❶ 无菌检查薄膜过滤器需要用0.22um滤膜吗
1、灭菌方法
培养基的灭菌方法主要有两种,高压除菌及0.22um微孔滤膜过滤除菌。与过滤相比,高压灭菌的工作强度小,成本较低,但易造成营养成分的流失,而且在多次加样(无菌谷氨酰胺溶液,无菌碳酸氢钠溶液等)过程中容易造成二次污染。大多数培养基采用0.1~0.2μm孔径的微孔滤膜进行过滤灭菌,并且已成为培养基除菌的发展方向,它可低限度地减少培养基的营养损失。
1.1 高压灭菌
某些培养基(如MEM)可进行高压灭菌,例如清大天一的MEM培养基中的MD605、MD609等。这类培养基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠,一般是在培养基高压灭菌后加入L-谷氨酰胺和碳酸氢钠的无菌的液体。另外可高压的谷氨酸盐(如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)可代替L-谷氨酰胺。
可高压灭菌的培养基在121℃、15psi,15分钟的条件下完全可达到灭菌效果及营养成分的最小损失,不需将灭菌时间延长。为保证高压灭菌的效果,灭菌设备的验证很关键。
1.2 过滤灭菌
可供过滤灭菌使用的滤膜很多,其材料多为polyethersulphone(PES)、尼龙、多聚碳酸盐、醋酸纤维素、硝酸纤维素、PTFE、陶瓷等。一般情况下采取正压过滤,正压过滤较之负压过滤具有流速高、过滤快、不易污染,可避免蛋白质产生大量气泡等优点。一般使用过滤器可参照各供应商的产品说明书。
目前大多数实验室和制采用微孔滤膜滤器(如Zeiss滤器)或立式微孔滤器(Millipore、Pall)除菌。微孔滤膜滤器为不锈钢,中间可夹放0.22um滤膜。使用这种滤器最重要步骤是安装滤膜及无菌过滤过程。如在使用Zeiss滤器时,先要用培养用水将滤膜充分润湿,在安装滤膜时可在其上放置一层定性滤纸再固定。消毒时旋钮不要扭太紧,凡与空气接触部位都要包好(可用牛皮纸、纱布、无纺布等);高压灭菌后,在无菌环境中立即将旋钮扭紧。过滤除菌结束后,要打开滤器,检查滤膜是否完整,如果滤膜破裂,需重新进行过滤除菌过程。立式微孔滤器可以选用不同的微孔滤柱体积,因为滤膜的折叠,膜面积显著增大,液体处理量大,而且不容易发生堵塞现象。
❷ 什么是PVDF超滤膜主要应用于哪些方面
过滤水用的,很简单的一种现象能把墨水过滤成非常清澈的水,可以拿来吃。
❸ 超滤离心管怎么使用
蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头(200ul)取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取,否则难度太大,有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中,没过超滤膜,防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml
离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。
❹ 净水器超滤机里没有超滤膜是不是被忽悠了
你好,净水器超滤机里面没有超滤膜,这个你可以打开你的说明书,看里面是否有这一款介绍,如果没有的话,可以询问客服
❺ 超滤离心管怎么使用
蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头(200ul)取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取,否则难度太大,有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中,没过超滤膜,防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml
离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。
❻ millipore的切向流过滤系统怎么样
切向流是指液体流动方向与过滤方向呈垂直方向的过滤形式,切向流过滤时,版待过权滤的液体的流动方向和过滤膜平面的方向平行,液体就会垂直于膜表面穿过膜孔。 超滤时,过滤较大规模的料液就需要采用切向流过滤方式,它会产生湍流(二次流),由于有了湍流,液体流动在过滤介质表面(即超滤膜表面)产生剪切力,减小了滤饼层或凝胶层在膜表面的堆积,使沉淀从膜表面剥离,降低膜污染,保证稳定的过滤速度。
❼ 离心超滤管 millipore 滤膜上好像有孔,离心后发现有大分子蛋白过来,怎么回事该怎么办
离心超滤管是一次性的,原则上不能反复用的,所以滤膜上有孔就要更换了
❽ millipore超滤膜包怎么样
进口品牌,还是可以的,看你怎么用了。
❾ 美的超滤净水器说明书
一、美的超滤净水器MU104-5 - 产品说明:
产品特点:
A、滤芯功能:
第一级:PP棉:对原水进行初过滤,去除水中较粗颗粒杂质、污泥、胶体、悬浮物质等。
第二级:颗粒活性炭:吸附水中异味、异色、余氯、有机物、部分重金属等
第三级:PP棉:深度净化、进一步去除杂质,保护超滤膜
第四级:后置活性炭:改善口感后。
第五级:超滤膜:去除水中的细菌、铁锈、胶体及有机物等杂质。
B、产品功能:
1:产水符合国家标准:通过净水器的水符合《生活饮用水水质处理器卫生安全与功能评价规范--一般水质处理器》(2001)要求。
和管线机(水龙头)配合使用,主要用于直饮、美容、煮饭等,满足直接饮用的需要。
泡茶—纯正 口味甘醇 香浓可口
煲汤—鲜美 原滋原味 营养健康
养护—美丽 洁净肌肤 容光焕发
做饭—更香 洁白清香 甜润可口
外观精制,美观大方,新潮时尚。
1、食品级材料,安全可靠,绿色环保。
2、韩国新一代滤芯,过滤精度高、使用寿命长,其水锤、耐压等测试均通过 NSF 测试标准
3、美国进口M6活性炭,高效吸附能力(碘吸附值达1100mg/g)超过国家一级活性炭标准(1000mg/g) 能有效吸附水中余氯、重金属
、有机物等,去除水中异味和异色:活性碳的微孔能吸附并去除水中由于腐殖质引起的异色、异味,达到改善水质的目的
4、韩国进口超滤膜 通量大 去除率高 膜丝强度高抗污染性强 ,国家卫生级材料,去除病菌及悬浮微粒,保留有益于人体的矿物质
5、纯物理法处理,无二次污染
6、韩国快接管路技术,安装、使用、维护方便。
7、产水可直接饮用
二、美的超滤净水器MU104-5 - 参数说明:
产品系列:超滤专家
·净水出水量:120L/h(0.3MPa)
·外形尺寸:396×120×384