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病理科需要纯水吗

发布时间:2022-08-13 14:53:50

❶ 基因测序,pcr对纯水有什么要求

PCR产物直接测序技术现已成为分子生物学和基因组学研究中的一个重要技术,广泛用于基因突变检测、遗传性疾病诊断、单核苷酸多态性研究、基因组重叠序列群等.与传统克隆测序技术相比较,直接对PCR扩增的DNA进行测序,省去了耗时的克隆步骤,避免了传统的细菌培养,模板提取等重复性操作,可以从少量的原始样品中得到正确的DNA序列信息.PCR产物直接测序技术具有快速、简便、稳定经济的优点. 试验试剂 PCR扩增的双链DNA模板长约20个核苷酸的DNA引物 DNA聚合酶测序胶 0.1mol/L DDT α-32P-dATP dNTP/ddNTP混合物(80μmol/L/8μmol/L) dNTP(dCTP、dGTP 、dTTP 各0.75μmol/L) 测序反应缓冲液:40mmol/L Tris-HCl(pH7.5),20mmol/L MgCl2,50mmol/L NaCl 终止缓冲液:95% 甲酰胺,20mmol/L EDTA,0.05% 溴酚蓝,0.05% 二甲苯腈试验步骤: 1、 4个微量离心管中各加入dNTP/ddNTP混合物2.5μl,混合物37OC温浴5min,备用. 2、 在一个空的微量离心管中加入1pmol的PCR扩增双链DNA,10pmol测序引物,2μl 5×测序缓冲液,加双蒸水至总体积10μl,96OC加热8min,冰浴泠却1min,4OC 10000g离心10s. 3、 加入2μl预冷的标记混合物(dCTP、dGTP 、dTTP 各0.75μmol/L),α-32P-dATP 5μCi,1μl 0.1mol/L DDT,测序酶2U,加水至15μl,混匀后置冰上2min,标记新合成的DNA链. 4、 在第1步骤的4个管中各加入3.5μl标记反应混合物,37OC温浴5min.每管各加入4μl终止液. 5、 样品在80OC的水浴中热变性5min,每一泳道加2μl 加到测序胶上,电泳分离这些片段. 注意事项: 1.?PCR产物要有一定的长度(>200bp),因为测序结果两端20-30bp的电泳峰图的准确性较低. 2.?纯化PCR产物可通过离子交换层析使扩增的DNA段与反应剩余的dNTP及引物分离;也可通过琼脂糖凝胶电泳,将PCR产物与非特异性扩增产物和引物分离开来;如果扩增的特异性较高时,可直接通过酚:氯仿抽提,乙醇沉淀的方法来纯化. 3.?测序引物设计原则类似于PCR引物设计,可在DNA合成仪上合成20个左右的核苷酸作为引物,经过高压液相层析或聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化后,即可用作测序引物. PCR循环测序法 PCR循环测序法是将PCR扩增和核酸序列分析技术相结合,从而形成的一种测定核苷酸序列的研究方法,也称作线性扩增测序.该方法采用PCR仪加热使DNA模板变性,在TaqDNA聚合酶作用下,以温度循环模式在模板上进行多轮的双脱氧核苷酸测序反应,线性扩增标记的DNA分子. PCR循环测序法与以往的测序方法相比,其优点在于:大大减少所需的模板量;能提高测序反应产生的信号,降低了操作的复杂性,且聚合酶的用量减少;可在小量制备的模板上进行筛选反应;高温下进行的测序反应使DNA聚合酶催化的聚合反应能够通过模板二级结构的区域;双链闭环DNA可以直接作为反应模板应用,不用作预先碱变性处理.