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阴离子交换树脂洗脱氨基酸顺序

发布时间:2020-12-19 14:31:18

『壹』 离子交换树脂的洗脱顺序和什么有关

和树脂的亲和力有关,主要是静电吸引,其次是疏水作用。

树脂的交联度,即树脂基体版聚合时所用二权乙烯苯的百分数,对树脂的性质有很大影响。通常,交联度高的树脂聚合得比较紧密,坚牢而耐用,密度较高,内部空隙较少,对离子的选择性较强。

而交联度低的树脂孔隙较大,脱色能力较强,反应速度较快,但在工作时的膨胀性较大,机械强度稍低,比较脆而易碎。



(1)阴离子交换树脂洗脱氨基酸顺序扩展阅读:

大孔树脂内部的孔隙又多又大,表面积很大,活性中心多,离子扩散速度快,离子交换速度也快很多,约比凝胶型树脂快约十倍。使用时的作用快、效率高,所需处理时间缩短。

大孔树脂还有多种优点耐溶胀,不易碎裂,耐氧化,耐磨损,耐热及耐温度变化,以及对有机大分子物质较易吸附和交换,因而抗污染力强,并较容易再生。

交联度高的树脂对离子的选择性较强,大孔结构树脂的选择性小于凝胶型树脂。这种选择性在稀溶液中较大,在浓溶液中较小。

『贰』 在强酸型阳离子交换柱上天冬氨酸,组氨酸,亮氨酸等几种氨基酸的洗脱顺序及原因。

洗脱顺序先后依次是:天冬氨酸、亮氨酸、组氨酸。
原因:氨基酸与阳离子交换树回脂的静电引力大小答依次是 碱性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸,所以洗脱的顺序就先是酸性氨基酸,然后是中性氨基酸,最后是碱性氨基酸。
天冬氨酸属于酸性氨基酸,组氨酸属于碱性氨基酸,亮氨酸属于中性氨基酸。
详见《生物化学》王镜岩 第三版 上册 153页

『叁』 急求:离子交换柱层析分离氨基酸的讲义

一、目的

学习用阳离子交换树脂柱分离氦基酸的操作方法和基本原理。

二、原理

各种氨基酸分子的结构不同,在同一PH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效果。

三、器材

1、20cmX 1cm层析管 2、试管

3、吸管. 4、恒压洗脱瓶

5、部分收集器 6、搪磁杯

7、电炉 8、分光光度计

四、试剂和材料

1、.苯乙烯磺酸钠型树脂(强酸 lx 8,l00一200目,可用上海华东化工学院产品)

2 、2 mol/L盐酸溶液

3、2mol/L氢氧化钠溶液

4、标准氨基酸溶液 天冬氨酸、赖氨酸和组氨酸均配制成 2 mg/mL的0.1M盐酸溶液。

5、混合氢基酸溶液将上述天冬氨酸、赖氨酸和组氨酸溶液按1:2.5:10的比例混合。

6、柠檬酸-氢氧化钠一盐酸冲液(pH5.8),钠离子浓度0 .45M)

取柠檬酸(C6O7H8.H20 )14.25g、氢氧化钠9.30g和 浓盐酸 5.25 mL溶于少量水后,定容至 500 mL,冰箱保存。

7、显色剂 2 g水合茚三酮溶于 75mL乙二醇单甲醚中.加水至 100 mL。

8、50%乙醇水溶液

五、操作

1、层析柱的准备:将强酸型阳离子交换树脂用氢氧化钠处理成Na+型后洗至中性(处理方法见第三篇实验十二).搅拌一小时后装成一个直径1cm.高 16~18 cm的层析柱。

2、氨基酸的洗脱:用P H5.8的柠檬酸缓冲液流洗平衡交换住(装置如图)。调节流速为 0.5 mL/min,流出液达床体积的4倍时即可上样。由柱上端仔细加人氨基酸混合液0.25—0.5 mL,同时开始收集流出液。当样品液弯月面靠近树脂顶端时,即刻加入0.5 mL拧檬酸缓冲液冲洗加样品处。待缓冲液弯月面靠近树脂顶端时。再加入0.5 mL缓冲液。如此重复两次,然后用滴管小心注入柠檬酸缓冲液(切勿搅动床面),并将柱与洗脱瓶和部分收集器相连。开始用试管收集洗脱液,每管收集lmL.共收集60一80管。

3、氨基酸的鉴定:向各管收集液中加lmL水合茚三酮显色剂并混匀,在沸水浴中淮确加热15分钟后冷却至室温.再加15 mL的50%乙醇液。放置10分钟。以收集液第2管为空白,测定A570nm波长的光吸收值。以光吸收值为纵坐标,以柱洗脱体积为横坐标绘制洗脱曲线。以已知3种氨基酸的纯溶液为样品,按上述方法和条件分别操作,将得到的洗脱曲线与混合氨基酸的洗脱曲线对照.可确定3个峰的大致位置及各蜂为何种氨基酸。

『肆』 请问用阳离子交换树脂提取氨基酸,用氨水洗脱后怎样去除其中的氨水

减压浓缩,体积太大,消耗能源成本过高!
洗脱液一般浓度很低。可以先用反渗透虑版去大部分氨水,权收集配制下次洗脱用氨水!
再用真空减压浓缩。氨水被蒸发掉(蒸馏水冷凝回收氨水)这样提高了氨基酸浓度的同时赶掉氨水!

