724樹脂洗脫

『壹』 離子交換樹脂的洗脫順序和什麼有關

和樹脂的親和力有關，主要是靜電吸引，其次是疏水作用。

樹脂的交聯度，即樹脂基體版聚合時所用二權乙烯苯的百分數，對樹脂的性質有很大影響。通常，交聯度高的樹脂聚合得比較緊密，堅牢而耐用，密度較高，內部空隙較少，對離子的選擇性較強。

而交聯度低的樹脂孔隙較大，脫色能力較強，反應速度較快，但在工作時的膨脹性較大，機械強度稍低，比較脆而易碎。

(1)724樹脂洗脫擴展閱讀：

大孔樹脂內部的孔隙又多又大，表面積很大，活性中心多，離子擴散速度快，離子交換速度也快很多，約比凝膠型樹脂快約十倍。使用時的作用快、效率高，所需處理時間縮短。

大孔樹脂還有多種優點耐溶脹，不易碎裂，耐氧化，耐磨損，耐熱及耐溫度變化，以及對有機大分子物質較易吸附和交換，因而抗污染力強，並較容易再生。

交聯度高的樹脂對離子的選擇性較強，大孔結構樹脂的選擇性小於凝膠型樹脂。這種選擇性在稀溶液中較大，在濃溶液中較小。

『貳』 最耐熱的蛋白質是什麼

科技名詞定義

中文名稱：

溶菌酶

英文名稱：

lysozyme

其他名稱：

胞壁酸酶(muramidase)

定義：

編號：EC 3.2.1.17。存在於卵清、唾液等生物分泌液中，催化細菌細胞壁肽聚糖N-乙醯氨基葡糖與N-乙醯胞壁酸之間的1，4-β-糖苷鍵水解的酶。

應用學科：

生物化學與分子生物學（一級學科）；酶（二級學科）

溶菌酶（lysozyme）又稱胞壁質酶（muramidase）或N-乙醯胞壁質聚糖水解酶（N-acetylmuramide glycanohydrlase），是一種能水解致病菌中黏多糖的鹼性酶。主要通過破壞細胞壁中的N-乙醯胞壁酸和N-乙醯氨基葡糖之間的β-1,4糖苷鍵，使細胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，導致細胞壁破裂內容物逸出而使細菌溶解。溶菌酶還可與帶負電荷的病毒蛋白直接結合，與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復鹽，使病毒失活。因此，該酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。

中文名稱：溶菌酶

中文同義詞：脆壁質酶；雞蛋白；胞壁質酶(N-乙醯胞壁質聚糖水解酶);溶菌酶(雞蛋清)

英文名稱：Lysozyme,簡稱LZM

英文同義詞：REDUCED LYSOZYME,WATER SOLUBLE;MUCOPEPTIDE-GLYCOHYDROLASE;MUCOPEPTIDE GLYCOLHYDROLASE;MUCOPEPTIDE N-ACETYLMURAMOYLHYDROLASE;MUCOPEPTIDE N-ACETYLMURAMOYLHYDROLASE GRADE III;MUCOPEPTIDE N-ACETYLMURAMOYLHYDROLASE GRADE VI: CHLORIDE;MURAMIDASE;MURAMIDASE GRADE III[1]

CAS號：12650-88-3

EINECS號： 235-747-3[2]

分子式：無

分子量：14000左右

EINECS號：235-747-3

相關類別：發酵劑；Enzymes;酶；生化試劑；生物化學品。

分子結構圖：

性質

儲存條件：2-8°C

form：powder

color：white

危險品標志B

安全說明23-24/25-22

WGK Germany3

RTECS號 OL5989850

F3-10

白色或微白色凍乾粉，溶於水，不溶於乙醚和丙酮，pI為11.0-11.35，最適pH值6.5。

穩定性：酸性介質中可穩定存在，鹼性介質中易失活；96℃， pH值為3條件下，15min後活力保持87%。

抑制劑：有碘、咪唑和吲哚衍生物、表面活性劑(十二烷基硫酸鈉、醇類和碳鏈不少於12的脂肪酸)。1%水溶液在281.5nm處的吸光系數為26.4。通過水解細菌細胞壁的肽聚糖來溶菌。

