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費森透析機停超濾方法

發布時間:2022-02-28 17:25:29

『壹』 不可逆性抑制劑只是不能用透析,超濾等方法去除,可以用其他方法使酶恢復活性嗎

酶如果失去活性的話是不能恢復的吧,尤其是生物酶。

『貳』 如何利用透析法進行脫鹽濃縮蛋白

二、蛋白質的分離純化
蛋白質的分離純化方法很多,主要有:
(一)根據蛋白質溶解度不同的分離方法
1、蛋白質的鹽析
中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶;當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的溶解度不同程度下降並先後析出,這種現象稱鹽析,將大量鹽加到蛋白質溶液中,高濃度的鹽離子(如硫酸銨的SO4和NH4)有很強的水化力,可奪取蛋白質分子的水化層,使之「失水」,於是蛋白質膠粒凝結並沉澱析出。鹽析時若溶液pH在蛋白質等電點則效果更好。由於各種蛋白質分子顆粒大小、親水程度不同,故鹽析所需的鹽濃度也不一樣,因此調節混合蛋白質溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質分段沉澱。
影響鹽析的因素有:(1)溫度:除對溫度敏感的蛋白質在低溫(4度)操作外,一般可在室溫中進行。一般溫度低蛋白質溶介度降低。但有的蛋白質(如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白)在較高的溫度(25度)比0度時溶解度低,更容易鹽析。(2)pH值:大多數蛋白質在等電點時在濃鹽溶液中的溶介度最低。(3)蛋白質濃度:蛋白質濃度高時,欲分離的蛋白質常常夾雜著其他蛋白質地一起沉澱出來(共沉現象)。因此在鹽析前血清要加等量生理鹽水稀釋,使蛋白質含量在2.5-3.0%。
蛋白質鹽析常用的中性鹽,主要有硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等。
其中應用最多的硫酸銨,它的優點是溫度系數小而溶解度大(25度時飽和溶液為4.1M,即767克/升;0度時飽和溶解度為3.9M,即676克/升),在這一溶解度范圍內,許多蛋白質和酶都可以鹽析出來;另外硫酸銨分段鹽析效果也比其他鹽好,不易引起蛋白質變性。硫酸銨溶液的pH常在4.5-5.5之間,當用其他pH值進行鹽析時,需用硫酸或氨水調節。
蛋白質在用鹽析沉澱分離後,需要將蛋白質中的鹽除去,常用的辦法是透析,即把蛋白質溶液裝入秀析袋內(常用的是玻璃紙),用緩沖液進行透析,並不斷的更換緩沖液,因透析所需時間較長,所以最好在低溫中進行。此外也可用葡萄糖凝膠G-25或G-50過柱的辦法除鹽,所用的時間就比較短。
2、等電點沉澱法
蛋白質在靜電狀態時顆粒之間的靜電斥力最小,因而溶解度也最小,各種蛋白質的等電點有差別,可利用調節溶液的pH達到某一蛋白質的等電點使之沉澱,但此法很少單獨使用,可與鹽析法結合用。
3、低溫有機溶劑沉澱法
用與水可混溶的有機溶劑,甲醇,乙醇或丙酮,可使多數蛋白質溶解度降低並析出,此法分辨力比鹽析高,但蛋白質較易變性,應在低溫下進行。
(二)根據蛋白質分子大小的差別的分離方法
1、透析與超濾
透析法是利用半透膜將分子大小不同的蛋白質分開。
超濾法是利用高壓力或離心力,強使水和其他小的溶質分子通過半透膜,而蛋白質留在膜上,可選擇不同孔徑的瀘膜截留不同分子量的蛋白質。
2、凝膠過濾
也稱分子排阻層析或分子篩層析,這是根據分子大小分離蛋白質混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝膠(Sephadex
ged)和瓊脂糖凝膠(agarose gel)。
(三)根據蛋白質帶電性質進行分離
蛋白質在不同pH環境中帶電性質和電荷數量不同,可將其分開。
1、電泳法
各種蛋白質在同一pH條件下,因分子量和電荷數量不同而在電場中的遷移率不同而得以分開。值得重視的是等電聚焦電泳,這是利用一種兩性電解質作為載體,電泳時兩性電解質形成一個由正極到負極逐漸增加的pH梯度,當帶一定電荷的蛋白質在其中泳動時,到達各自等電點的pH位置就停止,此法可用於分析和制備各種蛋白質。
2、離子交換層析法
離子交換劑有陽離子交換劑(如:羧甲基纖維素;CM-纖維素)和陰離子交換劑(二乙氨基乙基纖維素;DEAE?FONT
FACE="宋體"
LANG="ZH-CN">纖維素),當被分離的蛋白質溶液流經離子交換層析柱時,帶有與離子交換劑相反電荷的蛋白質被吸附在離子交換劑上,隨後用改變pH或離子強度辦法將吸附的蛋白質洗脫下來。(詳見層析技術章)
(四)根據配體特異性的分離方法-親和色譜法
親和層析法(aflinity
chromatography)是分離蛋白質的一種極為有效的方法,它經常只需經過一步處理即可使某種待提純的蛋白質從很復雜的蛋白質混合物中分離出來,而且純度很高。這種方法是根據某些蛋白質與另一種稱為配體(Ligand)的分子能特異而非共價地結合。其基本原理:蛋白質在組織或細胞中是以復雜的混合物形式存在,每種類型的細胞都含有上千種不同的蛋白質,因此蛋白質的分離(Separation),提純(Purification)
和鑒定(Characterization)是生物化學中的重要的一部分,至今還沒的單獨或一套現成的方法能移把任何一種蛋白質從復雜的混合蛋白質中提取出來,因此往往採取幾種方法聯合使用。
細胞的破碎
1、高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置於筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關後,逐步加速至所需速度。此法適用於動物內臟組織、植物肉質種子等。
2、玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置於管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用於量少和動物臟器組織。
3、超聲波處理法:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震盪破裂,此法多適用於微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在1KG至10KG頻率下處理10-15分鍾,此法的缺點是在處理過程會產生大量的熱,應採取相應降溫措施。對超聲波敏感和核酸應慎用。
4、反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由於細胞內冰粒形成和剩餘細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。
5、化學處理法:有些動物細胞,例如腫瘤細胞可採用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞,細菌細胞壁較厚,可採用溶菌酶處理效果更好。

