『壹』 进行色谱分析时，分离效果，柱效，选择性，怎样算好，怎样算差
装填有固定相用以分离混合组分的柱管。
多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。
色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。液相色谱通常均采用填充柱。
色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相，以及色谱柱的制备和操作条件。
色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）、多孔碳等，其粒度一般为3,5,7,10μm等，柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效；对于同系物分析，只要500即可；对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子，因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到最佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构（尽可能减少填充床以外的死体积）及装填技术。即使最好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
『贰』 如何测试色谱柱柱效是否降低
判断色谱柱柱效下降可以通过以下几个途径：
1.看峰分离度怎么样，分离度直接关专系测试结果准确性属，可以判断柱效是否下降，柱效下降分离度一般会变差。
2.通过谱图峰型的变化，是否有严重前伸和拖尾现象，峰型是否规则来看，如果峰型很差了，柱效已经下降了，可以及时采用乙腈和甲醇等溶剂进行修复。
3.通过压力变化和出峰时间来判断，一般柱效下降时伴随着柱压的升高和降低，此时出峰的时间也会和之前有很大差异。
4.还可以根据新的柱子的保留时间判断,看重复性,平行性如何.
1)
保留时间变短；
2）理论塔板数降低；
3）峰对称度变差；
4）分离度减小。
『叁』 离子色谱柱能用纯水冲洗吗，这样是否会影响柱子的性能。
按看说明书或咨询色谱柱厂商，防止损害色谱柱，离子柱都不便宜，小心为上。
用纯水短时间内冲洗色谱柱，通常不会对色谱柱造成较大的损伤，但如果长时间用水冲洗色谱柱则
可能引起固定相流失和相塌陷现象，所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱，建议在水中加入一定
量的甲醇或乙腈进行冲洗，通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。
原因分析：
首先，由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质，硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一
定浓度有机溶剂的流动相中要大得多，所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失，引起柱效下降。
其次，对于常规的 C18 柱而言，由于C18 长链与水是不互溶的，C18 长链之间的相互作用力大于
C18 与水分子的作用力，长时间的用水冲洗，使得C18 长链之间相互靠近，水流的冲刷，导致相互联结
的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面，对疏水性物质的保留能力下降，即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出
现相塌陷的现象，有些厂家推出了纯水柱（如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱），这种纯水柱可以用纯
水作流动相而不会产生相塌陷，这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。
第三，如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱，用纯水冲洗，并一定能将缓冲盐完全洗去。因为，由
于缓冲盐难溶于有机溶剂，C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链，相当于一
个疏水的有机相，而硅胶基体被有机物质包裹着，所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易
到达硅胶基质，不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂，而且这些有机溶剂与C18
长链是互溶的，因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力，能使部分缓冲盐达到硅胶基质。
同样的道理，用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐，而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在
水中加入部分有机溶剂进行冲洗，一般的C18 柱通常用含水20％～90％都可以，含水的比例要视分析
时使用的流动相来定，原则上，用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于（缓冲盐用后清洗的情况，
推荐使用“等于”）分析时所用流动相中水的比例。
『肆』 那些HPLC色谱柱可以用纯水
你问的应该是反相色谱柱，因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列，Aichorm的Aqua系列，都是回可以做纯水答相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例，那就不必了，普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗，不超过10个柱体积，是没什么问题的。
『伍』 正相C18色谱柱进一点水会影响柱效吗
正相C18色谱柱。判断色谱柱柱效下降可以通过以下几个途径： 1.看峰分离度内怎么样,分离度直接关系容测试结果准确性,可以判断柱效是否下降,柱效下降分离度一般会变差. 2.通过谱图峰型的变化,是否有严重前伸和拖尾现象,峰型是否规则来看,如果峰型很差了,柱效已经下降了,可以及时采用乙腈和甲醇等溶剂进行修复. 3.通过压力变化和出峰时间来判断,一般柱效下降时伴随着柱压的升高和降低,此时出峰的时间也会和之前有很大差异. 4.还可以根据新的柱子的保留时间判断,看重复性,平行性如何. 1) 保留时间变短； 2）理论塔板数降低； 3）峰对称度变差； 4）分离度减小.
『陆』 正相色谱柱吸附了水分柱效为什么会下降
判断色谱柱柱效下降可以通过以下几个途径： 1.看峰分离度怎么样,分离度直接关系测试回结果准确答性,可以判断柱效是否下降,柱效下降分离度一般会变差. 2.通过谱图峰型的变化,是否有严重前伸和拖尾现象,峰型是否规则来看,如果峰型很差了,柱效已经下降了,可以及时采用乙腈和甲醇等溶剂进行修复. 3.通过压力变化和出峰时间来判断,一般柱效下降时伴随着柱压的升高和降低,此时出峰的时间也会和之前有很大差异. 4.还可以根据新的柱子的保留时间判断,看重复性,平行性如何. 1) 保留时间变短； 2）理论塔板数降低； 3）峰对称度变差； 4）分离度减小.
『柒』 进行色谱分析时分离效果柱效选择性怎样算好怎样算差
要改善的条件很多，介绍几种供参考1、色谱柱，色谱柱使用时间长了，柱效会降低，会影专响到分离度的，改善属方法是更换新的色谱柱。如果已经是新的色谱柱了，分离度还不好，那可以采用更长一些的色谱柱，也会增加分离度。2、流动相的调节，通过调节流动相中各组分的比例，使流动相的极性发生变化，分离效率会不一样，这要针对要检测的成分具体情况进行分析确定。3、改变柱温，相同条件下升高柱温，会增大色谱柱的分离能力而提高分离度。
『捌』 请教：纯水冲洗色谱柱，柱效降低，如何恢复
更换超纯水柱。
『玖』 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
容易引起疏水坍塌，把强保留物质冲出来，会毁了柱子的，所以水相不能超过95%，最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相，但是不是纯水相。
『拾』 过柱色谱进行粗分的时候，柱子填装过高，会不会导致柱效变差啊
理论上来说是的，因为在其他条件不变的情况下，柱长越长，待分离组分在柱中的时间就越内长，进而导致容组分在色谱柱中的扩散 作用越强，同时，组分在色谱柱壁上的时间越长会使拖尾越严重，柱效都会下降
一半柱长是直径的6倍左右吧