A. 超螺旋DNA的Kb换算成KDa如何换算,求大神分解赐教。希望可以分解的精细一点,初入生物狗头脑一片空白
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B. 一蛋白质谱测定分子量10kDa,但是SDS-PAGE测的结果是21kDa,可能原因是什么
这种情况应该是形成二聚体或多聚体了。
C. 蛋白质分子量为10kDa,其直径大约有多大100kDa呢
10kDa
这个数字+单位所描述的是1mol这个蛋白质的分子质量是10kg,仅仅是对质量的一个表示,而直径的长短取决于其3D空间构像,仅仅知道质量的话,直径是无法计算的。计算的方法只有看它的3D结晶结构来测量或者找和这个蛋白质结构及其相似的有3D结晶的蛋白质来推断预测。
D. 15ml,10kd超滤管转速要多大
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。
通常应截版留分子量不应大于权目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。
注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开
离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
E. 10kda蛋白用多少浓度的page
8-10%的分离胶,电泳时注意下marker,别把17KDa跑出来就行,湿转100V90min妥妥的
F. 选择分离60KDa 的蛋白选择什么种类的超滤膜想让蛋白留在浓缩液里
那就是浓缩,如果要提高回收率用10K的超滤膜
G. 用超滤膜(3kDa)抽滤后,如何收集滤膜上的高分子物质
这个只能清洗了,就看你截留的是什么物质,用溶剂去洗,或者也可以借助离心机。