酶反應：Micrococcus luteus或Micrococcus lysodeikticus菌懸浮液═溶菌並澄清。

用途：用於生化研究，臨床上用於急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的治療。

編輯本段生產

以蛋清為原料，在pH6.5條件下用弱酸性陽離子交換樹脂732吸附後，再用硫酸銨洗脫，經透析後冷凍乾燥得產品。

編輯本段制備

溶菌酶是採用生物工程技術進行克隆、提取而製取,它是一種天然酶，安全綠色的添加劑，無抗葯性。

該酶廣泛存在於人體多種組織中，鳥類和家禽的蛋清、哺乳動物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個氨基酸殘基構成的單一肽鏈。它富含鹼性氨基酸，有4對二硫鍵維持酶構型，是一種鹼性蛋白質，其N端為賴氨酸，C端為亮氨酸。可分解溶壁微球菌、巨大芽孢桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽性菌。

溶菌酶在等電點以下較廣泛的pH值范圍內，分子帶正電荷，可吸附於弱酸性陽離子交換樹脂上，洗脫後鹽析，可得溶菌酶沉澱，再進行精製可得成品。蛋清吸附↓724樹脂洗滌↓緩沖液洗脫↓硫酸銨溶液鹽析透析去鹼性蛋白↓NaOH凍干溶菌酶凍乾粉沉澱乾燥溶菌酶在5～10℃下，將新鮮蛋清540kg加入到已處理好的80kg 724樹脂中，攪拌吸附6h，在0～5℃靜置過夜。傾出上層蛋清，樹脂離心甩干，用蒸餾水反復洗去黏附的卵蛋白，然後將樹脂裝入柱內，用0?15mol/L、pH=6?5磷酸緩沖溶液約150L洗滌樹脂，再用約600L的10%硫酸銨溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液中加硫酸銨，使最終含硫酸銨量為40%，有白色沉澱生成，冷處放置過夜。虹吸上層清液，沉澱吸濾抽干，再用1倍蒸餾水溶解沉澱呈稀糊狀，然後裝入透析袋，在約5℃的條件下，對蒸餾水透析24h左右，中間換水2～3次。離心去除沉澱，沉澱再用少量水洗一次，洗液與離心液合並。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氫氧化鈉溶液，同時不斷攪拌，使pH值上升到8?0～9?0，如有白色沉澱，即離心除去。然後用3mol/L鹽酸調pH=5?0，冷凍乾燥，即得白色片狀溶菌酶。也可將離心液用3mol/L鹽酸調pH=3?5，在攪拌下緩慢加入5%的固體氯化鈉，在約5℃的溫度下靜置48h，離心，沉澱用0℃丙酮洗滌，乾燥，即得溶菌酶。

編輯本段優點

1．溶菌酶是很穩定的蛋白質，有較強的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型，是已知的最耐熱的酶；

2．溶菌酶不會因為有機溶劑的處理而失活，當轉移到水溶液中時，溶菌酶的活力可全部恢復；

3．溶菌酶可被冷凍或乾燥處理，且活力穩定；

4．溶菌酶適宜pH5.3~6.4，可用於低酸性食品防腐；

5．溶菌酶生產成本較低；

6．溶菌酶的抗菌譜較廣，不僅局限於G+ 菌，對部分G­ 菌也有抑制效果；

7．溶菌酶作為防腐劑安全性高。溶菌酶是一種天然蛋白質，1992年FAO/WTO 的食品添加劑協會已經認定溶菌酶在食品中應用是安全的。

編輯本段應用

醫學應用

可作為一種具有殺菌作用的天然抗感染物質。有抗菌、抗病毒、止血、消腫止痛及加快組織恢復功能等作用。臨床用於慢性鼻炎、急慢性咽喉炎、口腔潰瘍、水痘、帶狀皰疹和扁平疣等。也可與抗菌葯物合用治療各種細菌和病毒感染。口服和肌注均有效。口服，3～5片/次(腸溶片含10mg)，3次/日。口含，1片/次(口含片含20mg)，4～6次/日。外用：以1%～2%溶液滴注、塗擦或直接噴粉。肌注，50mg～100mg/次，1～2次/日。滴眼：用2%溶液。

副作用

偶有較輕的過敏反應。氯化溶菌酶醫療效果更廣，有濃痰分散、出血抑制、組織修復、消炎鎮痛、抗過濾性病毒等作用，因而用氯化溶菌酶的制葯有消炎消痔、治感冒、皮膚病及眼、鼻、喉等用葯.

