㈠ 凝胶过滤层析如何实现样品浓缩、脱盐、更换缓冲液谢谢各位啊!
你的问题很不明确,用sephadexLH-20纯化除了有一部分凝胶过滤外,还有一些分配色谱的作回用,所以这个介质答和sephadax G15 是不太一样的,你纯化出多少峰都应该进行抑菌实验,否则很难知道你要的组分在哪里.既然这个分子量这么小,那你上sephadex G200,估计你的目标多肽在最后面,所以你得到的那个峰不一定有你要的东西,而在后面,我是这样猜测的,关键你要测定活性,所以你再纯化也没有活性,问题在于你没有时时做活性检测,填料选择不很正确,检测波长我不清楚对不对,关键你要选择合适的柱子,同时每一步都做活性检测.
我确实是对每个峰都作了抑菌实验,Sephadex G15的每个峰都有抑菌活性.粗提物上G200只得到了一个吸收峰,要是我要的组分在后面,可它连个小峰都没有呀.。此外,有人建议我,先使用硅胶柱对粗提物进行处理,请问可供选择的柱子有哪些?谢谢。
那你没有说明G200的峰是不是有活性,你也可以考虑硅胶填料,那得选择c8或者c4的反相硅胶的柱子,可以做HPLC,这样也是不错的选择,毕竟通常的凝胶柱子很难有很好的分离效果。