超濾上樣量脂質體濃度

① 請教關於脂質體純化的問題

脂質體阿黴素的正常用量就是每平方米體表面積20mg的，真是因為它能在這濃度下就能達到局部有效濃度，也就是這樣它的副作用才更小。有關物的剩餘問題那是沒辦法的。因為沒生產10mg 的規格的。

② 做脂質體時磷脂濃度是用水相的量來算的嗎

做脂質體時磷脂濃度是用水相的量來算的
適當化學結構的親脂性葯物是鑲嵌在雙層膜內而被包裹在脂質體中，其包封率取決於所用脂質的濃度。在這種情況下，包封率可達到90％，就不一定要除去未包裹葯物。但是對水溶性葯物而言，被包裹的葯物僅是總量中的一部分，就必須從脂質體懸液中除去未包裹葯物。由於脂質體比被包裹的葯物分子要大得多，因此可利用它們的不同大小來分離除去未包裹的葯物，這些方法有凝膠過濾柱層析法，滲析法等；若被包裹的物質是蛋白質或DNA，或者未被包裹的葯物可能形成較大的聚結物，則可利用它們與脂質體浮力、密度的不同而採用諸如離心等方法進行分離。

③ 制備出的物質怎麼確定是脂質體而不是脂肪乳

適當化學結構的親脂性葯物是鑲嵌在雙層膜內而被包裹在脂質體中，其包封率取決於所用脂質的濃度。

④ 「鹽酸多柔比星注射液」和「鹽酸多柔比星脂質體」到底有什麼區別

一、作用不同

1、鹽酸多柔比星注射液：急性白血病（淋巴細胞性和粒細胞性）、惡性淋巴瘤、乳腺癌、肺癌（小細胞和非小細胞肺癌）、卵巢癌、骨及軟組織肉瘤、腎母細胞瘤、膀胱癌、甲狀腺癌、前列腺癌、頭頸部鱗癌、睾丸癌、胃癌、肝癌等。

2、鹽酸多柔比星脂質體：可用作一線全身化療葯物，或者用作治療病情有進展的AIDS-KS病人的二線化療葯物，也可用於不能耐受下列兩種以上葯物聯合化療的病人：長春新鹼、博萊黴素和多柔比星（或其他蒽環類抗生素）。

二、性狀不同

1、鹽酸多柔比星注射液：為紅色澄明溶液。

2、鹽酸多柔比星脂質體：為無菌、半透明紅色混懸液。

三、規格不同

1、鹽酸多柔比星注射液：5ml，10mg。

2、鹽酸多柔比星脂質體：20mg/10ml/瓶。

⑤ 如何提高純化蛋白濃度

蛋白純化後濃度太低怎麼辦
提高sds-page的上樣量
將蛋白樣品超濾濃縮幾倍提高濃度
wb壓片時間稍微延長一點

⑥ 為什麼1mg/ml的脂質體能把細胞殺死濃度降低4倍就比較正常，但濃度太低的包封率又降低。如何是好

脂質體是一種載休，它是由脂肪或類脂與細胞體合成的物質。油酸多相脂質體主要由大豆磷脂、膽固醇、非離子表面活性劑等物質構成的雙分子層圓形脂質體及包封在中心的油所構成。由於脂質體具有和細胞膜十分相似的組成和結構，有不同於其他載體的吸收和分布特點，化療葯物包封成脂質體後可以減少葯物劑量，降低毒性，減輕變態和免疫反應，延緩釋放，降低體內消除速度，改變葯物在體內的分布，提高葯物選擇性，改變給葯途徑。本品對多種動物腫瘤具有明顯抑製作用，它對腫瘤周期的影響為非特異性，但對S期細胞具有顯著殺傷作用。本品能抑制腫瘤細胞DNA及合成，當葯物濃度增至1mg/ml時，DNA合成呈現輕度抑制，故多相脂質體可能屬於干擾癌細胞代謝膜抗原，通過電鏡觀察發現，脂質體具有有細胞膜表面活性作用，通過此作用來強化腫瘤細胞膜抗原，且在一定濃度下，直接改變細胞膜通盤性，即易影響呼吸膜的有效面積，致使腫瘤細胞在能量缺乏情況下死亡。

⑦ 【求助】超濾能否脫鹽和濃縮一步完成啊

昨天有個millipore的技術人員就是這樣說的~HarveyWang(站內聯系TA)本人主要是從發酵液中提取酶,文獻上一般的步驟是先用硫酸銨沉澱,然後透析,再用超濾濃縮,最後冷凍乾燥, 這要看你需要做多大的體積了。:) (1)硫酸銨沉澱法：我的觀點是，如果你1000 mL的發酵液的話，硫酸銨沉澱可以用，但是這浪費多少硫酸銨啊？！做學術研究可以，如果你的課題是計劃做提取酶的工藝和中試的話，這種硫酸銨沉澱並不有太大的實用性。 （2）超濾步驟的選用要看你的酶溶液有多大的體積。 如果發酵液的酶的量並不是很濃的話，例如50 mL 10 mg/L的酶量，用這種超濾膜會損失掉大部分你的目地酶，都粘到膜上去了，很難洗下來（稀的NaOH可以）。不能輕信某品牌銷售說的話，用用就知道了。如果你的濃縮液體積比較大，例如100-500 mL，酶的濃度也很高，這是可以用超濾膜的。 （3）對於小體積的脫鹽透析，透析袋很好用的。這里是指10 mL-100 mL。從操作方便性上看，這個在小型試驗中我最喜歡用。好簡單啊。。。。 自己頂一個,解答的詳細的有重獎!(金幣可以再加) （1）發酵液的酶蛋白濃度大約是多少，純度是多少？發個SDS-PAGE看看，註明上樣量。 （2）硫酸銨沉澱後和透析後可上離子交換，這可以濃縮10-1000倍，還可以有純化效果，然後再冷凍濃縮啊。HarveyWang(站內聯系TA)哈哈哈哈，回帖就有金幣拿:Ddaidai0124(站內聯系TA)本人現在只是小規模的提取酶,馬上要上發酵罐,需要大規模的提取酶液,不是做酶學性質,所以酶的純度要求不高,和工業用酶的純度差不多就可以了!希望大家推薦個適合工業化提取酶液的工藝,主要考慮成本問題.請版主幫忙在增加懸賞金幣20個lvgl158(站內聯系TA)起碼知道 它的分子量 才能知道是否可以用同一個膜 如果小於一萬可能就有點難度 可以先用少量的硫酸銨澄清 離心後 進行超濾 在超濾前 必須的保證液體 清澈hezhao999(站內聯系TA)體積的在200ml以上用超濾儀，200ml以下可以用超濾離心管，如果不知分子量選用1000的膜完全可以了，如果知道分子量，則選擇酶分子量1/5的超濾膜。zhaocy8903(站內聯系TA)多大規模的發酵 多大規模的發酵

