電動移液器過濾膜

❶ 移液槍計算

移液器操作規范和使用注意事項：
1．設定移液體積
從大量程調節至小量程為正常調節方法，逆時針旋轉刻度即可
從小量程調節至大量程時，應先調至超過設定體積刻度，再回調至設定體積，這樣可以保證移液器的精確度
2．裝配移液槍頭
將移液槍垂直插入吸頭，左右旋轉半圈，上緊即可。
用移液器撞擊吸頭的方法是非常不可取的，長期這樣操作回導致移液器的零件因撞擊而鬆散，嚴重會導致調節刻度的旋鈕卡住
3．吸液及放液
垂直吸液
吸頭尖端浸入液面3mm以下，吸液前槍頭先在液體中預潤洗
慢吸慢放
放液時如果量很小則應吸頭尖端可靠容器內壁
4．吸有液體的移液槍不應平放，槍頭內的液體很容易污染槍內部而可能導致槍的彈簧生銹
5．移液槍在每次實驗後應將刻度調至最大，讓彈簧回復原型以延長移液槍的使用壽命
6.吸取液體時一定要緩慢平穩地松開拇指，絕不允許突然松開，以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣。
7.為獲得較高的精度，吸頭需預先吸取一次樣品溶液，然後再正式移液，因為吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時，吸頭內壁會殘留一層」液膜」，造成排液量偏小而產生誤差。
8.濃度和粘度大的液體，會產生誤差，為消除其誤差的補償量，可由試驗確定，補償量可用調節旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定。
9.可用分析天平稱量所取純水的重量並進行計算的方法，來校正取液器，1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g.
10在設置量程時，請注意 旋轉到所需量程 數字清清楚楚在顯示窗中， 所設量程在移液器量程范圍內不要將按鈕旋出量程，否則會卡住機械裝置，損壞了移液器。
11.移液器嚴禁吸取有強揮發性、強腐蝕性的液體（如濃酸、濃鹼、有機物等）。
12.嚴禁使用移液器吹打混勻液體。
13.不要用大量程的移液器移取小體積的液體，以免影響准確度。同時，如果需要移取量程范圍以外較大量的液體，請使用移液管進行操作

移液器的校準方法：
1、准備超純水、萬分之一天平（如果校正0.5~2.5ul量程的，至少要十萬分之一的天平）、溫濕度計、恆溫室，還需准備一個小口容器，防止水分揮發。
2、按移液器總量程的100%、50%、10%分別進行第三和第四步。
3、吸頭要反復吸取超純水三次後，吸取固定容積的超純水，推入放置在天平上的小口容器中，待數據穩定讀取天平數值，同時記錄溫度。重復10次。
4、將測量的數據用iso8655中的計算公式計算獲得對應溫度下的體積，取平均值。
5、根據三個測量點的偏差，用移液器專用的校正扳手通過移液器的校正窗進行調整。
6、重復3、4步，直至偏差在ISO8655的要求內為止。
另外，不同的移液器的校正窗和扳手的形式是不同的：
1、Gilson的是在頂端的那個帶有小孔的旋鈕，標配是不帶扳手的，因為Gilson是定期免費校正的。
2、Eppendorf的是在把手的側邊，有的型號是用一個鋁箔覆蓋，有的是用校正紙片貼住的，標配帶有扳手，與拆卸套筒的工具公用。
3、BioHit的與Gilson類似。
如果是電動移液器，那校正就簡單多了，一般測量完三個校正點的數據後，直接進入校正界面，將誤差數據輸入就可以自動校正了。
一般還是交給廠家或者代理商進行校正比較放心，一般地區總代都是購買了自動校正平台的，將移液器放在上面，機器自動進行測量和校正工作的。

❷ 人胚腎細胞衍生株293t細胞有什麼特點

1. 養293細胞和293T一樣。以293T為例，預先准備3個T150瓶的293T細胞，培養基為DMEM + 10% FBS，1% Glutamax ，1% 青黴素-鏈黴素。

2. 將細胞分到12分到12個T150瓶中，每瓶的細胞密度是8×106個。

3. 第二天，鏡下檢查細胞。細胞融合度應大致為30-40%，分布均勻。

4. 轉染前1小時，取出細胞板，去除原有細胞培養基，加入20ml的Opti-MEM培養基，將細胞送回培養箱。

5. 取兩支無菌的50ml離心管，其中一支中加入252 μg pNL-EGFP/CMV/WPREDU3 載體質粒，168 μg pCD/NL-BH*DDD
包裝質粒和84 μg pLTR-G質粒，用Opti-MEM培養基補齊到18ml。另一支中加入500 μl Trans-EZ溶液和17.5 ml
Opti-MEM培養基，用電動移液器輕輕混勻。將Trans-EZ稀釋液滴加到質粒管中，邊加邊輕輕晃勻。

