉)；另一方面也是為了下一步試樣消化的順利進行。因為如果試樣潮濕，炭化升溫過快，氣體驟然膨脹不易從凱氏燒瓶中散發出去，很容易使試樣與氣體一同沖出凱氏燒瓶從而導致消化失敗。 2．消化時應經常轉動凱氏燒瓶以便使消化進行得迅速而完全。在炭化時如有黑色碳粒濺在瓶壁上應將凱氏燒瓶移出。待冷卻後加少量蒸餾水沖洗之。爾後再繼續消化 3．對膠體物質或脂肪含量較高的樣品。消化時應防止泡沫溢出瓶口．如發現有泡沫溢至瓶頸時應立即移開火源，並加1～2滴蒸餾水再繼續消化。 4．蒸餾過程中要注意氣體通路。即管夾要有一個打開，以免燙傷。在加試樣分解液或鹼液於反應室時要快。應先檢查氣源是否夾斷。廢液流出口是否暢通。開始蒸餾時應先通蒸汽後夾斷廢液排出口。否則所加液迴流排出。 核心提示：飼料特別是植物性飼料中含量較多的非蛋白氮化合物如氨化物不能或不能完全被單胃動物(如豬、禽等)利用，只有真蛋白質才能被單胃動物消化、吸收與利用。因此飼料真蛋白質含量比飼料粗蛋白含量更能反映出飼料的營養價值。
⑤ 怎麼測出飼料中的蛋白和能量
飼料中的粗蛋白含量一般用凱氏定氮法測定。
即在有催化劑的條件下，用回濃硫酸消答化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽，然後在鹼性條件下將銨鹽轉化為氨，隨水蒸氣蒸餾出來並為過量的硼酸液吸收，再以標准鹽酸滴定，就可計算出樣品中的氮量。由於蛋白質含氮量比較恆定，可由其氮量計算蛋白質含量，故此法是經典的蛋白質定量方法。
測定飼料當中的能量有能量測定儀，一般是稱重之後，將飼料樣品放入儀器中操作，即可得到數值。
⑥ 飼料中真蛋白的檢測方法
凱氏定氮法 網上沒找到，就自己打了一份
飼料中純蛋白質（真蛋白）的測定
一、測定原理
飼料蛋白質經沸水提取並在鹼性溶液中被硫酸銅沉澱。過濾和洗滌後，可將純蛋白質和非蛋白質含氮物分離，再用凱氏定氮法測定沉澱物中的蛋白質含量。
二、儀器設備
（1）燒杯：200ml
（2）定型濾紙
（3）其他設備與粗蛋白質測定法相同
三、試劑與配製
（1）100g.L-1硫酸銅溶液；分析純硫酸銅（5水硫酸銅）10g溶於100ml水中
（2）25g.L-1氫氧化鈉溶液：將2.5g分析純氫氧化鈉溶於100ml水中
（3）10g.L-1氯化鋇溶液：1g氯化鋇溶於100ml水中
（4）2mol.L鹽酸溶液
（5）其他試劑與粗蛋白質測定法相同
四、測定步驟
准確稱取試樣1g左右（精確至0.0001g）置於200ml燒杯中，加50ml水中，加熱至沸。
加入20ml硫酸銅溶液，20ml氫氧化鈉溶液，用玻璃棒充分攪拌，放置1h以上。用定性濾紙過濾，然後用60~80攝氏度熱水洗滌沉澱5或6次，用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾紙，直至不生成白色硫酸鋇沉澱為止。將沉澱和濾紙放在65攝氏度烘箱乾燥2h，然後全部轉移到凱氏燒瓶中，按半微量凱氏定氮法進行氮的測定。
⑦ 飼料中蛋白質的測定中樣品分解液蒸餾用體積指的是什麼
分解液定容後，用移液管移取用於蒸餾的體積。
⑧ 飼料蒸餾粗蛋白以後，蒸餾體積多少餾時間以吸收液體體積達到錐形瓶ml為宜
用半微量蒸餾法做飼料粗蛋白時蒸餾發生器硫酸應加多少
蛋白質是含氮的有機化合物。食品與內硫酸和催化劑容一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質含量。
有機物中的胺根在強熱和CuSO4，濃H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4
反應式為：
2NH2+H2S04+2H＝(NH4)2S04 （其中CuSO4做催化劑）
2.在凱氏定氮器中與鹼作用，通過蒸餾釋放出NH3 ，收集於H3BO3 溶液中
反應式為:
(NH4)2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO4
2NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2O
3. 用已知濃度的H2SO4（或HCI）標准溶液滴定，根據HCI消耗的量計算出氮的含量，然後乘以相應的換算因子，既得蛋白質的含量
反應式為：
(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O＝(NH4)2SO4+4H3BO3
(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3
⑨ 飼料中真蛋白的檢測方法，盡可能詳細說明步驟
飼料中純蛋白質的測定 一、測定原理 硫酸銅在鹼性溶液中，可將蛋白質沉澱，且不溶於熱水，過濾和洗滌後，可將純蛋白質和非蛋白質含氮物分離，再用凱氏定氮法測定沉澱中的蛋白質含量。 二、儀器設備 （1）燒杯：200mL。 （2）定性濾紙。 （3）其它設備與粗蛋白質測定性相同。 三、試劑及配製 （1） 100g/L硫酸銅溶液：分析純硫酸銅（CuSO4 5H2O）10g溶於100mL水中。 （2） 25g/L氫氧化鈉溶液：將2.5g分析純氫氧化鈉溶於100mL水中。 （3） 10g/L氯化鋇溶液：1g氯化鋇（BaCl2 H2O）溶於100mL水中。 （4） 2mol/L鹽酸溶液。 （5） 其它試劑與一般粗蛋白質測定法相同。 四、測定步驟 准確稱取試樣1g左右（精確至0.0001g），置於200mL燒杯中，加50mL水，加熱至沸，加入20mL硫酸銅溶液，20mL氫氧化鈉溶液，用玻璃棒充分攪拌，放置1小時以上，用傾斜過濾（用定性濾紙），然後用60-80℃熱水洗滌沉澱5-6次，用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾液，直到不生成白色硫酸鋇沉澱為止。將沉澱和濾紙放在65℃烘箱乾燥2小時，然後全部轉移到凱氏燒瓶中，消化後進行氮測定。 五、結果計算 同粗蛋白質測定。
⑩ 用半微量蒸餾法做飼料粗蛋白時蒸餾發生器硫酸應加多少
用半微量蒸餾法做飼料粗蛋白時蒸餾發生器硫酸應加多少
蛋白質是含氮的版有機化合物權。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質含量。
1.有機物中的胺根在強熱和CuSO4，濃H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4
反應式為：
2NH2+H2S04+2H＝(NH4)2S04 （其中CuSO4做催化劑）
2.在凱氏定氮器中與鹼作用，通過蒸餾釋放出NH3 ，收集於H3BO3 溶液中
反應式為:
(NH4)2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO4
2NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2O
3. 用已知濃度的H2SO4（或HCI）標准溶液滴定，根據HCI消耗的量計算出氮的含量，然後乘以相應的換算因子，既得蛋白質的含量
反應式為：
(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O＝(NH4)2SO4+4H3BO3
(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3