無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺醯氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合於目的物質的提取。
濃縮、乾燥及保存
一、樣品的濃縮
生物大分子在制備過程中由於過柱純化而樣品變得很稀,為了保存和鑒定的目的,往往需要進行濃縮。常用的濃縮方法的:
1、減壓加溫蒸發濃縮
通過降低液面壓力使液體沸點降低,減壓的真空度愈高,液體沸點降得愈低,蒸發愈快,此法適用於一些不耐熱的生物大分子的濃縮。
2、空氣流動蒸發濃縮
空氣的流動可使液體加速蒸發,鋪成薄層的溶液,表面不斷通過空氣流;或將生物大分子溶液裝入透析袋內置於冷室,用電扇對准吹風,使透過膜外的溶劑不沁蒸發,而達到濃縮目的,此法濃縮速度慢,不適於大量溶液的濃縮。
3、冰凍法
生物大分子在低溫結成冰,鹽類及生物大分子不進入冰內而留在液相中,操作時先將待濃縮的溶液冷卻使之變成固體,然後緩慢地融解,利用溶劑與溶質融點介點的差別而達到除去大部分溶劑的目的。如蛋白質和酶的鹽溶液用此法濃縮時,不含蛋白質和酶的純冰結晶浮於液面,蛋白質和酶則集中於下層溶液中,移去上層冰塊,可得蛋白質和酶的濃縮液。
4、吸收法
通過吸收劑直接收除去溶液中溶液分子使之濃縮。所用的吸收劑必需與溶液不起化學反應,對生物大分子不吸附,易與溶液分開。常用的吸收劑有聚乙二醇,聚乙稀吡咯酮、蔗糖和凝膠等,使用聚乙二醇吸收劑時,先將生物大分子溶液裝入半透膜的袋裡,外加聚乙二醇復蓋置於4度下,袋內溶劑滲出即被聚乙二醇迅速吸去,聚乙二醇被水飽和後要更換新的直至達到所需要的體積。
5、超濾法
超濾法是使用一種特別的薄膜對溶液中各種溶質分子進行選擇性過濾的方法,不液體在一定壓力下(氮氣壓或真空泵壓)通過膜時,溶劑和小分子透過,大分子受阻保留,這是近年來發展起來的新方法,最適於生物大分子尤其是蛋白質和酶的濃縮或脫鹽,並具有成本低,操作方便,條件溫和,能較好地保持生物大分子的活性,回收率高等優點。應用超濾法關鍵在於膜的選擇,不同類型和規格的膜,水的流速,分子量截止值(即大體上能被膜保留分子最小分子量值)等參數均不同,必須根據工作需要來選用。另外,超濾裝置形式,溶質成份及性質、溶液濃度等都對超濾效果的一定影響。Diaflo
超濾膜的分子量截留值:
膜名稱分子量截留值孔的大的平均直徑
XM-300300,000140
XM-200100,00055
XM-5050,00030
PM-30 30,00022
UM-2020,00018
PM-1010,00015
UM-21,00012
UM05500 10

