㈠ 超滤离心管离心蛋白时离心干了怎么办
不建议用离心管离蛋白。最好还是膜处理比较好。
蛋白会粘附在渣里，只有用缓冲液再润洗咯。
㈡ 超滤膜的清洗保存
超滤膜清洗的方法主要有两点要注意：一是必须事先弄清楚污染物的组成及污染性质。二是如能用清水冲洗，应尽量用清水冲洗。只有当清水冲洗达不到理想效果时，才考虑用化学清洗方法。为此超滤膜的清洗，又可分为物理清洗法和化学清洗法两种。
1、物理清洗法：在这方面用的最多最普遍的就是水力冲洗法。它又可因水力冲洗方向的不同，分为逆向冲洗、反冲洗和正洗冲洗。
(1)逆向冲洗：用原水冲洗膜内和进水端面的杂质。
(2)反冲洗：用超滤水从膜块表面的污染物冲松散、剥落，分别从进水口和浓缩口排出(可加酸、碱或次氯酸钠等药品加强清洗效果)。
(3)正洗冲洗：用原水冲洗膜内和端面的杂质，按运行状态将超滤膜清洗干净。
2、化学清洗法：
根据膜表面污染物质的种类，选择适当的化学药品与之进行溶解、氧化或其他化学反应达到去除的目的。常用的化学药品的选择必须根据膜材料的性质选择，如酸类、碱类、氧化剂、杀菌剂、表面活性剂以及加酶洗涤剂等。进行方法与正常超滤过程相同，清洗液自原液入口处进入，浓缩液及超滤液全部返回清洗液容器，循环后排放，以净水洗净即可。
超滤膜的保存
1、短期保存：超滤膜如暂停使用时(少于10天时间)应对超滤膜杀菌反冲洗一次，在反冲洗水中加入杀菌剂后再将超滤膜的进水阀、排放阀和调节阀关闭，保持超滤膜的密封和灭菌作用。
2、长期保存：超滤膜如长期停止使用时(超过10天)，先对超滤膜进行杀菌反冲洗一次，然后在超滤膜内注入保护液后密封保存。
㈢ 超滤管3kd是3kd的都下去吗
3KD指的是截留分子量
截留分子量（MWCO:molecular weight cutoff）是使用分子量大小表示的超滤膜的截留性能，又称作专切割分子量。
由于属直接测定超滤膜的孔径相当困难，所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时，就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能，称为膜的截留分子量。实际上，所使用的物质并非绝对的球形，由于试验条件的限制，所测定的截留率也有一定的误差，所以截留分子量不能绝对表示膜的分离性能。也就是说3KD分子量的产品有可能透过膜也有可能被膜拦截，一般来说希望3KD的产品全部透过，需要选择截留分子量更大的膜，比如5KD
㈣ 超滤离心管怎么使用
蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml
离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。
㈤ 求助：第一次使用超滤离心管应该怎么处理
可能不同厂家的产品保存运输条件不一样。
如果有甘油等保护剂，那就一定要洗干净再加样品。版权
干的超滤管也要先润湿再用，否则可能不能完全利用膜面积。
最好，用样品buffer润洗下再加样，最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好，使膜充分浸润。
降低吸附的办法有：
1，蛋白浓度不要过低
2，尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3，用前可以用Tween 80等去垢剂润洗（不影响蛋白活性的前提下）
4，加入保护蛋白，如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止长菌，依不同样品可以重复使用不同的次数。
㈥ 大家用过的超滤管怎么保存
超滤膜组件的维护（四川禹华环保）要点：
一、短期停机的情况下：停机2-3天以内，请内在膜组件内部充水容的状态下停机；如果达一周左右时，请注入浓度为50mg/L的次氯酸钠溶液；
二、 长期停机的情况下：膜组件要先经过次氯酸钠药洗后，再注入浓度为1.5%的亚硫酸氢钠溶液。
三、置于阴凉处，不能脱水存放；低于零度时要加甘油防冻；
㈦ 超滤浓缩离心管使用前要怎么处理
可能不来同厂家的产品保存运输条源件不一样。
如果有甘油等保护剂，那就一定要洗干净再加样品。
干的超滤管也要先润湿再用，否则可能不能完全利用膜面积。
最好，用样品buffer润洗下再加样，最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好，使膜充分浸润。
降低吸附的办法有：
1，蛋白浓度不要过低
2，尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3，用前可以用Tween 80等去垢剂润洗（不影响蛋白活性的前提下）
4，加入保护蛋白，如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止长菌，依不同样品可以重复使用不同的次数。
㈧ 反渗透膜要停用一段时间，怎么保护就这么放着好吗需要注意些什么，才能保证膜的寿命不受影响。
反渗透膜停用保护措施
膜元件短期保存应如何保护
因芳香族聚酰胺反渗透膜与含有残余氯的水接触将给膜元件造成无法修复的损伤，所以在对反渗透设备及管路进行杀菌、化学清洗或封入保护液时应保证配制药液的水中不含任何残余氯。如果有残余氯存在，要使用亚硫酸氢钠还原残余氯，并保持足够的接触时间以保证还原完全。
短期保存方法适用于ro膜停止运行5～30天的反渗透系统。此时反渗透膜元件仍安装在 RO 系统的压力容器内。保存操作的具体步骤如下
① 用给水冲洗反渗透系统， 同时注意将气体从系统中完全排除。
② 将压力容器及相关管路充满水后，关闭相关阀门，防止气体进入系统。
③ 每隔5天按上述方法冲洗一次。
膜元件长期停用保护措施
如果反渗透膜停用30天以上，膜元件仍安装在压力容器中的反渗透系统。
应该进行如下保护：
① 清洗反渗透系统中的膜元件。
② 用反渗透产出水配制杀菌液，并用杀菌液冲洗反渗透系统。杀菌剂的选用及杀菌液的配制方法可参见膜公司相应技术文件或与膜公司当地代表处联系以获取有关技术建议。
③ 用杀菌剂充满反渗透系统后，关闭相关阀门使杀菌液保留于系统中，此时应确认系统完全充满。
④ 如果系统温度低于27℃，应每隔30天用新的杀菌液进行第②、③步的操作；如果系统温度高于27℃，则应每隔15天更换一次保护液 （杀菌液）。
⑤ 在反渗透系统重新投入使用前，用低压给水冲洗系统1h，然后再用高压给水冲洗系统 5～10min，无论低压冲洗还是高压冲洗时，系统的产水排放阀均应全部打开。在恢复系统至正常操作前，应检查并确认产品水中不含有任何杀菌剂。
㈨ 蛋白在超滤管浓缩过程中出现沉淀怎么办
1、选择合抄适的超滤管，主要考虑袭MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。
通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。
注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开
离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理，后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。