關鍵步驟：推薦使用Qiagen質粒大抽試劑盒或相當的試劑盒所制備的質粒。

6. 室溫孵育20分鍾，使DNA和Trans-EZ充分結合形成轉染復合體。

7.
取1支5ml的移液管，將得到的DNA-Trans-EZ復合體均勻滴加入到細胞培養板中，每板3ml。來回晃動培養板，混勻後放回到5%二氧化碳培養箱。每一皿細胞培養盤不要超過6盤。

8. 6小時後，移去細胞上清，更換為17ml的DMEM完全培養基。

9.
轉染後一天觀察細胞，所有的細胞應當都是健康的並且密度接近60-80%。如果所轉染質粒帶有GFP熒光，那麼這時候可以看到大於95%的細胞都是帶有熒光的。

10. 將細胞送回培養箱繼續培養2天（36-48小時）。在這個過程中，細胞會逐漸融合形成多核體，大多數的細胞依然貼壁。

11. 收集所有的上清，分裝到50ml離心管中。

12 4℃，500g離心10分鍾，除去脫落的細胞和大的細胞碎片。

13 總的上清約為204 ml，用250-ml 0.45 μm PVDF過濾裝置過濾。如果發現濾膜被堵住，表現為過濾速度變慢，更換新的濾器。

❸ 我的移液器按鈕壓下去彈不起來了，怎麼辦

第一步：移液器槍頭的安裝

移液器槍頭的安裝比較簡單，常用的方法是旋轉安裝，把移液器頂端插入槍頭，在輕輕用力下壓的同時，左右微微轉動，旋轉上緊即可。

第二步：設定移液器的移液容積

為了實驗結果的嚴謹性，一般移液容積設定要結合粗調和細調，首先通過旋轉按鈕將體積值迅速調整至接近自己的預想值；然後當體積值接近自己的預想值之後，應將移液器橫置，水平放至自己的眼前，通過調節輪慢慢地將容量值調至預想值，從而避免視覺誤差所造成的影響。

第三步：預洗移液器槍頭

為了確保實驗的精度和準度，我們在安裝了新的槍頭或增加了容量值以後，應該把需要轉移的液體吸取、排放兩到三次，這樣做的目的是為了讓槍頭內壁形成一道同質液膜，使整個移液過程具有更高的重現性。

第四步：移液

先將移液器排放按鈕按至第一停點，再將槍頭垂直浸入液面，浸入的深度為：

P2、P10 ≦ 1 mm；
P20、P100、P200 ≦ 2 mm；
P1000 ≦ 3 mm；
P5mL、P10mL ≦ 4 mm；

浸入過深的話，液壓會對吸液的精確度產生一定的影響，當然，具體的浸入深度還應根據盛放液體的容器大小靈活掌握。

第五步：放液

放液時，槍頭緊貼容器壁，先將排放按鈕按至第一停點，略停頓後，再按至第二停點，這樣做可以保證槍頭內無殘留液體。如果這樣操作後還有殘留液體存在的話，就應該更換槍頭了。

第六步：卸掉移液器槍頭槍頭

卸掉的槍頭一定不能和新吸頭混放，以免產生交叉污染。移液器用完後調回更大量程。

梅特勒-托利多有Pipet-Lite XLS+手動單道移液器、Pipet-Lite XLS+手動多通道移液器、Pipet-Lite XLS間距可調手動多道移液器、Pipet-Lite PL+ 移液器、Pipet-One 移液器，還有E4 XLS+ 單道電動移液器、E4 XLS+ 多道電動移液器、E4 XLS間距可調多道電動移液器，移液器設置、協議和服務警報可以通過密碼進行保護，以符合GLP/ GMP認證的規定。 而且，GLP數據，如服務記錄、循環和狀態數據等，可完全防篡改。

❹ dragonlab移液器進水了怎麼處理

【上海巴玖】提示您：移液器頭部都是有過濾膜的，把機器拆開，過濾膜換了就行了。

❺ 如何養293、293T系列的細胞

將細胞培養瓶豎立放置，吸走培養基，如果培養基中的脫落細胞較多，說明細胞現在很容易脫落，只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%)，來回輕微晃動培養瓶直到細胞完全脫落，加入10mlMEM，混勻，不能吹打，分裝2瓶。

