A. sds电泳上样缓冲液如何配置
5×SDS-PAGE Loading Buffer的配来制（10 ml）
（自本方案摘自《蛋白质技术手册》汪家政、范明）
组分：Tris-HCl pH6.8（60 mM）；SDS （2%）；溴酚兰（0.1%）；甘油（25%）；β-巯基乙醇（14.4 mM）
配制过程：
1. 量取1M Tris-HCl （pH6.8） 0.6 ml；50%的甘油5 ml；10%的SDS溶液2 ml；1%的溴酚兰1 ml；
2. 加入去离子水定容至10 ml；
3. 分装；
4. 在4℃可保存数周，-20℃可保存数月之久。
你还可以参考下面这个配方：
2×SDS凝胶加样缓冲液 组分（摘自《分子克隆》第三版）
Tris-HCl pH6.8（100 mM）；SDS （4%）；溴酚兰（0.2%）；甘油（20%）；β-巯基乙醇或二硫苏糖醇（200 mM）
不含硫代试剂的加样Buffer可在室温保存。β-巯基乙醇或二硫苏糖醇临用前加入。
B. 电泳液中加入SDS的作用是什么
如果你是做测来量蛋白源质相对分子质量大小的话：
聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高分辨率，用它分离、检测蛋白质混合样品，主要是根据各蛋白质组分电泳迁移率的不同。这种差异就蛋白质分子本身而言，主要与其所带电荷的差异以及分子大小不同有关。如果将电荷差异这一因素去除或减小到可以忽略不计的程度，分子在凝胶上迁移率的大小则完全取决于相对分子质量的大小。
十二烷基硫酸钠（SDS）是一种阴离子表面活性剂，当其与蛋白质混合，质量比达到1.4:1时，SDS能破坏蛋白质分子间以及其他物质分子间的非共价键使蛋白质的构象发生变化继而使蛋白质变性解离成单一亚基，从而降低或消除了各种蛋白质分子间的天然电荷差异，形成SDS-蛋白质负离子，这样就使电泳迁移率只取决于分子大小这一因素。据经验得知，当蛋白质的相对分子质量在17000-165000之间时，蛋白质-SDS复合物的电泳迁移率与蛋白质相对分子质量的对数呈线性关系，于是根据标准蛋白质相对分子质量的对数和迁移率所作的标准曲线，可求得未知蛋白质的相对分子质量。
C. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的实验中，当分离胶加完之后为什么需要在上面加一层水
加一层来水称为水封
目的是隔绝自空气使催化反应快速进行，进而形成凝胶，还可使分离胶上沿平直。
并且加水后，保持分离胶表面的平整性，使浓缩胶和分离胶都处于同一水平面上。
甘氨酸是为了解离出甘氨酸根离子，甘氨酸根离子可以稳定的界面，使蛋白聚集在移动界面附近，浓缩在一起。
样品液煮沸这个问题我个人认为是可以商榷的，因为理论上煮沸可以使SDS和蛋白更快更好的结合，以便于SDS-PAGE的进行。但是有些蛋白似乎不煮沸直接上样结果更好。对于非还原Loading buffer（即不含巯基乙醇）的样品，一般是不要煮沸的。
长时间的电泳会使正极变酸，负极变碱。
D. sdspage电泳缓冲液配方，SDS-PAGE电泳的电极缓冲液可以反复使用吗
反复使用次数抄多了会导致你的电泳速度变慢，电泳时看起来泡泡就是很脏的那种。最后跑出来的胶也不好看。
缓冲液换的时间不太确定，因为情况不一样换的时间也不一样，有的实验室跑电泳比较频繁，就不存在这样的问题。平时肉眼看看，如果感觉比较浑浊了再换，但是如果要切胶纯化呀或者要求高一点那么最好用新的缓冲液；缓冲液肯定影响跑出来的条带了。如做胶回收，跑RNA都要用新的缓冲液，
E. SDS-PAGE电泳缓冲液的上槽液与下槽液有何区别
在跑胶之前没抄区别袭，我们大概是配1X buffer 500mL，上面灌满，然后都倒下面就是了。
跑之后，上槽中有些点样时没点进去的东西，下槽液中会含有一些跑出去的东西（跑得时间越长东西越多），所以就不太一样了。所以要是回收的话，上下槽要分别回收，不能混合。理论上说，都是可以重复用的。上槽的也可以倒到下槽去用，但是下槽的不可以当上槽的用。
其实我个人每次做都是用fresh的，用完就倒了。抗体挺贵的，万一跑不出来损失比buffer大多了。图个安心。
F. 配制sds-page 脱色液用什么水
配制sds-page 脱色液:
250ml 95％乙醇＋80ml冰醋酸，定容到1000ml，即可．
或者
100ml 95％乙醇＋50ml冰醋酸，定容到1000ml，即可．
G. 跑SDS-PAGE的电泳缓冲液需要什么水来配制
1.配制电泳试剂用水蒸馏水就可以了就是单蒸水,如果条件允许的话,可以只用更好的当然纯水是最好了;
2.一般实验室都会有蒸馏水,双蒸水,其实双蒸水就能满足大多数实验室的要求,纯水才是所谓的去离子水
H. sds电泳上样缓冲液如何配置
5×SDS-PAGE Loading Buffer的配制（10 ml）
（本方案摘自《蛋白质技术手册》汪家政、范明）
组分：Tris-HCl pH6.8（60 mM）；SDS （2%）；溴酚兰（0.1%）；甘油（25%）；β-巯基乙醇（14.4 mM）
配制过程：
1. 量取1M Tris-HCl （pH6.8） 0.6 ml；50%的甘油5 ml；10%的SDS溶液2 ml；1%的溴酚兰1 ml；
2. 加入去离子水定容至10 ml；
3. 分装；
4. 在4℃可保存数周，-20℃可保存数月之久。
你还可以参考下面这个配方：
2×SDS凝胶加样缓冲液 组分（摘自《分子克隆》第三版）
Tris-HCl pH6.8（100 mM）；SDS （4%）；溴酚兰（0.2%）；甘油（20%）；β-巯基乙醇或二硫苏糖醇（200 mM）
不含硫代试剂的加样Buffer可在室温保存。β-巯基乙醇或二硫苏糖醇临用前加入。
I. SDS-PAGE电泳缓冲液的上槽液与下槽液有何区别
在跑胶之前没区别，我们大概是配1x
buffer
500ml，上面灌满，然后都倒下面就是了。专
跑之后，上槽中有些点样时没点属进去的东西，下槽液中会含有一些跑出去的东西（跑得时间越长东西越多），所以就不太一样了。所以要是回收的话，上下槽要分别回收，不能混合。理论上说，都是可以重复用的。上槽的也可以倒到下槽去用，但是下槽的不可以当上槽的用。
其实我个人每次做都是用fresh的，用完就倒了。抗体挺贵的，万一跑不出来损失比buffer大多了。图个安心。