由于PCR循环测序法能够简单、快速地检测特定序列,因此, PCR循环测序法在核酸序列分析研究中受到广泛的重视. 试验试剂: DNA测序试剂盒 dNTP ddNTP 丙烯酰胺双丙烯酰胺尿素 TEMED(N,N,N‘,N’-四甲基乙二胺) 过硫酸铵 6%测序胶:6%丙烯酰胺,7mmol/L 尿素,1×TBE. 10×测序缓冲液:100mmol/L Tris-HCl(pH8.8),500mmol/L KCl,40mmol/L MgCl2,0.01%明胶,20μmol/L dATP,50μmol/L dCTP,50μmol/L dGTP,50μmol/L dTTP 终止混合液:ddATP (600μmol/L),ddCTP (600μmol/L),ddGTP (100μmol/L),ddTTP(1000μmol/L) 终止缓冲液:95%甲酰胺,20mmol/L EDTA,0.05%溴酚蓝,0.05%二甲苯腈试验步骤 1、 4个小离心管,每个小管加入3μl的终止混合液,将管子放在冰上. 2、 在DNA模板中加入引物(4pmol), 4μl 10×测序缓冲液, 10μlα-32P-dATP, 2U TaqDNA聚合酶,加双蒸水到30μl彻底混匀,每管7μl加入上面4个小管中. 3、 反应液上加30μl的石蜡油. 4、 95OC 30S,50OC 30S,72OC 60S共30个循环,可根据具体的情况进行适当的调整循环条件及循环次数. 5、 反应结束后在油层下加入5μl的终止缓冲液并用加样枪混匀. 6、 上样前将样品在大于80OC的水浴中热变性5min,每一道加2μl加到测序胶上,电泳分离这些片段. 注意事项: 1、 制备测序模板:PCR 扩增的产物可以经过低熔点的琼脂糖凝胶电泳纯化回收后,用于序列分析;可经过柱层析纯化,去除PCR 反应后剩余的dNTP和引物后,用于序列分析.PCR 产物也可不经纯化直接用于测序,但是这种测序产生的结果较差,建议测序之前应进行PCR产物的纯化.各种标准的质粒制备方法所纯化出的质粒均可作为测序模板使用.用标准方法制备的M13噬菌体、粘粒、λDNA都适合用作测序模板用.但要注意的是反应体系中不应有与引物互补的非目的基因序列,否则将会导致测序实验的失败. 2、 测序引物:测序引物是指合成的与测序模板链特异性互补的寡核苷酸序列.可用α-32P-dATP和T4多聚核苷酸激酶对引物的5‘端进行标记,反应体系中引物、激酶和α-32P-dATP要保持在最佳的比例,以得到高比活性的标记引物;也可用α-32P-dATP标记新合成的DNA链.引物的浓度不宜高,否则容易形成引物二聚体,或产生非特异性的扩增引物. 3、 酶:各种缺乏3‘—5‘端外切活性的耐热DNA聚合酶都可以用于循环测序,其中TaqDNA聚合酶在DNA测序中最为常用.虽然应用PCR循环测序法能够简单、快速的进行基因序列的测定,但仍未能适应大规模DNA序列测定的需要,而PCR循环测序法、荧光标记和自动测序仪的联合使用成为大规模基因组测序的主要技术.该技术是采用荧光标记引物或双脱氧核苷三磷酸,反应产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳后,经特定的DNA序列分析仪和分析系统处理待测的DNA序列.它的应用减轻了DNA序列测定的工作量,提高了测序的效率.