如果細胞沒長滿就脫落，則只需加入5mlMEM，不分裝。如果培養瓶中的細胞貼壁較牢固，培養基上清沒有細胞脫落碎片，且細胞長滿達到80％以上，吸走培養基，加入5ml的PBS+EDTA(0.02%)，迅速輕微晃動，豎立培養瓶，吸走，加入1ml0.05%胰酶，37度消化不超過3min。

(5)電動移液器過濾膜擴展閱讀：

注意事項：

1、盡量用早期的細胞，傳代太多狀態不好，產毒也不好，貼壁困難。

2、塑料的瓶子，DMEM+10%的小牛血清即可，要求並不高，ATCC上有詳細的培養方法。

3、主要是傳代，胰酶消化點到即止，不能和其它成纖維細胞一樣。

4、細胞代數越高生長越快，同時性狀和原代差別也更大。一般2-3天傳代一次比較合適。

5、傳代時細胞密度在80%左右比較好，如果超過90%融合再傳會影響細胞狀態。

❻ bio-dl1-5ml移液器說明書

【上海巴玖】提示您：
一個完整的移液循環，包括吸頭安裝——容量設定——預洗吸頭——吸液——放液——卸去吸頭等六個步驟。每一個步驟都有需要遵循的操作規范。
1.吸頭安裝： 正確的安裝方法叫旋轉安裝法，具體的做法是，把白套筒頂端插入吸頭(無論是散裝吸頭還是盒裝吸頭都一樣)，在輕輕用力下壓的同時，把手中的移液器按逆時針方向旋轉180度。切記用力不能過猛，更不能採取剁吸頭的方法來進行安裝，因為那樣做會對您手中的移液器造成不必要的損傷。
2.容量設定： 正確的容量設定分為兩個步驟，一是粗調，即通過排放按鈕將容量值迅速調整至接近自己的預想值;二是細調，當容量值接近自己的預想值以後，應將移液器橫置，水平放至自己的眼前，通過調節輪慢慢地將容量值調至預想值，從而避免視覺誤差所造成的影響。 在容量設定時，還有一個需要特別注意的地方。當我們從大值調整到小值時，剛好就行;但從小值調整到大值時，就需要調超三分之一圈後再返回，這是因為計數器裡面有一定的空隙，需要彌補。
3.預洗吸頭： 在我們安裝了新的吸頭或增大了容量值以後，應該把需要轉移的液體吸取、排放兩到三次，這樣做是為了讓吸頭內壁形成一道同質液膜，確保移液工作的精度和準度，使整個移液過程具有極高的重現性。其次，在吸取有機溶劑或高揮發液體時，揮發性氣體會在白套筒室內形成負壓，從而產生漏液的情況，這時就需要我們預洗四到六次，讓白套筒室內的氣體達到飽和，負壓就會自動消失。
4.吸液： 先將移液器排放按鈕按至第一停點，再將吸頭垂直浸入液面，浸入的深度為：P2、P10小於或等於1毫米，P20、P100、P200小於或等於2毫米，P1000小於或等於3毫米，P5ML、P10ML小於或等於4毫米(浸入過深的話，液壓會對吸液的精確度產生一定的影響，當然，具體的浸入深度還應根據盛放液體的容器大小靈活掌握)，平穩松開按鈕，切記不能過快。 5. 放液： 放液時，吸頭緊貼容器壁，先將排放按鈕按至第一停點，略作停頓以後，再按至第二停點，這樣做可以確保吸頭內無殘留液體。如果這樣操作還有殘留液體存在的話，您就應該考慮更換吸頭了。
6. 卸掉吸頭： 卸掉的吸頭一定不能和新吸頭混放，以免產生交叉污染。 兩分鍾檢查法： 這是可以對手中移液器進行快速檢查的一種簡單方法，通過檢查，來判斷我們手中的移液器是否處於一種正常的工作狀態。

❼ 如何正確使用移液器

第一步：移液器槍頭的安裝

移液器槍頭的安裝比較簡單，常用的方法是旋轉安裝，把移液器頂端插入槍頭，在輕輕用力下壓的同時，左右微微轉動，旋轉上緊即可。

第二步：設定移液器的移液容積

為了實驗結果的嚴謹性，一般移液容積設定要結合粗調和細調，首先通過旋轉按鈕將體積值迅速調整至接近自己的預想值；然後當體積值接近自己的預想值之後，應將移液器橫置，水平放至自己的眼前，通過調節輪慢慢地將容量值調至預想值，從而避免視覺誤差所造成的影響。

