⑴ 請問Abbkine的蛋白質純化的填料有具體的信息資料嗎
PurKine His-Tag Ni-Super Packed Column 6FF PurKine 組氨酸標簽 Ni(鎳)-超級預裝柱(6%交聯) Abbkine BMC20026 1ml×5/3ml×5 預裝柱 固定化金屬離子親合層析(IMAC)是純化組氨酸標簽融合蛋白最常用的方法。選擇性地負載共價金屬離子(比如鎳或鈷)的IMAC層析介質能夠截留組氨酸標簽蛋白,並在變性條件下,能從包涵體中純化出不溶性的組氨酸標簽蛋白。Ni是最常用的螯合金屬離子,與之配套的Resin配體主要為亞氨基二乙酸(IDA)和氮川三乙酸(NTA)。
PurKine His-Tag IMAC-NTA Resin 6FF PurKine 組氨酸標簽 固定化金屬親和層析-NTA樹脂(6%交聯) Abbkine BMR20036 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine His-Tag Cu-IDA Resin PurKine 組氨酸標簽 Cu(銅)-IDA樹脂 Abbkine BMR20040 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine His-Tag Co-NTA Resin PurKine 組氨酸標簽 Co(鈷)-NTA樹脂 Abbkine BMR20050 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine His-Tag Co-NTA Resin 6FF PurKine 組氨酸標簽 Co(鈷)-NTA樹脂(6%交聯) Abbkine BMR20056 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine GST-Tag Glutathione Resin PurKine 谷胱甘肽S轉移酶標簽 谷胱甘肽樹脂 Abbkine BMR20100 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料 谷胱甘肽s-轉移酶(GST) 基因融合系統是用於從大腸桿菌中生產的GST-標簽蛋白的表達、純化和檢測的通用系統。可在非常溫和的條件下對GST-標簽蛋白進行純化,從而保留目的蛋白的功能和抗原性。GST標簽可能增加目的蛋白的溶解性和穩定性。GST標簽很大,其相對分子量(Mr)為26000。一段特殊的切割序列允許在純化後用不同的蛋白酶簡單地去除GST標簽。
PurKine GST-Tag Glutathione Packed Column PurKine 谷胱甘肽S轉移酶標簽 谷胱甘肽預裝柱 Abbkine BMC20100 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine GST-Tag Glutathione Resin 4FF PurKine 谷胱甘肽S轉移酶標簽 谷胱甘肽樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20104 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine GST-Tag Glutathione Packed Column 4FF PurKine 谷胱甘肽S轉移酶標簽 谷胱甘肽預裝柱(4%交聯) Abbkine BMC20104 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine MBP-Tag Dextrin Resin 6FF PurKine 麥芽糖結合蛋白標簽 糊精樹脂(6%交聯) Abbkine BMR20206 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料 麥芽糖結合蛋白(MBP)是一種有用的親和標簽,它們能增加生成目的蛋白的表達水平和溶解性。MBP標簽也促進依附蛋白合適的折疊。因為MBP能增加溶解性,這個標簽對以不溶形式(包涵體)聚集的重組蛋白特別有用。親和純化在生理條件下發生,並且使用麥芽糖進行溫和地洗脫。溫和的洗脫能保留住MBP標簽蛋白的活性。
PurKine MBP-Tag Dextrin Packed Column 6FF PurKine 麥芽糖結合蛋白標簽 糊精預裝柱(6%交聯) Abbkine BMC20206 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine Biotin-Tag Streptavidin Resin 6FF PurKine 生物素標簽 鏈霉親和素樹脂(6%交聯) Abbkine BMR20306 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料 生物素-鏈霉親和素(streptavidin)是最常見的生物學結合系統,常被用於結合、分離/純化生物素化的抗體、蛋白質、多肽、核酸以及其它分子或者相互作用復合體。
