純水沖c18柱子後

『壹』 離子色譜柱能用純水沖洗嗎，這樣是否會影響柱子的性能。

按看說明書或咨詢色譜柱廠商，防止損害色譜柱，離子柱都不便宜，小心為上。
用純水短時間內沖洗色譜柱，通常不會對色譜柱造成較大的損傷，但如果長時間用水沖洗色譜柱則
可能引起固定相流失和相塌陷現象，所以若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱，建議在水中加入一定
量的甲醇或乙腈進行沖洗，通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
原因分析：
首先，由於目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質，硅膠的溶解特點是在純水中的溶解度比在含有一
定濃度有機溶劑的流動相中要大得多，所以長時間的用純水沖洗會導致固定相的流失，引起柱效下降。
其次，對於常規的 C18 柱而言，由於C18 長鏈與水是不互溶的，C18 長鏈之間的相互作用力大於
C18 與水分子的作用力，長時間的用水沖洗，使得C18 長鏈之間相互靠近，水流的沖刷，導致相互聯結
的C18 長鏈倒伏在硅膠基質的表面，對疏水性物質的保留能力下降，即相塌陷。針對用純水沖洗容易出
現相塌陷的現象，有些廠家推出了純水柱（如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱），這種純水柱可以用純
水作流動相而不會產生相塌陷，這對只溶於純水的樣品的分析提供了一個很好的選擇。
第三，如使用過含緩沖鹽的流動相的色譜柱，用純水沖洗，並一定能將緩沖鹽完全洗去。因為，由
於緩沖鹽難溶於有機溶劑，C18 反相柱中用的填料是在硅膠表面上接上許許多多的C18 長鏈，相當於一
個疏水的有機相，而硅膠基體被有機物質包裹著，所以用純緩沖鹽水溶液做流動相時也許緩沖鹽不容易
到達硅膠基質，不至損害基體。但所用的流動相通常會含一部分有機溶劑，而且這些有機溶劑與C18
長鏈是互溶的，因此有機溶劑的加入增強了流動相滲入硅膠基質的能力，能使部分緩沖鹽達到硅膠基質。
同樣的道理，用純水沖洗只能洗掉表面的緩沖鹽，而滲入深處的緩沖鹽則仍然殘留在那裡。所以最好在
水中加入部分有機溶劑進行沖洗，一般的C18 柱通常用含水20％～90％都可以，含水的比例要視分析
時使用的流動相來定，原則上，用於沖洗的流動相中水的比例應該等於或高於（緩沖鹽用後清洗的情況，
推薦使用「等於」）分析時所用流動相中水的比例。

『貳』 請問HPLC是做什麼的原理操作方法

HPLC是高效液相色譜，英文全稱是High Performance Liquid Chromatography。該方法在化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中被用來做重要的分離分析技術。

用途：高效液相色譜更適宜於分離、分析高沸點、熱穩定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質，因而廣泛應用於核酸、肽類、內酯、稠環芳烴、高聚物、葯物、人體代謝產物、表面活性劑，抗氧化劑、殺蟲劑、除莠劑的分析等物質的分析。

原理：高效液相色譜以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析和分離。

操作方法：如下圖所示，溶劑貯器中的流動相被泵吸入，經梯度控制器按一定的梯度進行混合然後輸出，經測其壓力和流量，導入進樣閥（器）經保護柱、分離柱後到檢測器檢測，由數據處理設備處理數據或記錄儀記錄色譜圖，餾分收集器收集餾分，廢液瓶收集廢液。

(2)純水沖c18柱子後擴展閱讀：

液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相，稱為經典液相色譜法，此方法柱效低、時間長（常有幾個小時）。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上，於60年代後期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。

HPLC根據固定相和流動相的成分分為正相色譜和反向色譜。

正相色譜法

採用極性固定相（如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相）；流動相為相對非極性的疏水性溶劑（烷烴類如正已烷、環已烷），常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調節組分的保留時間。常用於分離中等極性和極性較強的化合物（如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等）。