食品應用

可作為防腐劑，它的主要功用是水解細菌細胞壁，在細胞內，則對吞噬後的病原菌起破壞作用.該酶對革蘭氏陽性菌中的枯草桿菌、耐輻射微球菌有分解作用。對大腸桿菌、普通變形菌和副溶血性弧菌等革蘭氏陰性菌也有一定程度溶解作用，其最有效濃度為0.05%。與植酸、聚合磷酸鹽、甘氨酸等配合使用，可提高其防腐效果。

應用領域

1． 溶菌酶是一種無毒、無副作用的蛋白質，又具有一定的溶菌作用，因此可用作天然的食品防腐劑。現已廣泛應用於水產品、肉食品、蛋糕、清酒、料酒及飲料中的防腐；還可以添入乳粉中，使牛乳人乳化，以抑制腸道中腐敗微生物的生存，同時直接或間接地促進腸道中雙歧桿菌的增殖。

2． 溶菌酶作為一種存在於人體正常體液及組織中的非特異性免疫因素，具有多種葯理作用，它具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤的功效，目前醫用溶菌酶其適應症為出血、血尿、血痰和鼻炎等。

3． 溶菌酶具有破壞細菌細胞壁結構的功能，以此酶處理G+細菌得到原生質體，因此，溶菌酶是基因工程、細胞工程中細胞融合操作必不可少的工具酶。

編輯本段機理

溶菌酶能有效地水解細菌細胞壁的肽聚糖，其水解位點是N-乙醯胞壁酸(NAM)的1位碳原子和N-乙醯葡萄糖胺(NAG)的4位碳原子間的β-1.4糖苷鍵。肽聚糖是細菌細胞壁的主要成份，它是由NAM、NAG和肽「尾」(一般是4個氨基酸)組成，NAM與NAG通過β-1.4糖苷鍵相連，肽「尾」則是通過D-乳醯羧基連在NAM的第3位碳原子上，肽尾之間通過肽「橋」(肽鍵或少數幾個氨基酸)連接，NAM、NAG、肽「尾」與肽「橋」共同組成了肽聚糖的多層網狀結構，作為細胞壁的骨架，上述結構中的任何化學鍵斷裂，皆能導致細菌細胞壁的損傷。對於革蘭氏陽性菌（G+），如藤黃微球菌、枯草桿菌或溶壁微球菌等，與革蘭氏陰性菌(G-)，如大腸桿菌、變形桿菌、痢疾桿菌、肺炎桿菌等，其細胞壁中肽聚糖含量不同，G+細菌細胞壁幾乎全部由肽聚糖組成，而G-細菌只有內壁層為肽聚糖，因此，溶菌酶對於破壞G+細菌的細胞壁較G-細菌強。

編輯本段使用

雞蛋清溶菌酶作為溶菌酶類的典型代表，是一種穩定的蛋白質，其最適pH為4-6.5，最適溫度為35℃，酶的最適添加量必須按照具體生產情況而定。

編輯本段儲存

建議在陰涼乾燥的環境下避光保存，儲存溫度：零度以下。

貯藏過久或貯藏條件不利，會使酶活不同程度的降低；如溫度濕度過高，則需要在使用時適當的增加使用量。

編輯本段舉例

尿液中含量

尿溶菌酶原理

溶菌酶來自單核細胞、中性粒細胞，是一種能溶解某些細菌的酶類。可酵解革蘭陽性球菌壁上的乙醯氨基多糖成分，使細胞壁破裂。其分子量為14000萬～15000，可從腎小球基底膜濾出，90%以上可被腎小管重吸收，所以尿液中很少或無溶菌酶。用一種細菌懸液作為基質，加入待測標本後保溫一定時間，如標本中含溶菌酶，則細菌被溶解，細菌懸液濁度下降或變清，可用光電比濁法測其濁度變化，或用平皿法測定其溶菌圈的大小。

尿溶菌酶參考值

尿液中濃度為0～2mg/L。

臨床意義

①腎小管疾病：如炎症、中毒時，因腎小管損害，重吸收減少，尿溶菌酶升高；

②判斷預後：急性腎小管壞死時，尿溶菌酶升高，若逐漸升高並持續不下降，小管功能恢復較差。慢性腎炎、慢性腎衰竭時，尿溶菌酶也升高；

③急性單核細胞白血病時，血清溶菌酶含量增加，超過腎小管重吸收的能力，尿內溶菌酶可升高。[3]

