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超純水能稀釋引物嗎

發布時間:2021-01-02 11:17:18

① 用TE稀釋質粒與用超純水稀釋有什麼不一樣的

正如樓上所說,來TE溶液有利於源保證核酸物質的穩定性,但我猜測你想知道其中的道理。我做補充如下:1)T(tris)是弱鹼性,不容易導致核酸水解(DNA在酸性下更易自行水解);2)E(EDTA)可螯合DNA 水解酶的輔酶鎂離子,抑制DNase活性,阻止DNA被酶解。但由於TE(主要是E)對一些 精密實驗 比如酶切 甚至PCR 有負面影響(也作為酶的抑制劑),多使用很稀的TE 如0.1X 的TE作為buffer。
我們實驗室做法:若很短時間就用掉的DNA溶液 就用純水溶解直接做實驗, 此時DNA沒時間降解;若是長時間要保存的 就用10倍稀釋的TE保存成濃的DNA溶液,用前稀釋一下降低EDTA的影響。 供參考,祝順利!

② 合成的引物該怎麼處理,用超純水還是什麼稀釋

12000rpm離心1min後加入ddH2O,渦旋震盪1min後瞬時離心甩一下即可。加水量根據你需要的濃度確定。比如引物管上是4nmol,那麼加入400μl水,濃度就是100p

③ 如何稀釋新引物啊

用TE(或ddH2O)稀抄釋,按引物合成報襲告單上寫的先稀釋到100uM(一般有To dissolved into 100uM,add XX ul water...,不過注意一下是1OD的還是一管的,一般指1OD加這么多),作為貯存液。
然後再取出一部分,稀釋10倍到10uM,使用

④ 引物稀釋中水和TE的區別

稀釋引物要達到的濃度(pmol/ul)=母液濃度(pmol/ul)×汲取母液的體積(ul)÷(汲取母液的體積(ul)+加水量(ul))
引物一般來的時候是乾粉.這種狀態能保存最長的時間.
如果用的話要先離心,5分鍾(12000轉).然後用它上面寫的nmol*1000/你的終濃度=你要加的水量
溶解液有TE和dd水.TE其實就是tris鹽酸和EDTA的混合液.理論上用TE保存好,不容易降解.
一般配的時候要先配成儲存液(濃度是100umol/L),在配成使用液(濃度是10umol/L).這樣的好處是引物不容易降解.
引物忌諱反復凍溶,大家要注意.如果你都配成了使用液就應該分裝.使用液放在4度(2/3個月沒問題的),儲存液放在-20度.
引物稀釋很簡單,一般裝引物的管子上都標有引物的量如3.6nmol/OD,可直接往管中加360ul的無菌雙蒸水溶解就可以了,在加水之前要先高速離心管子幾分鍾,加水後要高速漩渦混勻幾分鍾就可以用了,此時的儲存濃度是10umol/L,如果體系是20ul一般加1ul引物(引物的使用濃度最大為10pmol/ul,但一般在0.5-5pmol/ul即可 ).
引物的濃度設定,不同的人有不同習慣,有的喜歡稀釋成100uM的,有的習慣於稀釋成20uM,也有的稀釋成10uM的.建議稀釋成20uM的濃度,因為如果你稀釋成100uM,當你所做PCR的體系不是很大的時候,體積太小了引物就不好加,容易產生誤差;如果是稀釋成10uM,引物濃度過低,容易降解.不過不管你稀釋成多大濃度的,最好分裝保存,免得反復凍融容易降解.

⑤ 請問引物是怎麼稀釋的

上面網友講的估抄計應該會出現襲在你合成的引物單上。 在實際操作時,你首先需要進行離心。離心前請不要打開蓋子。 離心後,在離心管底可見白色沉澱,這時你可根據合成單上的說明,加入適量的ddH2O或者Elution Buffer。合成單上標有Tm值,OD值以及引物長度等。通常,會有1OD=?ug的標記(由於引物長度不同,此處數值也對應不同),直接按??值加入等量ddH2O(如20ug對應加入20ul水)便可稀釋為1ug/ul 最後充分渦旋,使沉澱完全溶解。 -20度保存,使用時,應稀釋10倍。

⑥ 用TE稀釋質粒與用超純水稀釋有什麼不一樣的

和ddH2O相比,TE溶液有利於保證核酸物質的穩定性,便於長時間的保存。個人經驗:TE配置不合格的話會影響下游的一些操作,一般都是直接用ddH2O。

⑦ 引物用什麼稀釋

是做什麼的引物?如果是PCR的,因為cDNA是比較穩定的,直接用雙蒸水ddH2O稀釋就行啦

⑧ 稀釋引物用去離子水可以嗎

用一般的純化水就可以了,我們一般都用哇哈哈水,呵呵

⑨ 溶解引物需要什麼水

先離心!然後加入適量的水或TE溶解。一般配製成較高濃度的母液(約100μM),保存於-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配製成10μM或20μM的工作液。引物濃度不宜偏高,濃度過高有兩個弊端:一是容易形成引物二聚體(primer-dimer),二是當擴增微量靶序列並且起始材料又比較粗時,容易產生非特異性產物。一般說來,用低濃度引物不僅經濟,而且反應特異性也較好。一般終濃度用0.25-0.5pM/μl較好。
1 引物的分子量如何計算? 比如:AAGCTTTTACCGC的分子量是多少?
2 OD值,1個OD值是不是等於40UG。
3 質量數,質量數的含義是什麼,怎麼計算?
4摩爾數(μmol)和終濃度(pM)和稀釋水量(μl)
是不是計算稀釋引物都要用到以上四點的各個參數?具體的公式是什麼呢?
合成引物的單子上應該有演算法:
1OD=33ug
1個鹼基的分子量=324.5
(以上為近似值,通常都這樣用)
1條引物的分子量=鹼基數*324.5
質量數=OD*33ug
摩爾數=質量數/分子量
先離心的原因是什麼?
因為引物合成後是乾粉狀的,在運輸過程中可能會沾到管壁或管蓋上,直接打開有些粉末可能會飄出去,引物的量就減少了。先離心使粉末都到管底,可以避免這種現象的發生。
然後根據以下公式可計算出所加雙蒸水的量
33nmol/OD×管上所標OD值×100
是為10pmol/ul濃度的引物溶液,還可以由此推算其它濃度所需的雙蒸水量。
可於-20度保存。
訂引物回來的說明書背面一般都有引物稀釋計算的說明的.
注意分裝!

⑩ pcr用超純水

最好還是在冰上做啦,一次兩次沒有問題,久了多了可能問題就出來了
一般用的是滅菌的雙蒸水
保證引物的終濃度就可以.都是用水稀釋的,沒啥差別

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