① 純化水微生物限度檢測
採用濾膜法進行微生物檢測是一種國際公認的微生物標准檢驗方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的葯典、FDA和EPA等組織的承認,廣泛應用於環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業等領域。賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用於濾膜法已有20多年的歷史,實用而且方便實用,它簡化了微生物檢測程序。
濾膜法微生物檢測:
將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由於濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。樣品中微生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去。然後,將濾膜放在培養基上培養,營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養出的菌落可以計數,並和樣品量相關。
濾膜法的優點:
- 與直接法比較,可以檢測大量的樣品
- 濃縮效應使微生物檢測的准確度提高
- 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔
- 可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果
操作具體一點就是:薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,製成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌稀釋培養皿,即可
滿意請採納。
② 微生物檢測出現紅色菌落是什麼細菌
細菌菌落總數是微生態制劑樣品檢測必做的一項指標。菌落總數檢測同其他檢驗一樣,也存在檢測誤差。平板計數法是檢測飼料中細菌總數、活酵母數、芽孢桿菌數及乳酸菌數的常用方法之一,因此,該值准確與否直接關繫到微生物飼料添加劑類產品的質量好壞。微生物平板計數的通常方法為每個樣品用 3個稀釋度,每個稀釋度常做 3個重復。但如何對平板菌落進行正確計數、3個稀釋度以哪一個稀釋度進行計數及微生物檢測允許誤差等問題,在飼料標准中並未有所規定,而這些問題與統計值的准確性密切相關。我們就實際檢測芽孢桿菌工作中遇到一些菌落計數的問題,與大家進行探討。
1材料與方法
1.1試驗材料
1.1.1樣品:隨機抽取微生態飼料添加劑合生素樣品3份。
1.1.2培養基:營養瓊脂。
1.1.3儀器設備:磁力攪拌器,無菌培養皿,培養箱,振盪器。
1.2 試驗方法
1.2.1樣品的振盪時間對菌數檢測的影響
選擇1個樣品,稱取10 g,放入無菌錐形瓶內,加入90 mL無離子水,磁力攪拌分別為l0、20、30、40和60 min。
用1 mL移液槍從中吸取1 mL樣品懸濁液加入到盛有9 mL去離子水的試管中,用振盪器使樣品充分均勻,以此類推,製成10-1~1O-7不同稀釋度的樣品溶液。
平板塗布法檢測菌含量:用移液槍從樣品稀釋液中各吸取200uL,每個樣品稀釋液3個重復;將平板倒置於35-37℃培養箱中培養24 h。
1.2.2檢測方法對菌數檢測的影響
各個樣品稱取l0 g,放入無菌錐形瓶內,加入90 mL無離子水,磁力攪拌分別為40 min。並稀釋成10-1~l0-7不同稀釋度的樣品溶液。
傾注平板法檢測菌含量:用移液槍從各個平行樣品相應稀釋液中各吸取1 mL,每個樣品稀釋液3個重復,待培養基表面乾燥後,將平板倒置於35-37℃培養箱中培養24 h。
平板塗布法檢測菌含量:用移液槍從各個平行樣品相應稀釋液中各吸取200uL塗布平板,每個樣品稀釋液3個重復;將平板倒置於35~37℃培養箱中培養24 h。
2結果
2.1樣品的振盪時間對菌數檢測結果的影響
採用細菌平板計數的方法,不同振盪時間對合生素中芽孢桿菌檢出量的結果見表1。從表l中可見:不同振盪時間獲得的細菌菌落數量有較大差別。總體而言,在一定時間內,隨著振盪時間的延長檢出有效菌含量增加,說明細菌從載體上解析需要一定的時間;當振盪時間為40 min後產品中的菌含量基本穩定。採用適當振盪時間才能更精確的顯示產品中有效菌的含量。