『叄』 尿激酶的製造方法

尿激酶系70年代發展的治療血栓疾病的新葯，是此類葯物中安全度 大和療效好的品種，國外僅有少數國家有生產。其生產方法一般採用塑料桶收集新鮮男性尿液後迅速冷卻，成桶運回工廠進行分離、提純，製得高純度靜脈用制劑。此方法操作繁雜，耗費人力，設備要求高，收率低，葯價十分昂貴。為了填補國內空白，尋找一個從人尿中簡便而低成本的制備高純度尿激酶的工業生產方法，上海醫葯工業研究院於 1974年開始進行了本課題的研究。 在研究中創造了尿激酶連續自動吸附裝置，並研究選用了國產724樹脂作吸附劑和特定的吸附洗脫條件。可在公共廁所就地吸附，避免了收集尿源的繁雜過程。研究成功高純度尿激酶製取新工藝中發現了一種文獻中從未報導過的尿激酶復合物，找出了該復合物的解離方法，從而，使尿激酶總收率提高到50%以上。高分子量尿激酶含量在90% 以上，總收率超過25%，純度35000～50000單位/毫克蛋白。高鹽濃度過濾除菌法突 破了國外嚴格保密的技術關鍵，尿激酶回收達100%。解決了尿激酶穩定性制劑的配方， 達到國外同類產品的水平。臨床使用於各種血栓症，總有效率達70%，與國外報導的 相似。 尿激酶的研究成功，填補了我國的空白，為我國心腦血管疾病提供了一個療效確切 的新葯。生產工藝簡便，效率高，成本低。鑒定意見:上海醫工院創制的以國產724樹脂為吸附劑的新工藝，既可以成桶收 尿吸附，又可以採用自行設計研製成功的連續式吸附裝置在大中型公共廁所中就地提取 尿激酶，每噸小便可提得尿激酶300萬單位。該裝置具有收尿方便，有益於產品質量，大 大節約了勞動力，設備簡單，成本低廉的特點；並能採用國產DEAE纖維素與724樹 脂進行精製提純。該工藝經中試證明是可行的，收率達30%以上，質量達國外同類產品 水平，純度在臨床階段為1.5萬國際單位/毫克蛋白，後經研究達3.5萬國際單位/毫克 蛋白。

『肆』 724離子交換樹脂(陰性)

724離子交換樹脂(陰性)是溶菌酶提取專用樹脂，乳白色，價格貴，目前很少有廠家生產，一般用D155代替.

『伍』 在溶菌酶的粗提取實驗中，為什麼將蛋清緩沖液PH調到4.7後又調到8.0急急急急！

因為卵清蛋白的等電點是4.7，為了提純溶菌酶，要將卵清蛋白沉澱，所以要把PH調到4.7，至於8.0，這是溶菌酶的最適PH值。

提取溶菌酶的方法：
樹脂預處理：干樹脂清水浸泡，使其充分膨脹並除去細小顆粒和較大雜質； 1 mol/L 的HCl浸泡2 h，去離子水洗3次至至近中性；抽濾收集樹脂,1 mol/L 的NaOH溶液浸泡2 h，去離子水洗3次至近中性；抽濾收集樹脂,加0.15 mol/L、pH 值為6．5的磷酸緩沖液平衡過夜待用。
蛋清制備：將3個新鮮雞蛋洗凈乾燥，小端敲一個小洞，大端打一個小孔進氣，分離得雞蛋清，用1 mol/L HCl調節PH到7。過濾前稱量燒杯重48.7g，緩慢攪拌用滅菌的兩層紗布過濾除去臍帶塊和碎蛋殼等，蛋清與燒杯總重207.5g，蛋清凈重158.8g。用1 mol/L 的HCl 溶液調pH 值至7.0，量蛋清體積為100 ml。在調節PH時蛋清中出現少量白色沉澱，可能為部分蛋白由於局部過酸而變性。
吸附：蛋清在不斷攪拌下加入抽濾好的724樹脂25g（相當蛋清四分之一體積的樹脂），冰水浴中磁力攪拌器緩慢攪拌（使樹脂全部懸浮在雞蛋清中，攪拌不能起泡）吸附2.5 h，4℃靜置1.5h。然後3000r/min離心15min分層，收集樹脂，回收蛋清（留樣A）。
去除雜蛋白：收集樹脂用去離子水振盪水洗直至洗液澄清（至無白沫為止），吸管輕吸去洗液，以去除雜蛋白。（每洗1次，離心1次，總共3次）冰浴中用等體積的0.15mol/L、pH =6.5的磷酸緩沖液攪拌洗滌15min，抽濾，重復洗三次，注意防止樹脂流失。最後一次抽濾濾除樹脂水分至乾燥。
洗脫溶菌酶：樹脂中加入35ml（等體積）的10％（NH4）2SO4溶液攪拌洗脫30 min，抽濾,使溶菌酶從樹脂上洗脫下來，重復兩次，合並收集洗脫液（留樣），洗脫液過濾後，准確量取體積100ml。（留樣B）
鹽析:每83mL洗脫液加32g磨細的固體（NH4）2SO4，本實驗中總量為38.55g。緩慢加入（NH4）2SO4攪拌待完全溶解後保鮮膜封口，置於4℃冰箱鹽析過夜。
透析:待白色沉澱析出，3000r/min離心15 min，收集沉澱，用去離子水將沉澱洗下並全部溶解（4.5ml去離子水），裝於透析袋中，於去離子水中透析（冰浴），期間2次更換去離子水，直至用BaCl2檢測透析完全。透析裝置中加入磁子，於磁力攪拌器中攪拌加快透析速度。
去雜質蛋白：取出透析袋中的透析液，用0.1mol/L HCl調整pH4.6，產生少量白色沉澱（留樣D），可能為雜蛋白。3000r/min離心10min，收集上清液（留樣C 20ul）。
濃縮：用PEG-20000濃縮上清液至1.5ml（留樣E，20ul，加loading buffer,出現黃色（可能為濃縮時透析袋中滲入了PEG-20000）。[5][6]