PurKine Biotin-Tag Streptavidin Packed Column 6FF PurKine 生物素標簽 鏈霉親和素預裝柱(6%交聯) Abbkine BMC20306 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine Strep II-Tag Strep-Tactin Resin 4FF PurKine Strep II標簽 Strep-Tactin樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20400 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Protein A Resin PurKine 蛋白A樹脂 Abbkine BMR20500 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料 用於不同來源單克隆和多克隆抗體純化的工具。抗體親和純化的基礎是protein G和protein A對不同物種IgG的Fc區域的高親和力和特異性。我們提供帶有固定在一些不同基質的protein G和protein A的層析介質,從而提供一種從腹水、細胞培養上清和血清中分離IgG和IgG亞類的卓越方法。我們也提供帶有重組protein L配體的層析介質用於抗體和抗體片段的純化。Protein L對kappa輕鏈的可變區有很強的親和力,能夠廣泛用於捕獲抗體片段比如Fab片段、單鏈可變區片段(scFv)和結合域抗體(Dabs)。
PurKine Protein A Packed Column PurKine 蛋白A預裝柱 Abbkine BMC20500 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine Protein A Resin 4FF PurKine 蛋白A樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20504 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Protein G Resin PurKine 蛋白G樹脂 Abbkine BMR20600 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Protein G Packed Column PurKine 蛋白G預裝柱 Abbkine BMC20600 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine Protein G Resin 4FF PurKine 蛋白G樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20604 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Protein A/G Resin 4FF PurKine 蛋白A/G樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20704 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Protein L Resin PurKine 蛋白L樹脂 Abbkine BMR20800 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Protein L Packed Column PurKine 蛋白L預裝柱 Abbkine BMC20800 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine Protein L Resin 4FF PurKine 蛋白L樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20804 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Protein L Packed Column 4FF PurKine 蛋白L預裝柱(4%交聯) Abbkine BMC20804 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine Protein AT Resin 4FF PurKine 蛋白AT樹脂(4%交聯) Abbkine BMR20904 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Protein AT Packed Column 4FF PurKine 蛋白AT預裝柱(4%交聯) Abbkine BMC20904 