用上面的超濾膜製成空心的纖維管,將很多根這樣的管攏成一束,管的兩端與低離子強度的緩沖液相連,使緩沖液不斷地在管中流動。然後將纖維管浸入待透析的蛋白質溶液中。當緩沖液流過纖維管時,則小分子很易透過膜而擴散,大分子則不能。這就是纖維過濾秀析法,由於透析面積增大,因而使透析時間縮短10倍。

『叄』 費森尤斯血液透析機4008s的操作流程

按照置換液泵屏幕顯示進行操作(不能提前操作)
自檢狀態屏幕顯示(I1-test in proqyess) 自檢結束,屏幕顯示; (1)Select HD?HDF?HF?(選擇HD?HDF?HF?)按壓▲或▼鍵選擇HDF或HF, 按壓Enter確認;第一次。
(2)Connect sub tubing?(連接置換液管路?)按壓Enter鍵確認;第二次。
(3)Please wait(請等待)安裝安全導管前必須無菌操作,操作者的手不能 觸摸安全導管接頭防止污染。
(4)Open sub port!(打開置換液口),拔出置換液口鎖順時針旋轉90度。(藍 色旋鈕)
(5)Open pump door!(打開置換液泵的泵門)
(6)Connect sub tubing!(連接安全導管),將安全導管插入置換液口內,管 路固定在夾子內,將置換液口鎖再順時針旋轉90度,(藍色旋鈕)壓住安 全導管。(左側管裝入)
(7)Insert sub tubing!(插入安全導管),按住置換液泵Start/ Stop鍵, 直至管路被完全滾動進中
(8)Open rinse port!(打開沖洗口),拔出沖洗口鎖並順時針旋轉90度;(白 色旋鈕,安裝右側管)
(9)Conneet rinse connector! (連接沖洗器插頭),將沖洗器插入沖洗口內, 將沖洗口鎖再順時針旋轉90度壓住沖洗器;(白色旋鈕)
(10)Priming blood line (預沖血路管)將靜脈管路病人連接端與沖洗器 相連,動脈管路病人連接端與安全導管A、V相連。(紅對紅,安全導管的 紅色接頭與血路的動脈端紅色接頭連接;藍色接頭與血路管的動脈側給液 口連接,血路管靜脈側與沖洗器連接,插入置換液泵排液口,透析器靜脈 側朝上,同時將透析機的透析液接頭連接在透析器上,認真檢查動脈壓、 靜脈壓是否連接在監測器上、各個接頭是否連接好、各個夾子是否打開; 准備預沖)
(11)啟動血泵前先按壓prime(預沖鍵)開始預沖;
(12)待管路全部沖滿液體後,預沖量計時開始,一般1000ml-2000ml,屏幕顯 示「RinseVol: ××ml UF Vol:××ml」按壓Sta rt/Stop鍵停止 泵轉。
(13)Terminate rinse?(停止沖洗)按壓Enter鍵確認。
(14 )Remove rinse connector!(取出沖洗器插頭),卸下沖洗器 插頭,將沖 洗口鎖復位,將動脈管路和靜脈管路的病人連接端相連,安全導管連接 於動脈壺(前稀釋)或靜脈壺(後稀釋)。
(15)Enter uF time! (設定透析時間、脫水速度、調整透析液的流量、按UF 透析菜單設定)。.
(16)Enter sub voIume(設定置換液量)准備連接病人前將肝素注射器連接在 透析機的肝素注射器架上,打開夾子。
(17)血透開始後,即打開UF鍵;調整血流量後,病人無不良反應, 可輸入血濾量;先按容量鍵、再按箭頭、機器默認50/min 、可調至70 -80/min ,同時總量自動算出,再按確認鍵,再按血濾鍵開關(藍色) 選擇好前或後稀釋補液法將血濾給液口打開。(不能忘記)血濾開始。