⑧ 脂質體阿黴素 在人體哪些組織中的濃度較高

自從1965年Bangham發現脂質體後，1971年Gregoriadis和Rymen首次報道將脂質體作為葯物載體，上世紀70年代末脂質體開始作為蒽環類抗腫瘤葯物的有效載體。脂質體是類似生物膜結構的雙分子小囊，是具有單個或多個雙層磷脂膜的囊泡，其主要成分是磷脂，磷脂分子中含磷酸基團的部分具有強烈極性(親水性)，碳氫鏈具有非極性(疏水性)[21。具有下述優點:①體內可被生物降解，免疫原性小。②水溶和脂溶性葯物都可包埋運載，葯物緩釋，葯效持續時間長。③通過細胞內吞融合作用，脂質體可直接將葯物送人細胞內，避免使用高濃度游離葯物從而降低不良反應。④正常組織毛細血管壁完整，大部分的脂質體不能滲透，而腫瘤生長部位毛細血管的通透性增加，使脂質體阿黴素聚集量增加，並由於阿黴素的緩釋，直接用於腫瘤部位，增加了治療效果。脂 質體 阿黴素進人體循環後主要被網狀內皮系統(reticuloendothelial system, RES)中的白細胞、單核細胞及巨噬細胞吞噬[31，這對於RES腫瘤的治療有特殊的意義。早期脂質體阿黴素的應用因穩定性差、葯物易滲漏、儲存期限短、組織靶向性差和易被RES迅速清除等受到限制。現在在其表麵包裹了高分子物質聚乙二醇的脂質體(peated liposomaldoxorubicin, PLD，即「隱形」脂質體，stealth liposome,其商品名為Caelyx )因其組成中含有親水性聚合物，可提高其表面的親水性。而且Caelyx的衍生物可以阻止血漿蛋白吸附，調理於脂質體表面[41，減少RES的吞噬吸收，逃避免疫統的攔截，延長了葯物在體內的循環時間

⑨ 鹽酸多柔比星脂質體注射液的葯代動力學

國外上市鹽酸多柔比星脂質體人體葯代動力學研究文獻鹽酸多柔比星脂質體在卡泊氏肉瘤患者進行的葯代動力學研究結果見下表。在相同劑量下，鹽酸多柔比星脂質體中絕大多數是以脂質體包裹形式存在的鹽酸多柔比星（約占測得量的90%～95%），參比葯物血葯濃度和AUC值顯著高於常規鹽酸多柔比星制劑。在滴注給葯後48～96小時，對卡波氏肉瘤和正常皮膚進行活組織檢査：在接受20mg/m[sup]2[/sup]鹽酸多柔比星脂質體的治療病人中，給葯48小時後卡波氏肉瘤中多柔比星總濃度（脂質體包裹和未包裹的）比正常皮膚均髙19倍（范圍3～53）。 國內本品在人體的比較葯代動力學試驗本品進行了與進口同類產品（以下簡稱參比葯物）人體比較葯代動力學試驗，採用兩制劑兩周期雙交叉試驗設計，給22例乳腺癌患者分別前後各一次滴注50mg/m[sup]2[/sup]，用葯間隔1月。比較本品與參比葯物的葯動學參數，以及單次臨床用葯的安全性。 對本品和參比葯物主要葯代參數經對數轉換後進行方差分析，統計結果表明，本品與參比葯物各葯代參數無統計學差異。兩葯單次給葯在不良反應發生程度和發生率上，與文獻報道一致。本品動物試驗給Beagle犬以1mg/kg劑量分別注射本品和參比葯物，檢測血清中葯物濃度，繪制葯一時曲線。兩葯物均符合二室模型的特徵。按二室模型計算本品和參比葯物的各項葯動參數，結果如下表。對葯動學參數以SPSS進行AN0VA檢測，在P=0.05水平未發現兩種樣品各參數之間有顯著性差異，提示本品和參比葯物靜脈注射後體內葯動學特徵基本相似。 用荷瘤大鼠尾靜脈注射5mg/kg的本品和參比葯物，在給葯後1小時，18小時和48小時檢測組織中葯物濃度，結果見下表。兩種葯物7個組織臟器鹽酸多柔比星的含量用SPSS進行AN0VA分析，在P=0.05水平，差異不顯著。

⑩ 用超濾離心法測包封率脂質體需不需要稀釋

超濾離心前應該可以根據需要進行稀釋，也可以不稀釋。
超濾離心後，內如果是取收集的離容心液進行檢測的話，建議取離心液進行定量稀釋，比如到固定體積的量瓶中，以便根據稀釋倍數確定離心液中的葯物濃度從而計算包封率。