❷ 中小型综合医院检验科都需要哪些设备回答全面一点,谢谢!

血细胞分析仪、尿沉渣、生化分析仪、血凝仪、离心机、水浴箱、显微镜、孵箱、生物安全柜、纯水机、冰箱、电脑、打印机、化学发光、洗板机等等

检验科设备有很多,一般包括血液细胞分析仪XFA6100、血气电解质分析仪、血气分析仪、酶标仪、洗板机、生化分析仪、血凝仪、特定蛋白分析仪PA8800等等,在检验科设备行业,国内外有很多不错的医疗器械生产厂家。

另外,放射科设备我知道的有数字化X光机、数字DR、胃肠机、乳腺钼靶机、C型臂X光机PLX7200、医用拍片机,这些设备当中又分很多型号和功能,这具体还是要自己跟厂家进行了解~~

以上仅供参考~具体还是要自己去了解~~

首先参考这个网页 http://..com/question/237878917.html 明白二级医院里有哪些必备的设备。 看看哪些是和检验科、放射科、病理科有关的。
其次,国家再没有关于你提问的这三个科室的非常详细、明确的硬件要求了。
第三 关于检验科 你可以看看这个文件 卫生部关于印发《医疗机构临床检验项目目录》的通知 其中列出了1000项左右的检测项目。看看你们医院需要开展哪些项目,再考虑配置相应的硬件。 关于各个项目的检验方法 你可以参考全国临床检验操作规程 第三版

放射科 关键看你做什么项目((一)放射治疗;(二)核医学;(三)介入放射学;(四)X射线影像诊断。)一般分为上述4种,具体含义可参考《放射诊疗管理规定》,二级医院一般只限于三和四 (三)开展介入放射学工作的,具有带影像增强器的医用诊断X射线机、数字减影装置等设备;(四)开展X射线影像诊断工作的,有医用诊断X射线机或CT机等设备。 关于其他一些设备(比较昂贵的)如果感兴趣可以了解一下
甲类 需要卫生部批准
1、X线---正电子发射计算机断层扫描仪(PET--CT,包括正电子发射型断层仪即PET)
2、伽玛射线立体定位治疗系统(γ刀)
3、医用电子回旋加速治疗系统 (MM50)
4、质子治疗系统
5、其它未列入管理品目、区域内首次配置的单价在500万元以上的医用设备
乙类(省级卫生行政部门管理)
1、X线电子计算机断层扫描装置(CT)
2、医用磁共振成像设备(MRI)
3、800毫安以上数字减影血管造影X线机(DSA)
4、单光子发射型电子计算机断层扫描仪(SPECT)
5、医用电子直线加速器(LA)

关于病理科
二级综合医院病理科至少应当设置标本检查室、常规技术室、病理诊断室、细胞学制片室和病理档案室;参考(病理科建设与管理指南(试行))

申明:我不是临床工作人员,相信临床工作人员也不会知道这么广的东东 尤其一下子来了三个科室 你如果一个科室一个科室问 临床人员还可以回答你 你问这么多 别人恐怕就不大知道了 我是卫生监督人员 一个饱受社会 尤其是卫生系统内部人士瞧不起的单位。希望我的回答可以 打消一点点大家的这种观念。
希望我的回答能够帮到你

❸ 细胞实验室是否需要纯水,超纯水,设计时要不要把纯水

细胞实验室肯定会用到纯水、超纯水的;不过细胞实验室用水量不会太大,可以选用小型实内验室纯水系统容,现用现制;例如赛多利斯arium® mini 实验室纯水系统是针对实验室用水量低于10L而设计,用于制备非关键应用所需的缓冲液和培养基。

❹ 微生物配置培养基用什么水

1,配方制定,确定配置体积,计算要配制体积下的各组分需称量的质量。
2,称量。
3,溶解。
4,定容,用蒸馏水补加,将配制的溶液体积达到规定体积。
5,分装。
6,消毒。
7,使用。
注,固体培养基的情况略有不同,分装有区别。

❺ 水思源纯水设备的应用范围有哪些咨询下智慧的百度人儿们

水思源产品涵盖:
医院:纯水处理运用于实验室、检验分析、血液净化、消毒供应中心、内镜洗消中心、ICU等科室领域;
污水处理运用于实验室、口腔科、检验科、手术室、ICU、消化内镜中心、病理科等科室领域;
医药、化工、冶金生产用污水、纯水、超纯水设备;
学校/医院、小区直饮水工程;
高校、科研、各级检测机构及工矿企业实验用超纯水设备;
食品行业用瓶装、桶装、各种饮料、酒类制水设备;
各类行业水处理设备设计、安装/改造、维修保养、培训指导等技术服务; 还有不清楚的可以自己网络。

❻ 医院里的水是开水还是纯水

有的医院是直饮水。直饮水(direct drinking water),又称为健康活水,指的是没有污染、没有退化,符合内人体生理需要(容含有人体相近的有益矿质元素),pH值呈弱碱性这三个条件的可直接饮用的水。
有的医院用的是自来水加热成开水的。