反相色譜法

一般用非極性固定相（如C18、C8)；流動相為水或緩沖液，常加入甲醇、乙腈、異丙醇、丙酮、四氫呋喃等與水互溶的有機溶劑以調節保留時間。適用於分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現代液相色譜中應用最為廣泛，據統計，它占整個HPLC應用的80%左右。

參考資料：網路-高效液相色譜

『叄』 在沖洗高效液相C18反相柱的時候，為什麼不能用純水

相C18色譜柱（即憎水柱子）如果用純水沖洗後，如果立即停泵則由於其憎水（疏水專）的緣故使得柱子內屬的水因而流失掉，長時間停泵使得柱子幹掉（變干），會造成柱子內固定相填料表面鍵合的硅烷基結構塌陷（也說成是失去支撐倒下），柱子就這樣報廢了。那麼一旦沖洗柱子用了純水相怎麼辦呢？誒！不要驚慌，只要你不停泵，上述情況不會立即發生，我們只要保證最後用有機相沖洗柱子，停泵後使柱子內留存的是有機相，就無大礙，

『肆』 液相色譜C18柱堵塞後如何沖洗柱子，能用純水 沖柱子嗎

C18柱子不能用純抄水沖洗，再說本來就堵了，壓力很高應該選擇壓力低的溶劑。
如果你確定是堵塞了，就用純乙腈反沖，先用低一點的流速，比如01ml/min，看壓力情況，不要超過200bar，再慢慢提高流速，但不要超過1.的流速，如果是真的堵了，可能會壓力慢慢降下來的。
如果上面方法不行，那還有可能是鹽析堵的，那就用乙腈：水=90：10反沖。

『伍』 安捷倫ZORBAX SB-C18能用100%純水做流動相么

產生的原因有很多，需要一個個排除尋找原因。
1、請先檢查一下進樣隔墊是不是漏氣了專
2、打開進樣器，屬將襯管取出，用丙酮浸泡清洗，再將襯管活化、乾燥，重新裝入進樣器中
3、檢查色譜柱前端是否平齊，是否已經沾污，若有，切除一小段，重新安裝色譜柱。
4、微量注射器使用時是否做好了清洗和潤洗？進樣技術是否不夠熟練?

『陸』 waters x bridge c18 能耐純水嗎

一般說來，衡量色譜柱的柱壓高低主要以甲醇為流動相時的柱壓為准。不同的液相內儀柱壓也容略有差異。
你所提供的色譜柱，一般情況下，以甲醇為流動相，流速為1ml/min時，柱壓在700-900psi，壓差在50psi以下均為正常。
10%乙腈我沒用過，30%乙腈的一般在1500psi左右，10%乙腈應該比它低。
純水可能損壞色譜柱，純乙腈可能堵塞單向閥，不建議使用上述流動相。

『柒』 為什麼普通C18色譜柱不能用純水沖洗

容易引起疏水坍塌，把強保留物質沖出來，會毀了柱子的，所以水相不能超過95%，最開始的梯度淋洗也是高有機相到高水相，但是不是純水相。

『捌』 waters c18 5u 250*4.6,純乙睛、10%乙睛、甲醇、純水各作為流動相流量為1ml時，壓力多少正常

一般說來，衡量色譜柱的柱壓高低主要以甲醇為流動相時的柱壓為准。不同的液專相儀柱壓也略有差異。屬
你所提供的色譜柱，一般情況下，以甲醇為流動相，流速為1ml/min時，柱壓在700-900psi，壓差在50psi以下均為正常。
10%乙腈我沒用過，30%乙腈的一般在1500psi左右，10%乙腈應該比它低。
純水可能損壞色譜柱，純乙腈可能堵塞單向閥，不建議使用上述流動相。

『玖』 液相色譜C18柱堵塞後如何沖洗柱子，能用純水 沖柱子嗎

C18柱子不能用純水沖洗，再說本來就堵了，壓力很高應該選擇壓力低的溶劑。
如果內你確定是堵容塞了，就用純乙腈反沖，先用低一點的流速，比如01ml/min，看壓力情況，不要超過200bar，再慢慢提高流速，但不要超過1.的流速，如果是真的堵了，可能會壓力慢慢降下來的。
如果上面方法不行，那還有可能是鹽析堵的，那就用乙腈：水=90：10反沖。