『肆』 費森4008S血液透析濾過機更換細菌過濾器的程序

那支過濾器就是過濾反滲水和透析液混合液體的,雙泵機才有另一支過濾器,是置換液過濾器。血透機的血路管都是可以通用的。進口和國產的都有。費森的消毒液也有國產的可以代替。

『伍』 費森4008s血液濾過機鈉曲線怎麼操作

摘要 超濾曲線的作用:1 避免透析後期低血壓的發生。2 防止透析當中肌肉痙攣的發生

『陸』 如何為血液透析病人設定超濾量

理想狀態就抄是,讓患者體重達到干體重,清除掉全部的多餘水分。
但,有一些患者透析間期體重增長控制的不好,體重增加過多,如果想要全部清除,必然會導致血容量下降型低血壓,針對這樣的患者,就只能增加透析次數,控制每次超濾量。

『柒』 超濾與透析的區別

一、原理不同

超濾:超濾是血液通過機器泵或者血壓流經體外濾器,在人工腎小球跨膜壓的作用下,液體從壓力高的一側向壓力低的一側移動,通過對流的方式獲得超濾液。

透析:透析依靠半透膜進行彌散和滲透。半透膜兩側的溶質濃度差就是驅動溶質移動的原動力,溶質從濃度高的一側通過平衡膜向濃度低的一側(彌散作用),水分子移向滲透濃度高的一側(滲透作用)。

二、使用的膜不同

超濾:超濾膜的孔徑在0.05 um–1 nm之間,主要用於截留去除水中的懸浮物、膠體、微粒、細菌和病毒等大分子物質。

透析:透析所使用的半透膜厚度為10-20微米,膜上的孔徑平均為3納米,所以只允許分子量為1.5萬以下的小分子和部分中分子物質通過,而分子量大於3.5萬的大分子物質不能通過。

三、裝置不同

超濾:超濾裝置一般由若干超濾組件構成。

透析:透析所使用的裝置是血液透析器。


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超濾的操作影響因素:料液流速、操作壓力、溫度、運行周期、進料濃度、料液的與處理、膜的清洗。

