為什麼hplc不能用純水洗

Ⅰ c8色譜柱用水沖了怎麼辦

不能。一般洞渣不能。HPLC多用C8,C18色譜柱，而這些柱子要求最少也要有5%的有機相，用純水相容易破壞固定性，從而使柱效下降。

日常使用當中多數情況下是念顫薯反相色譜柱，c18，c8，苯基柱等等！因為這些柱子鍵合相極性極小，所仔者以流動相的極性肯定比他。

Ⅱ 反相柱怎麼過

反相柱的具體操作方法如下：

1、基本操作和硅膠柱相同，濕法裝柱好些，勻漿液用甲醇。

2、流動相基本是水、有機相混合物，有機相可選擇甲醇、乙腈、乙醇等。不能使用乙酸乙酯，氯仿，正己烷等正相溶劑。一般C18填料怕鹼，多數C18填料使用pH范圍2-8。慎用三乙胺，氨水之類的改性劑。流動相可加0.1%三氟乙酸或醋酸改善拖尾。

3、梯度洗脫從高水相開始，但有機相比例不低於5%，最好不要用純水，有機相比例越高越容易洗脫。

4、洗脫結束用純有機相，如純甲醇沖洗。

5、使用後的填料不要乾燥，保存在純甲醇里，也方便下次裝柱。

硅膠基質鍵合反相柱的清洗：

再生被污染HPLC柱子的關鍵是知道污染物的性質並且能找到適當的溶劑來去除。如果污染是因為重復進樣時強保留物質的累積引起的，利用簡單的清洗步驟來除去這些污染物往往就能恢復其色譜性能。

經過等度運行後的色譜柱，有時用90～100％含量的溶劑B（雙溶劑反相系統中洗脫能力較強的溶劑，如甲醇、乙晴、四氫 呋喃等）沖洗20個柱體積可以清除污染物（色譜柱的柱體積和空柱管體積概念不同，一根4.6x250mm柱子的柱體積只有2.5ml，2.1x150mm的是0.28ml）。

如果使用的是緩沖鹽系統，不要直接切換到強溶劑，突然轉換到高濃度有機溶劑可能會使HPLC流動體系中的緩沖鹽沉澱，這樣會導致更大的問題，如柱頭篩板堵塞、連接管路堵塞、泵泄漏、活塞損傷或進樣閥轉軸失靈。應該先用無緩沖鹽流動相（即把緩沖液換成水），沖洗5～10個柱體積以後才切換到用強溶劑清洗。

有時候，強溶劑B也沒法把殘留在色譜柱上的污染物洗掉。那麼就需要用更強的溶劑或者是系列溶劑組合。如果污染物不是生物質的，一種強溶劑或幾種溶劑組合清洗基本能解決問題。柱子生產廠家的網頁和產品說明書上很多也有清洗方法推薦。