❶ 混懸液的無菌如何採用薄膜過濾法
你參考一下這篇文獻看看：《復方磺胺嘧啶銀混懸液無菌檢查方法的建立及驗回證》丁答長玲田洪根成培光趙永德周肖龍薄明香來源：《中國葯房》2010年第45期。 原文找不到，只有摘要。 摘要：目的：建立復方磺胺嘧啶銀混懸液無菌檢查法並進行驗證。方法：將樣品經無菌定性濾紙初過濾後，取濾液適量，採用pH7．0氯化鈉一蛋白腖緩沖液作為沖洗劑，沖洗量分別為300、600、900mL，以大腸桿菌、金黃色葡萄球菌，銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑麴黴作為試驗菌種，按照薄膜過濾法進行無菌檢查，以金黃色葡萄球菌為陽性對照菌進行驗證試驗。結果：最佳沖洗量為細菌檢查600mL、真菌檢查300mL；驗證試驗中陽性對照菌24h內生長正常，各供試品管均未見菌生長，檢驗結果符合規定。結論：復方磺胺嘧啶銀混懸液無菌檢查時可以通過定性濾紙過濾和薄膜過濾聯用的方法消除其抑菌活性。 感覺有用的話，可以求助找一下這篇文獻。
❷ 微生物膜過濾法做大腸菌群用什麼培養基
大腸菌群使用正常的菌群培養基就可以了，微生物膜過濾法就是驗證在過濾過程中能回否完全過濾掉答細菌，通常檢測標准要求進行過濾測試時，只要細菌挑戰懸浮液分散性達到80%以上就可以了。對於培養菌群培養基並無要求，因為作為挑戰測試懸浮液並非是直接用培養基（液）！
❸ 細菌濾膜如何使用
買那種0.22um的一次性小濾器，把樣品倒入一次性針管中，在超凈工作台中過濾。容器也要注意滅菌。
❹ 用濾膜法測細菌總數,該如何處理
基於濾膜上細菌直接計數法的細菌總數快速檢測
【摘要】 細菌總數快速檢測在質量監測中具有重要的意義，目前除了經典的平板培養法以外，還有微菌落法、阻抗法等快速檢測方法，這些方法或者需要較長的檢測時間，或者需要較高的檢測成本。本研究提出一種不需要培養而在濾膜上直接計數的細菌總數的快速檢測方法，它主要分為過濾、染色、顯微鏡計數和計算四個步驟。計算細菌總數時，根據細菌在濾膜上的分布特點，對傳統公式進行改進，提出按區域計算細菌總數的計算方法，提高了檢測精度。研究結果表明，該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異（t=0.847，P=0.436＞0.05），是一種低成本、快速的細菌總數檢測方法。
1 引 言
細菌總數計數的研究已有很多，目前國標規定的方法為平板計數法，該方法是將樣品加入瓊脂營養基，在37 ℃下培養24～48 h後計數。這種方法精度高，但耗時長，難以滿足實際工作需要。為了簡化檢測程序、縮短檢測時間，國內外學者進行了大量的快速檢測方法的研究，提出了阻抗檢測法〔1〕、Simplate TM全平器計數法〔2〕、微菌落技術〔3-5〕、紙片法〔6-7〕等檢測方法，取得了一定的成果，但檢測時間仍在4 h以上。
本研究在分析了已有研究成果的基礎上，提出了在濾膜上染色後，直接計數的細菌總數檢測方法，具體步驟為：用集菌儀進行細菌收集→在膜上進行染色→在油鏡下計數→按公式計算出菌液濃度。實驗結果表明，該方法與傳統的平板培養法無顯著性差異，檢測時間約1 h，是一種快速的細菌總數檢測方法。
2 材料與方法
2.1 材料
本研究中用的試驗材料有集菌儀（杭州泰林生物技術設備有限公司），染色劑，生物顯微鏡（寧波永新光學股份有限公司），聚碳酸脂膜（直徑47 mm）。
2.2 實驗方法
2.2.1 准備工作 卸下集菌儀的濾網（見圖1），統計濾網上小孔總數，為計算菌液濃度做准備。另外，還需對集菌儀中的集菌器進行高壓滅菌，以防止過濾過程中引入外源細菌。
2.2.2 細菌收集 取一定濃度的黴菌菌液300～500 ml，裝在集菌儀上，集菌儀採用蠕動加壓方式對菌液施加一定的壓力，使菌液流過孔徑為0.45 um的聚碳酸脂膜。採用過濾方法是因為它可以使細菌相對均勻地分布在濾膜上，而選用聚碳酸脂膜是因為這種膜具有良好的透光性，便於用顯微鏡觀察。