❼ 医院集中供水系统的供水系统理论

投建医院中央集中制水、分质供水系统不仅可以提升医院现代化管理水平,更重要的是它能产生更大的效益。中央集中制水、分质供水系统以其水质可控性好、总投资费用少、运行成本低、机房可选性大、总占地面积小等优点可快速替代各科室独立水机供水系统。
在医院现代化建设过程中,医院纯水工程尽管投资额比重不大,但涉及科室较广。随着医院用水质量规范逐渐完善,已越来越受到各级医疗卫生机构领导的重视。美国、日本等经济较为发达的国家,早在20世纪70年代就已相继建立并实施了较为健全的医院纯水使用管理制度及不同科目的纯水标准。随后,有越来越多的医院建立起了中央集中制水、分质供水系统。所谓中央集中制水、分质供水,就是用一套水机对自来水进行深度处理,使其达到各科室可直接使用的水质标准,再分别用管网供给各科室使用。我国自20世纪末引进并实施了中央集中制水、分质供水的理念和方案。近年来,中央集中制水、分质供水系统,因其独特的优势正在快速替代原有的独立供水设备。
一所综合性医院,至少需要生化检验用水、病理科用水、血透用水、中心供应室用水、手术冲洗用水、DSI导管冲洗用水、牙科冲洗用水、产科洗婴水、制剂室用水等高质量的纯水。在我国医院现行的设施中,在20世纪90年代初以前投资建设的综合大楼内,基本上还是沿用各科室独立水机供应纯水。在近几年新建、改建的综合性医院中,为最大限度地利用资源,进一步提高医院现代化管理程度,相继采用了中央集中制备纯水、分质供水系统模式.
中央纯水系统是由预处理系统、反渗透纯水系统、EDI深度除盐系统、后处理系统、循环供水系统组成的多功能全自动装置。使用安全、方便,运行费用低廉,产水水质稳定的全自动成套设备。该设备主要用于血透室、生化室、口腔科、供应室中心实验室、制剂室、手术室等集中供水。

❽ 细胞实验室是否需要纯水、超纯水,设计时要不要把纯水系统设计进去

你做细胞实验基本是离不开纯水和超纯水的,不论你是做动植物实验、细胞免疫化学、PCR实验、蛋白质纯化以及电泳/凝胶分析,都是要用到超纯水的。建议你设计时最好把超纯水系统也设计进去,以后你的几个实验室直接用设计好的超纯水系统的管道取水即可。你可以联系南京权坤。

❾ 什么是医用纯水

事实上医来用纯水与源饮用纯水最大区别在于水质标准不同,虽然都是与人体直接接触,但是医用纯水的标准相对来说更高一些。医用纯水是通过医院水处理设备制取得来,原水经过双级反渗透工艺去除有毒有害的各类杂质的同时也将水中的矿物质全部去除,只保留水分子,而饮用纯水则保留了对人体有益的各种矿物质,满足人们从饮水中对微量元素的需求。
在医疗机构,例如医疗设备清洗消毒,血液透析以及病理检验,临床医疗都需要大量的纯水,如果水中有残留例子,则很有可能影响诊疗效果,检验分析结果偏差等等,所以医用纯水的水质标准非常高至少要≥15MΩ.CM。
医用纯水与饮用纯水在制取工艺原理上大致相同,只是不同于水质标准,医院用水相对来说更加严格。

❿ 实验室纯水分为几级吗

实验室纯水分四个等级:

1、蒸馏水:

实验室最常用的一种纯水,虽设备便宜,但极其耗内能和费水且速度慢容,应用会逐渐减少。蒸馏水能去除自来水内大部分的污染物。

2、去离子水:

应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子,但水中仍然存在可溶性的有机物,可以污染离子交换柱从而降低其功效,去离子水存放后也容易引起细菌的繁殖。

3、反渗水:

反渗水克服了蒸馏水和去离子水的许多缺点,利用反渗透技术可以有效的去除水中的溶解盐、胶体,细菌、病毒、细菌内毒素和大部分有机物等杂质。

4、超纯水:

超纯水在TOC、细菌、内毒素等指标方面并不相同,要根据实验的要求来确定,如细胞培养则对细菌和内毒素有要求,而HPLC则要求TOC低。

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