Ⅰ gst標簽蛋白的純化步驟
GST標簽融合蛋白是檢測蛋白質表達、純化的方法。GST標簽（Glutathione S-transferase）是一個小分子和谷胱甘肽轉移酶結合的標簽，可幫助蛋白質在大腸桿菌中表達和易於純化。
下面是GST標簽蛋白的常規純化步驟：
一、提取細胞：將經過重組後表達含有GST標簽的目的蛋白的大腸桿菌進行培養，利用超聲波破碎等方法將其破碎提取出蛋白。
二、親和層析：利用谷胱甘肽瓊脂糖glutathione agarose等樹脂與GST標簽特異性地結合，純化GST標簽蛋白。在洗滌緩沖液中添加洗滌劑和鹽可以去除非特異性吸附的其他蛋白。
三、切割和洗脫：針對某些需要在不影響目的蛋白活性的情況下去除GST標簽的需求，可以加入酶，如thrombin，截斷GST標簽和目的蛋白之間的鏈接。之後在洗脫緩沖液中加入還原劑，如L-谷氨酸可將目的蛋白從樹脂上洗脫。
四、濃縮、去除雜質：使用濃縮器將純化的GST標簽融合蛋白進行濃縮。通過尺寸排除柱除去雜質，如在SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳中未被識別的其他蛋白等。
GST標簽蛋白的純化步驟主要包括提取目的蛋白、親和層析、切割和洗脫、濃縮和去除雜質等步驟，這些步驟的具體方案需要根據蛋白的特性和實驗需求進行優化和調整。