第三步：預洗移液器槍頭

為了確保實驗的精度和準度，我們在安裝了新的槍頭或增加了容量值以後，應該把需要轉移的液體吸取、排放兩到三次，這樣做的目的是為了讓槍頭內壁形成一道同質液膜，使整個移液過程具有更高的重現性。

第四步：移液

先將移液器排放按鈕按至第一停點，再將槍頭垂直浸入液面，浸入的深度為：

P2、P10 ≦ 1 mm；
P20、P100、P200 ≦ 2 mm；
P1000 ≦ 3 mm；
P5mL、P10mL ≦ 4 mm；

浸入過深的話，液壓會對吸液的精確度產生一定的影響，當然，具體的浸入深度還應根據盛放液體的容器大小靈活掌握。

第五步：放液

放液時，槍頭緊貼容器壁，先將排放按鈕按至第一停點，略停頓後，再按至第二停點，這樣做可以保證槍頭內無殘留液體。如果這樣操作後還有殘留液體存在的話，就應該更換槍頭了。


第六步：卸掉移液器槍頭槍頭

卸掉的槍頭一定不能和新吸頭混放，以免產生交叉污染。移液器用完後調回更大量程。

梅特勒-托利多有Pipet-Lite XLS+手動單道移液器、Pipet-Lite XLS+手動多通道移液器、Pipet-Lite XLS間距可調手動多道移液器、Pipet-Lite PL+ 移液器、Pipet-One 移液器，還有E4 XLS+ 單道電動移液器、E4 XLS+ 多道電動移液器、E4 XLS間距可調多道電動移液器，移液器設置、協議和服務警報可以通過密碼進行保護，以符合GLP/ GMP認證的規定。 而且，GLP數據，如服務記錄、循環和狀態數據等，可完全防篡改。

❽ 移液器取液時用力按下按鈕有什麼影響

手動移液器使用的時候按壓速度和節奏對操作結果都會有影響。排液的時候按壓太快，可能會導致一些液體殘留，尤其是液體比較粘稠的時候。另外移液操作的重復性好壞很大程度上是由操作人本身的操作習慣決定的。如果要保持精確的操作結果，節奏和速度應保持均勻一致。如果經費允許可以考慮買電動的移液器，我們實驗室用的賽多利斯電動移液器，不用擔心按壓用力的問題，設置好操作速度後按按鈕，移液器會自動按照設置的節奏和速度來吸排液，特別好用。