『伍』 如何用离子交换树脂分离提纯牛磺酸,以除去杂质氨基酸

牛磺酸是氨基酸的来一种,分离自提纯主要利用各种氨基酸物质的等电点不同,通过调节料液的PH值,用离子交换树脂进行吸附分离纯化生产牛磺酸结晶体。一般是将PH调到4-5左右,用阳离子交换树脂即可吸附。制造纯度在98%以上牛磺酸结晶体。也有使用阳树脂(C107)和阴树脂(D354)串联使用。如有需要,我可提供树脂样品和试验方案给您。

『陆』 离子交换层析分离混合氨基酸实验能否用阴离子交换树脂

您好!离子交换层析分离混合氨基酸实验也能用阴离子交换树脂,但是一般都版是用强阳权性离子交换树脂在pH2-3之间进行分离。
因为大部分氨基酸等电点都偏酸,如果用强阴离子交换树脂的话,洗脱盐浓度较大,而且分离效果不如阳离子交换的好。

网络教育团队【海纳百川团】为您解答。
感谢您的采纳,O(∩_∩)O 如有疑问,欢迎追问。

『柒』 如何用阴离子交换树脂层析分离混合氨基酸

  1. 离子交换树脂是一种合成的高聚物,不溶于水,能吸水膨胀.高聚物分子由能电离的回极性答基团及非极性的树脂组成.极性基团上的离子能与溶液中的离子起交换作用,而非极性的树脂本身物性不变.通常离子交换树脂按所带的基团分为强酸(=R=S03H)、弱(=COOH)、强碱 (=N+=R:)和弱碱(=NH2=NHR=NR2).

  2. 离子交换树脂分离小分子物质如氨基酸、腺苷、腺苷酸等是比较理想的.但对生物大于物质如蛋白质是不适当的,因为它们不能扩散到树脂的链状结构中.故如分离生物大子、可选用以多糖聚合物如纤维素、葡聚糖为载体的离子交换剂.

  3. 本实验用磺酸阳离子交换树脂分离酸性氨基酸(天冬氨酸)、中性氨基酸(丙氨酸)碱性氨基酸(赖氨酸)的混合液.在特定的pH条件下,它们解离程度不同,通过改变脱液的pH或离子强度可分别洗脱分离.

『捌』 用强酸性阳离子交换树脂分离氨基酸混合物时,为什么要逐步提高洗脱液的pH和离子强度

用强酸性阳离子交换树脂分离氨基酸混合物时,氨基酸都是以阳离子的形式版,被吸附到树脂权的离子交换位上。
由于氨基酸是两性化合物,既有酸性,也有碱性,因此氨基酸都有等电点,pH低于等电点时,呈阳离子状态,pH高于等电点时,呈阴离子状态。氨基酸被强酸性离子交换树脂吸附后,都是以阳离子形式存在的,转变为阴离子就会被洗脱。通过逐渐提高洗脱液的pH,利用氨基酸不同的等电点,使不同的氨基酸逐渐从阳离子改变为阴离子,而被洗脱出来,从而达到分离效果。

『玖』 Lys Arg Asp Glu Tyr Ala的混合物在高pH条件下加到阴离子交换树脂上,用连续递减pH值缓冲溶液洗脱

洗脱先后顺来序:Arg Lys Tyr Ala Glu Asp
先分源组:1 Arg Lys是碱性氨基酸 PH=7 正电荷
2 Tyr ALa是中性氨基酸 PH=7 中性为主
3 Glu Asp是酸性氨基酸 PH=7 酸性
由于是交换树脂层析,氨基酸的与树脂的亲和力主要取决于他们之间的亲和力,其次是氨基酸与树脂之间的疏水相互作用。由于缓冲液先是碱性,所以氨基酸与树脂的亲和力为:酸性氨基酸》中性氨基酸>碱性氨基酸(阴离子树脂的疏水基团带正电,负电被交换了),洗脱的顺序就是:碱性 中性 酸性
考虑氨基酸与树脂的疏水作用:Arg的R基团是三个亚甲基+一个亚氨基,Lys是四个亚甲基,很明显,Arg的疏水作用要弱,与树脂吸引力不够强,最先被洗下来。其他的两组楼主自己分析R基团的疏水性

『拾』 离子交换树脂提取生物碱的原理是什么

通过离子交换树脂的聚合多孔性及官能团进行吸附,由于这一交换过程速度很快,离子交换树脂对生物碱的亲和性也很好,水处理填料树脂因此在这个过程中,有机物对离子交换树脂的污染很小。吸附饱和后,再用稀浓度的酸液进行分布洗脱,稀的酸液洗下的是正电荷很弱的杂质,它们可以与活性官能键结合,但是不稳定,然后再用较高浓度的酸液将吸附的生物碱洗脱,最后用高浓度的酸液洗脱与活性官能团结合很牢固的阳离子杂质。为了确保离子交换树脂的吸附容量,往往在使用到一定周期后,会采用NaOH溶液进行逆转型复苏。

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