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine Antibody Purification SulfoLink Resin PurKine 抗體純化SulfoLink樹脂 Abbkine BMR21000 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Antibody Purification NHS-Activated Resin 4FF PurKine 抗體純化NHS-激活樹脂(4%交聯) Abbkine BMR21100 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Heparin Resin 6FF PurKine 肝素樹脂(6%交聯) Abbkine BMR21206 2ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Benzamidine Resin 4FF PurKine 苯甲脒樹脂(4%交聯) Abbkine BMR21306 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Endotoxin Removal Resin PurKine 內毒素清除樹脂 Abbkine BMR21400 5ml/10ml/50ml/100ml 樹脂填料
PurKine Endotoxin Removal Packed Column PurKine 內毒素清除預裝柱 Abbkine BMC21400 1ml×5/3ml×5 預裝柱
PurKine Anti-Flag Resin 4FF PurKine Anti-Flag樹脂(4%交聯) Abbkine BMR21504 1ml/5ml/50ml 樹脂填料
⑵ flag tag是什麼
Flag標簽蛋白
Flag標簽蛋白為編碼8個氨基酸的親水性多肽(DYKDDDDK),同時載體中構建的Kozak序列使得帶有FLAG的融合蛋白在真核表達系統中表達效率更高。 FLAG作為標簽蛋白,其融合表達目的蛋白後具有以下優點:
FLAG作為融合表達標簽,其通常不會與目的蛋白相互作用並且通常不會影響目的蛋白的功能、性質,這樣就有利用研究人員對融合蛋白進行下游研究。
融合FLAG的目的蛋白,可以直接通過FLAG進行親和層析,此層析為非變性純化,可以純化有活性的融合蛋白,並且純化效率高。
FLAG作為標簽蛋白,其可以被抗FLAG的抗體識別,這樣就方便通過Western Blot、ELISA等方法對含有FLAG的融合蛋白進行檢測、鑒定。
融合在N端的FLAG,其可以被腸激酶切除(DDDK),從而得到特異的目的蛋白。因此現FLAG標簽已廣泛的應用於蛋白表達、純化、鑒定、功能研究及其蛋白相互作用等相關領域。
一個什麼公司的產品介紹里的 找不著鏈接了就不貼引用了
說白了就是做表達出來的蛋白的一個標簽
⑶ 游泳池防水怎麼做要用什麼材料
游泳池的儲水量可以說是我們日常所能接觸的事物中最大的,因此其防水級別要求很高。而泳池表面裝飾不僅影響整體外觀,更關系使用者的安全,具有很高的專業性。
普通泳池一般採用普通的民用防水材料,即防水塗料和卷材。普通防水一般只需做1到2遍,而游泳池建造防水需要做3遍才能較長時間保持防水效果。在防水層外,需要用瓷磚作為裝飾面,普通瓷磚在經過長時間的池水浸泡後,會出現脫落破損等現象,所以經常會出現在游泳時身體部位被劃傷的情況,尤其是在瓷磚和混凝土選擇不當的情況下,這種情況就會更為嚴重。
泳池防水裝飾膠膜作為一種根據泳池的使用需求研發的高科技產品,既能高效解決泳池的防水問題,又能同時解決泳池的外觀裝飾問題,歐美國家的新建泳池幾乎已經全部是使用這種材料。
泳池防水裝飾膠膜的選擇直接關繫到泳池是否能正常運營和安全問題,所以需要選擇質量可靠的品牌。六點泳池所有產品均選擇來自義大利的專業泳池產品FLAGPOOL防水裝飾膠膜,在極佳的防水性能基礎上,其出色的質感非其他廉價產品可比。
泳池膠膜顏色的選擇通常建議使用最經典的色系:白色、藍色和馬賽克。白色檔次感高,視覺效果好,適用於會所、酒店等場所;藍色經久耐看,更能襯托水色,適合各類游泳館;馬賽克裝飾效果較好,適合於各種小型泳池,如家庭泳池、兒童泳池。
⑷ flag標簽作用
可以通過基因工程技術手段將所要研究的目的基因和FLAG-tag基因序列連接起來,可以連接在目的蛋白的C端或N端, 然後將整合後的基因轉入細胞中或胚胎幹細胞抑或受精卵中。
後續檢測主要通過FLAG-tag這段肽鏈形成的免疫決定簇與其單克隆抗體的特異性結合來實現。 檢測手段有免疫熒光(immunofluorescence), 免疫印記(Western Blotting)等。
隨著生物技術的發展,科研人員可以通過DNA重組技術,構建包含目的基因以及表位標記的融合蛋白,進而通過特異性標簽抗體對其鑒定與純化,以達到研究的需求。
(4)flag純化樹脂擴展閱讀
FLAG-tag類別:
1、Flag抗體-抗Flag標簽抗體