❾ 培養基過濾

WC型微孔濾膜使用說明書

本廠用二醋酸——三醋酸纖維素為基材，以流涎法製成微孔濾膜（簡稱MC濾膜），是現在國內新型的一個品種，它克服了目前常用的硝酸—酸酸混合纖維素微孔濾膜（簡稱混合濾膜）的質脆、易斷裂、有靜電吸引、易燃，遇75%以上酒精易膨脹與溶解及在偏鹼性溶液中易產生有毒的硝酸根和亞硝酸根等的不足之處。本廠MC濾膜在國內上百家葯廠、醫院、科研所等廣泛用於大輸液、針劑及各種溶液精濾，使用效果極佳，澄明度合格率普遍提高。目前該產品暢銷全國，深受用戶歡迎。同時微孔濾膜不但用於制葯業，而且在生物製品、醫學微生物學、化工、電子工業、冶金工業、臨床化驗、釀造、鍾表、航空等工業方面超純水的制備、空氣凈化、醫葯用油、潤滑、燃料用油及科研實驗化驗室濾除細菌和微粒方面等將有越來越廣泛的推廣和應用。
一、 要用途
（1） 醫葯工業：用於水針劑，大輸液及結晶前溶液的微粒和細菌過濾，抗菌素、球蛋白，疫苗血清及組織培養等過濾。
（2） 電子工業：用於半導體器件和集成電路車間的空氣凈化，制備洗滌用的高純水質，對溶劑、顯影劑、光刻膠等進行凈化處理。
（3） 日化工業：用於日用化妝品中含乙醇和油脂類溶液的微粒過濾。
（4） 公共衛生：用於飲水過濾,河塘水質細菌過濾檢查、工作地區粉塵微粒過濾檢驗。
（5） 食品工業：飲料果汁、酒類、油類等的滅菌和懸浮雜質的過濾。
（6） 亦可用於無菌檢查——濾膜過濾法及其它科學研究中的分析測定等。
二、 MC型濾膜性能介紹
（1） 孔徑均勻：用汞壓法測定額定孔徑分布均勻，並用放大電鏡掃描圖象分析，額定孔徑基本一致。
（2） 孔隙率高：每平厘米濾膜中可包含一千萬至一億個額定微孔，以孔隙率測定法測得孔隙率在80%以上。
（3） 濾膜透水率高、濾速快：用透水率測定法測得0.8UM微孔濾膜透水率可達215亳升/平方厘米。分，1.2UM透水率可達311亳升/平方厘米。分。
（4） 強度高有韌性，因MC型濾膜生產過程中的三醋酸纖維素分子乙醯化完全、張力強度高，爆破強度法測定厚度0.10~0.15毫米膜，爆破強度≥3公斤/平方厘米，膜有韌性，即使對折數次也不易斷裂，所以使用壽命長。
（5） 濾膜的各向同性：MC型濾膜為各向同性，不分正反面，對額定孔徑以上的固體微粒能起到絕對截留作用。
（6） 熱穩定性：在120度熱壓滅茵30分鍾，熱穩定性良好。
（7） 化學穩定性：可過濾PH2~11各種葯液，還可過濾儀表油、5%醋酸、6N硫酸、6N氫氧化鉀、無水乙醇、丙三醇、甲醇、正丙醇、導丙醇、偏笨三酸三辛酯、聚乙二醇、各種酒類、飲料、醋等。
（8） MC型濾膜還具有無毒、無媒質遷移等優點。
三、 可供規格
孔徑（微米）：0.22 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2 3~5
直徑（毫米）：Ф25 Ф35 Ф50 Ф100 Ф150 Ф200 Ф300 Ф400 （如需特殊規格可定製）
各種孔徑適用范圍
（1）濾除微粒：應選用0.65um 0.8um 1.2um的濾膜.
（2）濾除細菌：應選用0.45um 0.3um 0.22um的濾膜.
四、 使用方法
（1） 將濾膜於70度左右的蒸餾水中浸泡4小時以上，使用前再用適量新鮮蒸餾水沖洗一二次，然後裝入已洗過的濾器中備用。
（2） 過濾方法：可採用加壓法、真空法或位差液壓法、加壓法的濾速隨著壓力提高而加快，一般不超過3~4公斤/平方厘米，採用抽氣過濾時應防止外界空氣的細菌、微粒污染。利用位差過濾，一般位差應考慮在3~5米以上（約相當於0.5個大氣壓），否則影響濾速。
五、 注意事項
（1） MC型濾膜適宜於PH2~11，對強酸強咸或某些有機溶劑不宜使用。
（2） 本品一般耐溫120度，熱壓30分鍾，耐2~4公斤/平方厘米。
（3） 微孔濾膜只能作為最後過濾階段，濾液必須經過沙濾棒、濾紙、濾球等粗過濾材料，可避免濾膜堵塞。
（4） 操作MC型濾膜時不可觸及尖硬物品，以免引起穿孔現象。在裝濾膜前要嚴格檢查微孔濾膜是否有漏孔，不合格不得使用。

混合纖維素酯微孔濾膜使用說明書

混合纖維素製成的薄膜濾材，經有關單位多次廣泛使用，質量符合標准，其產品表面平滑、質地輕薄、孔隙率高、且微孔結構均勻，因此且有流速快，不易吸附的特點。

一． 用途
本品用於制葯業、生物製品、礦泉飲料、釀造、電子等工業方面的水質、醫葯用油、潤滑用油、燃料用油及科研實驗化驗室等濾除細菌和微粒，一般0。65微米以上可除微粒，0。45以下可濾除細菌。

二． 規格
混合纖維素酯微孔濾膜各種規格如下：
公稱孔徑（直徑微米）0.2 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2
膜片直徑（毫米）25 35 50 60 100 150 200 300 400
（如需特殊規格另行定製）

三． 使用方法
1． 將濾膜平放於清潔盛器內，用70度左右的蒸餾水浸泡，使全部潤濕，數小時後（約4小時以上）傾去水，再用上法浸泡過夜，使用前再用適量溫蒸餾水清洗一次。
2． 將洗清的濾膜（濕）裝入適宜的濾器中，防止周圍漏液，自進液口放進濾液，並在:排氣口排出空氣，即可進行過濾。

四． 注意事項
1． 水膜片適宜於PH2-9的葯液，對強酸鹼或有機溶劑包括酒精等不宜使用。
2． 本品一般能耐溫120度，耐壓3~4公斤/平方厘米。
3． 微孔濾膜只能作為最後階段過濾，濾液必須先經過沙棒或其它濾材預過濾，以免濾膜堵塞。
上述使用方法，僅適用於水劑葯液或其它水溶劑的過濾。