操作溫度主要取決於所處理的物料的化學、物理性質。由於高溫可降低料液的黏度,增加傳質效率,提高透過通量,因此應在允許的最高溫度下進行操作。

超濾膜透過通量與操作壓力的關系取決於膜和凝膠層的性質。超濾過程為凝膠化模型,膜透過通量與壓力無關,這時的通量稱為臨界透過通量。

『捌』 尿毒症透析治療的方法有幾種

作為患者到底選擇哪種透析方法比較好呢?其實,只要搞清楚這兩種方法的不同,你才能得到正確的選擇。兩種方法都可以使患者症狀消失,精神和體力得到恢復,血生化恢復正常,可以基本正常工作。
血液透析,是一種易行、應用廣泛、較安全的血液凈化方法。血液透析包括溶質的移動和水的移動,即血液和透析液在透析器也就是人工腎內借半透膜接觸和濃度梯度進行物質交換,使血液中的代謝廢物和過多的電解質向透析液移動。
腹膜透析,是指利用腹膜作為半滲透膜,利用重力將配製好的透析液通過導管灌入患者的腹膜腔,這樣,在腹膜的兩側就形成了溶質的濃度梯度差,高濃度一側的溶質向低濃度一側移動;而水分則從低滲一側向高滲一側移動,通過腹腔透析液不斷地更換,從而達到清除體內代謝物、有毒物質及糾正水、電解質平衡紊亂的目的。
目前不手術、不透析治療尿毒症的方法屬生物細胞移植療法,我院已經治癒32000多例患者。祝您早日康復。

『玖』 德國費森尤斯CRRT MultiFiltrate 床旁血濾機怎麼操作(具體操作步驟)和常見報警處理解決辦法

1. 啟動
1.1 連接電源
1.2 打開機器背面開關鍵
1.3 打開操作面板開關鍵(按下約3秒鍾)
2. 自檢測
2.1 核對機器軟體版本
2.2 核對開始條件是否滿足
3. 功能檢測
3.1 檢查顯示序號是否完整
3.2 檢查機器是否有聲音報警響應
4. 選擇治療模式
4.1 選擇「選擇新的治療」或「繼續原來的治療」
4.2 選擇「CVVH」治療模式
5. 安裝管路系統
5.1 按照指示安裝盒式動靜脈管路系統
5.2 按照指示安裝置換液管路系統
5.3 按照指示安裝肝素注射器
6. 預充管路系統(後置換連接方式)
7. 沖洗管路系統
8. 輸入治療參數
9. 超濾沖洗
10. 再循環/等待病人
11. 結束准備程序,選擇「前稀釋」或「後稀釋」
12. 連接患者
13. 開始治療,調整治療參數
14. 完成治療
14.1 選擇「結束治療」並「確認」
14.2 關血泵
14.3 動脈端與患者斷開,接生理鹽水,開始回輸
14.5 斷開與病人的連接,移開管路系統
14.6 記錄治療歷史
15. 關機,清潔機器

『拾』 腹膜透析患者剛剛開始透析,不太明白超濾量怎麼算,比如我中午灌入1330毫升,晚上流出1300毫升

腹膜透析超濾量是透出量減去透入量。因為沒有描述透入量,不能准確算出超濾量。一般常規透入量是2000ml,故超濾量是500ml。

以慢性腎衰竭的患者為例。如果患者有腹膜透析適應證,沒有禁忌證,則可以選擇腹膜透析治療。專科醫生將向患者或監護人無偏見地介紹血液透析、腹膜透析、腎移植等腎臟替代治療方法的治療方式、原理和各自的優缺點並給予中肯的治療建議。除醫療方面原因外,可由患者自主選擇透析方式。


(10)費森透析機停超濾方法擴展閱讀

需要接受透析治療的情況:

透析療法是利用半滲透膜來去除血液中的代謝廢物和多餘水分並維持酸鹼平衡的一種治療方法。

一般來說,患者血肌酐濃度超過700,或者腎小球濾過率在15ml/min/1.73m2以下時,如果出現了水負荷過重(比如有水腫或腹脹的症狀)、嚴重的營養不良、葯物難以糾正的高鉀血症、高磷血症等,就需要做好隨時做透析的准備。

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