融合標簽,如Flag、GST等標簽的使用可以簡化蛋白質的純化過程、控制蛋白質固定的空間取向及方便檢測、使體內生物事件可視化、提高重組蛋白質的產量、增強重組蛋白質的可溶性和穩定性等。
2、GST抗體-抗GST標簽抗體
隨著越來越多的新基因的發現,基因融合蛋白表達體系以其在新發現蛋白研究中的顯著優勢已得到廣泛應用。其中GST標簽體系具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便,以及利於GST抗體制備等特點。
3、HA抗體-抗HA標簽抗體
融合標簽,如HA、His等標簽的使用可以簡化蛋白質的純化過程、控制蛋白質固定的空間取向及方便檢測、使體內生物事件可視化、提高重組蛋白質的產量、增強重組蛋白質的可溶性和穩定性等。常用的標簽包括myc、HA、Flag、His、GST等。
⑸ 如何快速了解新接觸的質粒(六)
「 會讀質粒圖譜才能用好質粒。 」
前面介紹了質粒圖譜中復制起點,啟動子,抗性基因和蛋白純化標簽四個元件,在蛋白質檢測過程中常會遇到不好買的目的蛋白抗體,這個時候蛋白檢測標簽的價值就體現了出來。
標簽蛋白質序列DNA編碼序列
GAGATTACAAGGATGACGACGATAAG
GATCGATTACAAGGATGACGACGATAAG
HSVQPELAPEDPED
XpressDLDDDDK/DLYDDDDK
S TagKETAAAKFERQHMDS
SB1PRPSNKRLQQ
ThrombinLVPRGS
Protein CEDQVDPRLIDGK
BADGLNDIFEAQKIEWHE
VSV-GYTDIEMNRLGK
FLAG-Tag
Flag標簽蛋白為編碼8個氨基酸的親水性多肽(DYKDDDDK/Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys),同時載體中構建的Kozak序列(是位於真核生物mRNA 5『端帽子結構後面的一段序列,通常是GCCACCAUGG,它可以與翻譯起始因子結合而介導含有5『端帽子結構的mRNA翻譯起始)簡單點來說,它使得帶有FLAG的融合蛋白在真核表達系統中表達效率更高。
FLAG-Ta中連著的四個天冬氨酸讓整個標簽蛋白具有很好的親水性,其通常不會與目的蛋白相互作用並且通常不會影響目的蛋白的功能、性質,這樣就有利用研究人員對融合蛋白進行下游研究。
FLAG-Tag它本身有免疫原性,可以被抗FLAG的抗體識別,這樣就方便通過Western Blot、ELISA等方法對含有FLAG的融合蛋白進行檢測、鑒定。
FLAG-Tag可以進行親和層析,但是實驗表明FLAG的特異性結合能力沒有His-Tag那麼強,融合蛋白的純度也只能達到90%,因此3xFLAG被設計出來。大多數情況下FLAG標簽會構建到蛋白的N端或者C端,而且大多數情況下蛋白的N端或者C端是游離在蛋白表面的,那麼在這種情況下FLAG和3xFLAG沒有什麼區別,抗體都能結合得到。但是也有時候蛋白末端會被折疊到蛋白內部,或者被其他結合蛋白所遮蔽,那麼更長的FLAG更有利於抗體結合表位的暴露,從而被抗體所結合。
融合在N端的FLAG,其可以被腸激酶切除(DDDK),從而得到特異的目的蛋白。因此現FLAG標簽已廣泛的應用於蛋白表達、純化、鑒定、功能研究及其蛋白相互作用等相關領域。
Myc-Tag
Myc標簽相當於人的c-Myc 410-419位肽段(序列為:EQKLISEEDL),有的說是 408-437(),還有的說C端的(AEEQKLISEEDLL),總之就是410-419附近了。c-Myc基因參與細胞的增殖,多與腫瘤相關,人的c-Myc蛋白分子量在50-70kDa。Myc標簽可放在C端或N端,但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會降低蛋白質的活力,因此Myc標簽系統廣泛應用於檢測但很少用於純化,現在比較常用在鑒定過程中如WB,流式細胞,免疫功沉澱等技術中。
FLAG和Myc雙標簽
HA-Tag
HA(hemagglutinin antigen)標簽蛋白,標簽序列YPYDVPDYA,源於流感病毒的紅細胞凝集素表面抗原決定簇,9個氨基酸,對外源靶蛋白的空間結構影響小, 容易構建成標簽蛋白融合到N端或者C端。易於用Anti-HA抗體檢測和ELISA檢測。
V5-Tag
V5多肽是從猿猴副流感病毒 5(SV5)的 P 蛋白和 V 蛋白中分離得到的第 95~108 位氨基酸殘基組成的多肽。V5 標簽常被融合表達於靶蛋白的 N 末端或者 C 末端,以便對靶蛋白進行分析和鑒定。
HSV-Tag(單純皰疹病毒)
HSV 來源於糖蛋白 D 前體包膜蛋白並且短(QPELAPEDPED),所以它不太可能幹擾蛋白質結構或功能。
VSV-Tag
VSV-G,來源於水泡性口炎病毒的融合性外殼G糖蛋白,常被用於逆轉錄病毒和慢病毒載體的生物醫學研究。VSV-G標簽通常融合於目的蛋白的N-或者C-端,以便使用免疫組化方法來進行觀察和分析。
上面簡單介紹了幾種常見的蛋白標簽,像FLAG-Tag既可以用來檢測又可以用來親和層析純化,有的像V5-Tag常用來WB/FC檢測鑒定。這么多蛋白標簽怎麼選擇比較好呢?