『陸』 724陰性離子交換樹脂

724樹脂屬於來國家上海源老型號
不是國外的
所以羅門哈斯沒有724型號

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『柒』 怎樣清洗樹脂，用什麼清洗

用香皂清水清洗

『捌』 西安陶氏樹脂的預處理與再生是指什麼

陶氏樹脂的預處理：
新樹脂送入交換器前，必須對其進行預處理。這是因為新樹脂中常含有版少量的沒有聚合好權的低聚合物和未參加聚合反應的物質，當樹脂與水、酸、鹼或其它溶液接觸時，上述物質就會轉入溶液中影響出水水質，除了這些有機物外，還可能含有鐵、銅及鉛等無機雜質，因此新樹脂在使用前應進行預處理，除去樹脂中的可溶性雜質。同時經過預處理，不僅可以提高樹脂穩定性，還可以起到活化樹脂，提高其工作交換容量的作用。

陶氏樹脂再生：
樹脂再生是離子交換水處理中很重要的一環。影響再生效果的因素很多，如再生方式，再生劑的種類、純度、用量，再生液的濃度、流速、溫度等。要取得好的再生效果，必須進行調整試驗，確定最優的再生條件。

『玖』 溶菌酶的制備

溶菌酶是採用生物工程技術進行克隆、提取而製取,它是一種天然酶，安全綠色的添加劑，無抗葯性。
該酶廣泛存在於人體多種組織中，鳥類和家禽的蛋清、哺乳動物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個氨基酸殘基構成的單一肽鏈。它富含鹼性氨基酸，有4對二硫鍵維持酶構型，是一種鹼性蛋白質，其N端為賴氨酸，C端為亮氨酸。可分解溶壁微球菌、巨大芽孢桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽性菌。
溶菌酶在等電點以下較廣泛的pH值范圍內，分子帶正電荷，可吸附於弱酸性陽離子交換樹脂上，洗脫後鹽析，可得溶菌酶沉澱，再進行精製可得成品。蛋清吸附↓724樹脂洗滌↓緩沖液洗脫↓硫酸銨溶液鹽析透析去鹼性蛋白↓NaOH凍干溶菌酶凍乾粉沉澱乾燥溶菌酶在5～10℃下，將新鮮蛋清540kg加入到已處理好的80kg 724樹脂中，攪拌吸附6h，在0～5℃靜置過夜。傾出上層蛋清，樹脂離心甩干，用蒸餾水反復洗去黏附的卵蛋白，然後將樹脂裝入柱內，用0?15mol/L、pH=6?5磷酸緩沖溶液約150L洗滌樹脂，再用約600L的10%硫酸銨溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液中加硫酸銨，使最終含硫酸銨量為40%，有白色沉澱生成，冷處放置過夜。虹吸上層清液，沉澱吸濾抽干，再用1倍蒸餾水溶解沉澱呈稀糊狀，然後裝入透析袋，在約5℃的條件下，對蒸餾水透析24h左右，中間換水2～3次。離心去除沉澱，沉澱再用少量水洗一次，洗液與離心液合並。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氫氧化鈉溶液，同時不斷攪拌，使pH值上升到8?0～9?0，如有白色沉澱，即離心除去。然後用3mol/L鹽酸調pH=5?0，冷凍乾燥，即得白色片狀溶菌酶。也可將離心液用3mol/L鹽酸調pH=3?5，在攪拌下緩慢加入5%的固體氯化鈉，在約5℃的溫度下靜置48h，離心，沉澱用0℃丙酮洗滌，乾燥，即得溶菌酶。

『拾』 724樹脂分離純化溶菌酶的原理

溶菌酶分離純化原理: 等電點法利用溶菌酶等電點較高,在酸性條件下除去一些雜蛋白，陽離子樹脂柱層析法進一步除去雜蛋白。