2.2.3 染色 集菌後取下濾膜，切下一部分放在載玻片上，進行染色、固定。染色的目的是增大細菌與背景的對比度，便於觀察。
2.2.4 顯微鏡計數與計算 菌液經集菌儀過濾後，細菌在濾膜上的分布見圖2、圖3，由圖可以看出細菌分布具有以下兩個特點：一是細菌集中在一個個的圓形區域內，這些圓形區域和擋板的小孔相對應；二是各個圓形區域之間細菌很少。根據膜上細菌分布的這種特點，提出以圓形區域為單位進行計數，統計出圓形區域內細菌的平均個數，從而計算出菌液中細菌總數。具體步驟如下：隨機選擇10個圓形區域，在油鏡下，調節焦距以獲得較清晰的圖像（見圖4），統計每個圓形區域內的細菌個數，然後按公式(1)計算出菌液的濃度。
X=A10×N/V(1)圖2 膜上細菌的區域分布
Fig 2 The distributing region of bacteria on the filter(100倍)
圖3 膜上細菌的區域間隔
Fig 3 The space among the distributing regions(100倍)
圖4 膜上細菌染色後圖像
Fig 4 Figure of bacteria after coloration(1 000倍)
式中：X表示待檢菌液濃度（CFU/ml）
A表示10個圓形區域內細菌總數
N表示濾網上小孔總數
V表示集菌時所用待檢菌液體積（ml）
3 結果與討論
3.1 實驗結果
按上述方法計算得到的結果與平板培養法得到的結果見表1。表1 兩種方法得到的細菌總數
Table 1 Total bacteria number by two different methods
樣本1樣本2樣本3樣本4樣本5樣本6染色鏡檢
(cfu/ml）185168157165171166平板培養
(cfu/ml)176155165158183152
對表1中兩組數據進行配對t檢驗，在α=0.05時，雙尾檢驗結果如下：t=0.847，P=0.436＞0.05，說明兩種方法得到的結果無顯著性差異。
3.2 討論
3.2.1 計算公式的改進 用集菌儀對樣本菌液進行過濾時，由於濾網擋板的作用，使得細菌不是均勻地分布在整個濾膜上，而是集中分布在濾網的小孔處，所以，計算細菌總數時，不能採用公式X=A40×Φ1Φ22/V（其中Φ1，Φ2分別為濾膜直徑和視野直徑），該公式是微菌落方法檢測細菌總數中的常用計算公式。在本實驗中，根據細菌分布的特點，提出以圓形區域為單位計算細菌總數的思路，使計算結果更接近真實值，從而提高了檢測精度。
3.2.2 細菌大小的影響 細菌大小對本實驗的影響主要體現在鏡檢時，如果細菌太小，顯微鏡計數時不能將細菌從背景中分辨出來，我們的實驗結果顯示，不能分辨大腸桿菌和葡萄球菌，而較大的黴菌可以清晰地分辨。
3.2.3 檢測時間進一步縮短 細菌總數的經典檢測方法是平板培養法，得到的結果精度高，但是它所用時間長，為了縮短檢測時間，出現了微菌落法，將檢測時間縮短為4 h左右〔3-5〕。本研究不對細菌進行培養，而是在膜上染色後直接用顯微鏡計數，最大限度地縮短了檢測時間，使整個檢測時間在1 h左右。
4 結論
本研究用集菌儀將菌液過濾後，取濾膜一部分進行染色、製片，然後在油鏡下統計細菌個數。根據細菌在濾膜上的分布特點，提出將圓形區域作為統計單位，得到圓形區域內細菌的平均個數，從而計算出菌液濃度。實驗結果表明，按照該方法得到的結果與平板培養法的結果無顯著性差異。與平板培養法和微菌落法相比，該方法不需要細菌培養，檢測時間只需要1 h左右，明顯縮短了檢測時間，是一種快速、有效的細菌總數檢測方法。
❺ 微生物限度檢查 陰性長菌（薄膜過濾法）
第一，1.4Pa是筆誤么？
一般培養基用0.1MPa（相當於15Ib/in2或1.05Kg/cm2）,在121.5℃，15-30min可達到徹底滅菌的目的。
第二，滅菌鍋使用的問題，鍋內冷空氣是否完全排干凈，絕對影響滅菌效果的。