1. 第一步肯定是要確定你融合標簽的目的,蛋白純化首選His-Tag,WB優先選Flag-Tag。
2. 其次蛋白標簽對目的蛋白的影響:標簽可能會干擾蛋白的正確折疊,因此需要考慮添加的標簽是否對目的蛋白的表達有影響。
3. 確定蛋白標簽位置是在N-端還是C-端:根據蛋白結構、定位的特性選擇標簽蛋白標記的具體位置。
上面只是簡單介紹,更多細節還是要根據自己的需求來。
⑹ 帶表位標簽Flag的重組蛋白請問怎麼純化
一般用FLAG標簽抗體偶聯介質或者磁珠進行蛋白的純化。
⑺ 幾種常用的蛋白標簽的功能和優點
重組蛋白表達技術現已經廣泛應用於生物學各個具體領域。特別是體內功能研究和蛋白質的大規模生產都需要應用重組蛋白表達載體。上周小知了給大家簡單介紹了大腸桿菌原核表達的整體思路,這里給大家簡要介紹幾個常用的蛋白標簽及其功能和優點。
GST(谷胱甘肽巰基轉移酶) 標簽蛋白本身是一個在解毒過程中起到重要作用的轉移酶,它的天然大小為26KD。將它應用在原核表達的原因大致有兩個,一是因為它是一個高度可溶的蛋白,希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性;另一個是它可以在大腸桿菌中大量表達,起到提高表達量的作用。
GST融合表達系統廣泛應用於各種融合蛋白的表達,可以在大腸桿菌和酵母菌等宿主細胞中表達。結合的融合蛋白在非變性條件下用10mM 還原型谷胱甘肽洗脫。
在大多數情況下,融合蛋白在水溶液中是可溶的,並形成二體。GST標簽可用酶學分析或免疫分析很方便的檢測。標簽有助於保護重組蛋白免受胞外蛋白酶的降解並提高其穩定性。在大多數情況下GST融合蛋白是完全或部分可溶的。
純化:該表達系統表達的GST標簽蛋白可直接從細菌裂解液中利用含有還原型谷胱甘肽瓊脂糖凝膠(Glutathionesepharose)親和樹脂進行純化。GST標簽蛋白可在溫和、非變性條件下洗脫,因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。GST在變性條件下會失去對谷胱甘肽樹脂的結合能力,因此不能在純化緩沖液中加入強變性劑如:鹽酸胍或尿素等。
如果要去除GST融合部分,可用位點特異性蛋白酶切除。
檢測:可用GST抗體或表達的目的蛋白特異性抗體檢測。
6×His是指六個組氨酸殘基組成的融合標簽,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當某一個標簽的使用,一是能構成表位利於純化和檢測;二是構成獨特的結構特徵(結合配體)利於純化。組氨酸殘基側鏈與固態的鎳有強烈的吸引力,可用於固定化金屬螯合層析(IMAC),對重組蛋白進行分離純化。
使用His-tag有以下幾個優點:
1.標簽的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分別為~26KD和~30KD,一般不影響目標蛋白的功能;
2.His標簽融合蛋白可以在非離子型表面活性劑存在的條件下或變性條件下純化,前者在純化疏水性強的蛋白得到應用,後者在純化包涵體蛋白時特別有用,用高濃度的變性劑溶解後通過金屬螯和親和層析去除雜蛋白,使復性不受其它蛋白的干擾,或進行金屬螯和親和層析復性;
3.His標簽融合蛋白也被用於蛋白質-蛋白質、蛋白質-DNA相互作用研究;
4.His標簽免疫原性相對較低,可將純化的蛋白直接注射動物進行免疫制備抗體;
5.可應用於多種表達系統,純化的條件溫和;
6.可以和其它的親和標簽一起構建雙親和標簽。
MBP(麥芽糖結合蛋白)標簽蛋白大小為40kDa,由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBP標簽可通過免疫分析很方便地檢測。有必要用位點專一的蛋白酶切割標簽。如果蛋白在細菌中表達,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。