表1 震盪時間對有效菌含量結果的影響 億CFU/g
震盪時間
10min
20min
30min
40min
60min
含菌量
2
6
10.5
15
14
2.2 檢測方法對菌數檢測結果的影響
表2 檢測方法對有效菌含量結果的影響 億CFU/g
檢測方法
樣品平行
1
2
3
傾注平板法檢測有效菌含量
16.1
13.0
15.3
平板塗布法檢測有效菌含量
14.5
11.2
14.2
採用不同的檢測方法,對合生素中芽孢桿菌檢出量的結果見表2。從表2可見:不同方法獲得的細菌菌落數量有差別,傾注平板法相較平板塗布法檢測的菌含量多,但基本在20%誤差范圍內。平板計數法操作相對簡單、快捷且影響因素較少。傾注法培養基營養分布較均勻,對部分蔓延菌落能控制,但對操作人員熟練程度要求相對較高。
3分析與討論
3.1樣品處理對結果的影響
取樣時對樣品取樣口和取樣工具要消毒,防止樣品交叉污染。
3.2樣品的均質處理對結果的影響
固體樣品要用均質器或玻璃珠等充分均質,也可在稀釋液中添加相應溶解液(如吐溫80和液體石蠟等)的稀釋液,以保證樣品的充分均質。
測定芽孢桿菌活菌數時,不同振盪時間獲得的細菌菌落數量有較大差別,因為細菌從載體上解析並均勻分散到溶液中需要一定的時間,待測樣品應在振盪器上充分振盪,使得芽孢桿菌可以充分和均勻地分散到待測溶液中,避免因為菌體未完全釋放而引起結果中細菌含量偏低的現象。
3.3 試驗過程中操作方法的影響
加樣l mL時,用1 mL的吸管並且每做一個稀釋度都要換1支吸管,否則稀釋度間菌落計數誤差會超過10%,說明存在操作誤差。用吸管向平皿里加樣,平皿開口要小,吸管要直立且加樣結束後,讓吸頭接觸皿底乾燥處,保證加樣的體積不少。
③ 純化水微生物真菌檢測,培養出紅色小點和白色大圓點,請問這兩個分別是什麼品種的菌
白色大圓點可能是酵母菌吧,酵母菌菌落形態與細菌相似,但較大較厚,呈乳白色或紅色,表面濕潤、粘稠,易被挑起。
④ 純化水微生物限度檢查什麼菌,5種標准菌菌種可以只選其中一兩種嗎
5種菌種是做驗證用的,用一次就好,平時做純化水微生物限度只要金黃色葡萄球菌做陽性對照就好。
⑤ 做純化水微生物限度時濾膜周圍長了一圈菌是怎麼回事
有可能是污染了,濾膜上是否有菌落?所有器具好好消毒下,在做一下看看!希望對你有幫助
⑥ 純化水微生物限度,按照葯典要5種菌種。然後看您的回答是可以只用金黃色葡萄球菌,請問有什麼依據嗎
純化水的微生物的限抄度,按照2015版葯典是只需計數就好吧,而5種細菌分別是:大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑麴黴。這5種是用來做純化水的驗證的。一種都不能少。具體檢驗純水水的方法葯典上有可以查看。
⑦ 純化水的微生物限度里的薄膜過濾法如何計數啊
一次兩毫升水。把過濾完成的薄膜正面貼在R2A平板上,18小時後計數,每天數一次,可以用軟體數,也可以人工數,用記號筆在碟子上打點。細菌三天,黴菌五天。
⑧ 純化水微生物限度檢查用薄膜過濾法怎麼做
准備工作:
用純化水浸泡濾膜,浸泡完全後放入濾杯中,包好濾杯,連同回量筒、培養基、平皿、答取膜器、三角燒瓶等一起121℃滅菌30min。
滅菌後的物品一並傳入潔凈室中,微生物限度過濾器上連好已經滅好的濾杯,用緩沖液先潤濕濾膜,抽掉緩沖液,然後倒入供試液(10倍稀釋),濾過,再用緩沖液沖洗濾膜。
過濾結束後取下濾膜平貼於R2A瓊脂培養基平板上,32℃倒置培養5天。菌落計數(平皿上長幾個菌結果就報幾個菌)
(8)純化水限度檢測薄膜上出現紅色點是什麼菌擴展閱讀:
薄膜過濾系統主要用於去除小顆粒及溶解鹽,一般可分為微濾、超濾、納濾和薄膜過濾反滲透。
微濾又稱微孔過濾,它屬於精密過濾,截留溶液中的砂礫、淤泥、黏土等顆粒和賈第蟲、隱抱子蟲、藻類和一些細菌等,而大量溶劑、小分子及少量大分子溶質都能透過膜的分離過程。
超濾是一種加壓膜分離技術,即在一定的壓力下,使小分子溶質和溶劑穿過一定孔徑的特製的薄膜,而使大分子溶質不能透過,留在膜的一邊,從而使大分子物質得到了部分的純化
納濾 ( NF,Nanofiltration)是一種介於反滲透和超濾之間的壓力驅動膜分離過程,納濾膜的孔徑范圍在幾個納米左右。
參考資料來源:網路-薄膜過濾
⑨ 請問,在製作乳酸菌的過程中出現了紅色的菌落是什麼
肯定是黴菌,很可能是麴黴菌中的紅麴黴,但具體是哪一種黴菌只憑顏色是判斷不了的,一般沒有什麼影響。