第三，只能是無菌操作的問題了。
❻ 微生物的膜過濾法是如何對菌數進行計數的
例如測定飲用水中大腸桿菌的數目：將已知體積的水過濾後，將濾膜放在伊紅美藍培養基上培養。在該培養基上大腸桿菌的菌落呈現黑色，可根據培養基上黑色菌落的數目，計算出水樣中大腸桿菌的數目。
❼ 微生物限度檢查中用膜過濾法時，是把濾膜上有菌液的那面貼到培養基上，還把反面貼到培養基
微生物限度的方法有多種。如果是用膜過濾法的話，就你提到的問題，可以查詢2010版的《中國葯典》附錄，裡面有提到。應該是把濾膜接觸到供試液的那面貼於培養基上。
❽ 什麼叫薄膜過濾法，具體怎麼操作呀
5.7.7 薄膜過濾法：
5.7.7.1 本法適用於有抗菌作用或大容量的供試品。
5.7.7.2 按集菌使內用規程安裝好集菌儀。
5.7.7.3 取供試品擦拭消容毒後，除去塑料蓋，插好導管，進行抽濾，濾液從排液管排出。
5.7.7.4 同法操作將培養基抽到全封閉式集菌培養器中。
5.7.7.5 取需氣菌、厭氣菌培養基和真菌培養基各1管，同法操作加入相應的溶劑作陰性對照。
5.7.7.6 陽性對照管應根據供試品特性在接種櫥內加入相應對照菌液1ml。（抗細菌葯物以金黃色葡萄球菌為對照菌，抗厭氧菌葯物以生孢梭菌為對照菌，抗真菌葯物以白色念珠菌為對照菌）。
5.7.7.7 需氣菌、厭氣菌培養基管置30-35℃培養箱中，真菌培養基管置20-25℃培養箱中各培養7日；陽性對照管細菌應在培養24-48小時，真菌應在培養24-72小時有菌生長。
❾ 生物細菌同步培養中的膜過濾系脫法的基本過程
僅供參考：一般生物膜過濾有兩種方式：第一是主動運輸，第二是無載體運輸。細菌同步培養中的膜可以通過吸附來過濾：其中就是膜通過同性相斥，異性相吸的原理來過濾。
❿ 平板計數法和膜過濾法檢測細菌有什麼區別呢 哪個精確一些
膜過濾法更為精確一些。
膜過濾技術是成熟的技術，ISO標准、AOAC、美國的EPA等等。所有這些標准，最起碼ISO標準是可以拿過來用的。採用濾膜法進行微生物檢測是一種國際公認的微生物標准檢驗方法，其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的葯典、FDA和EPA等組織的承認，廣泛應用於環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業等領域。賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用於濾膜法已有20多年的歷史，實用而且方便實用，它簡化了微生物檢測程序。 所以，1.有菌落總數檢測膜過濾法的標准。2.有可行性。
標准和技術是兩碼事，標準的制定主要是為了評價水平和保護安全。
2.關於平皿計數法檢不出，而濾膜法卻能檢測出，可想到以下兩點：1）平皿計數法，傾倒的培養基也要50度左右，而50度左右足矣使部分環境微生物不能生長了；2）在培養基內部的微生物比在表面的獲得更少的氧，應該也是會影響部分微生物的生長。膜過濾法是水質樣品的國際上公認的方法，有依據可查。主要起到一個富集的作用 畢竟水中的菌比較分散。
濾膜法微生物檢測： 將適當孔徑的濾膜放入濾器，過濾樣品，由於濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。樣品中微生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去。然後，將濾膜放在培養基上培養，營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換，在濾膜表面上培養出的菌落可以計數，並和樣品量相關。
濾膜法的優點：
-與直接法比較，可以檢測大量的樣品
- 濃縮效應使微生物檢測的准確度提高
- 帶有菌落的濾膜，可作為檢測的永久記錄存檔
- 可見的菌落和樣品量直接對應，得出定量結果