純化:融合蛋白可通過交聯澱粉親和層析一步純化。結合的融合蛋白可用10mM麥芽糖在生理緩沖液中進行洗脫。結合親和力在微摩爾范圍。一些融合蛋白在0.2% Triton X-100或0.25% Tween 20存在下不能有效結合,而其他融合蛋白則不受影響。 緩沖條件為pH7.0到8.5,鹽濃度可高達1M,但不能使用變性劑。如果要去除MBP融合部分,可用位點特異性蛋白酶切除。
檢測:可用MBP抗體或表達的目的蛋白特異性抗體檢測。
Flag標簽蛋白為編碼8個氨基酸的親水性多肽(DYKDDDDK),同時載體中構建的Kozak序列使得帶有FLAG的融合蛋白在真核表達系統中表達效率更高。
使用Flag標簽的優點:
FLAG作為標簽蛋白,其融合表達目的蛋白後具有以下優點:
1.FLAG作為融合表達標簽,其通常不會與目的蛋白相互作用並且通常不會影響目的蛋白的功能、性質,這樣就有利用研究人員對融合蛋白進行下游研究。
2.融合FLAG的目的蛋白,可以直接通過FLAG進行親和層析,此層析為非變性純化,可以純化有活性的融合蛋白,並且純化效率高。
3.FLAG作為標簽蛋白,其可以被抗FLAG的抗體識別,這樣就方便通過Western Blot、ELISA等方法對含有FLAG的融合蛋白進行檢測、鑒定。
4.融合在N端的FLAG,其可以被腸激酶切除(DDDK),從而得到特異的目的蛋白。因此現FLAG標簽已廣泛的應用於蛋白表達、純化、鑒定、功能研究及其蛋白相互作用等相關領域。
SUMO標簽蛋白是一種小分子泛素樣修飾蛋白(Small ubiquitin-likemodifier),是泛素(ubiquitin)類多肽鏈超家族的重要成員之一。
在一級結構上,SUMO與泛素只有18%的同源性,然而兩者的三級結構及其生物學功能卻十分相似。研究發現SUMO可以作為重組蛋白表達的融合標簽和分子伴侶,不但可以進一步提高融合蛋白的表達量,且具有抗蛋白酶水解以及促進靶蛋白正確折疊,提高重組蛋白可溶性等功能。
此外SUMO還有一項重要的應用,就是可用於完整地切除標簽蛋白,得到天然蛋白。因為SUMO蛋白水解酶能識別完整的SUMO標簽蛋白序列,並能高效地把SUMO從融合蛋白上切割下來。切除SUMO後,經過親和層析,去除標簽蛋白部分,就得到和天然蛋白一樣的重組蛋白。所以SUMO標簽也常用於和其他標簽一起應用,作為特異酶切水解位點。
C-Myc標簽蛋白,是一個含11個氨基酸的小標簽,標簽序列Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu,這11個氨基酸作為抗原表位表達在不同的蛋白質框架中仍可識別其相應抗體。C-Myc tag已成功應用在 Western-blot雜交技術、免疫沉澱和流式細胞計量術中, 可用於檢測重組蛋白質在靶細胞中的表達。
分別是增強型綠色熒光蛋白/增強型黃綠色熒光蛋白/增強型黃綠色熒光蛋白/單體紅色熒光蛋白,具有不同的激發波長發射波長為,均由野生型熒光蛋白通過氨基酸突變和密碼子優化而來。
就eGFP而言,相對於GFP,其熒光強度更強、熒光性質更穩定。同時載體中構建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表達系統中表達效率更高。
mCherry是從DsRed演化來的性能最好的一個單體紅色熒光蛋白,可以和GFP系列熒光蛋白共用,實現多色標記體內、外實驗表明,mCherry在N端和C端融合外源蛋白時,熒光蛋白活性和被融合的目標蛋白功能相互沒有明顯影響。
蛋白標簽是指與目的蛋白一起融合表達的一種多肽或者蛋白,以便於目的蛋白的表達、檢測、示蹤和純化等。隨著技術的不斷發展,研究人員相繼開發出了具有各種不同功能的蛋白標簽。我們在選用不同標簽時要搞清楚自己的需求,靈活運用各個標簽。
⑻ Flag磁珠轉3小時夠用嗎
夠。
Flag磁珠,也稱Anti-Flag免疫磁珠或Flag抗體磁珠,是由高品質的Flag小鼠單克隆抗體與納米級氨基磁珠共價偶聯而成,可特異性地與動植物或微生物裂解液、血清、腹水等中含有Flag標簽的蛋白結合,從而用於帶有Flag標簽的融合蛋白或其蛋白復合物的免疫沉澱(Immunoprecipitation,IP)、免疫共沉澱(Co-IP)或純化,效果非常好,所以轉3個小時夠用了。