大孔樹脂屬於哪類色譜法

『壹』 硅膠、大孔吸附樹脂、反相硅膠柱層析、聚醯胺、SephadexL H-20、Sephadex G—100這些分離材料的分離原理

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H-20、Sephadex
G—100這些分離材料的分離原理

『貳』 色譜分離技術的色譜種類

色譜有多種，按固定相類型和分離原理可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、親和色譜、大孔吸附樹脂、凝膠色譜、聚焦色譜等。最常用的是吸附色譜分離技術。
吸附色譜法是指混合物隨流動相通過吸附劑（固定相）時，由於吸附劑對不同物質具有不同的吸附力而使混合物中各組分分離的方法。此法特別適用於脂溶性成分的分離。被分離的物質與吸附劑、洗脫劑共同構成吸附層析的三要素，彼此緊密相連。

『叄』 大孔樹脂的分類

大孔吸附樹脂按其極性大小和所選用的單體分子結構不同，可分為非極性、中極回性和極性三類答。
極性大孔吸附樹脂是指含醯胺基、氰基、酚羥基等含氮、氧、硫極性功能基的吸附樹脂，它們通過靜電相互作用吸附極性物質，如丙烯醯胺。

『肆』 大孔樹脂的預處理

大孔吸附樹脂是一類有機單體加交聯劑、致孔劑、分散劑等添加劑聚合而成,
因而購來的樹脂要除去可能存在的毒性有機殘留物。具體方法為,首先使用飽和食鹽水（工業用）,用量約等於被處理樹脂的2 倍,將樹脂置於食鹽中浸泡18～20 h ,然後放盡食鹽水,用清水漂洗凈,使排出的水不顯黃色,再用2 %～4 %氫氧化鈉(或5 %鹽酸) 溶液(其量與上同) 浸泡2～4h(或小流量清洗) ,放盡鹼或酸液後沖洗樹脂直至水接近中性待用。實驗室用常用>95%的乙醇。 以乙醇濕法裝柱，繼續用乙醇在柱上流動清洗，不時檢查流出的乙醇，至與水混合不呈白色混濁為止(取1 mL乙醇液加5 mL水)。然後以大量的蒸餾水洗去乙醇，備用。少量乙醇存在將會大大降低樹脂的吸附力。
3. 再生樹脂柱經反復使用後,樹脂表面及內部殘留許多非吸附性成分或雜質使柱顏色變深,柱效降低,因而需要再生,一般用95 %乙醇洗至無色後用大量水洗去醇化即可。如樹脂顏色變深可用稀酸或稀鹼洗脫後水洗。如柱上方有懸浮物可用水、醇從柱下進行反洗可將懸浮物洗出,經多次使用有時柱床擠壓過緊或樹脂顆粒破碎影響流速,可從柱中取出樹脂,盛於一較大容器中用水漂洗除去小顆粒或懸浮物再重新裝柱使用。
將樣品溶於少量水中加至柱的上端，也可以將樣品先溶於少量乙醇中，拌入適量樹脂，揮去乙醇後，再將拌有樣品的樹脂加到柱上。先用水，繼而以乙醇-水洗脫，逐步加大醇的濃度，同時配合高效液相色譜法作指導。一般用95%的乙醇洗脫至無色時，樹脂柱即已再生，然後以大量水洗去醇，即可進行下一次的提取分離。經反復使用後，吸附樹脂顏色變深，吸附效果下降時，可用0.01%～1 mol/L NaOH(或HCl)洗滌或浸泡適當時間，至樹脂接近原顏色為宜，繼用蒸餾水洗至中性即可再用。如果柱上方沉積有懸浮物，影響流速，可用水從柱上進行反洗，以便把懸浮物頂出。經多次使用後，有時柱床擠壓過緊，或樹脂顆粒部分破碎而影響流速，可從柱中取出樹脂，盛於一個較大容器中用水漂洗除去小顆粒和懸浮雜質，再重新裝柱。大孔吸附樹脂應濕態保存，若部分顆粒暴露在空氣中失水，在進行水溶性雜質分離時，失水後被空氣填充的顆粒會浮於水面，此時將上浮樹脂用乙醇處理，將樹脂內部的空氣排出後使用。

『伍』 離子交換色譜的原理以及陰陽離子交換樹脂的特性

離子交換樹脂的結構：

離子交換樹脂主要由高分子骨架和活性基團兩部分組成，高分子骨架是惰性的網狀結構骨架，是不溶於酸或鹼的高分子物質，常用的離子交換樹脂是由苯乙烯和二乙烯苯聚合得到樹脂的骨架。

而活性基團不能自由移動的官能團離子和可以自由移動的可交換離子兩部分組成，可交換離子能夠決定樹脂所吸附的離子，比如可交換離子為H型陽離子交換樹脂，那麼這個樹脂能夠吸附的離子，就是H型陽離子，而官能團離子能夠決定樹脂的「酸"、「鹼"性和交換能力的強弱，比如官能團離子是強酸性離子，那麼樹脂就是強酸性離子交換樹脂。

離子交換樹脂的內部結構：

1.凝膠型樹脂是由純單體混合物經縮合或聚合而成的，結構為微孔狀，合成的工藝比較簡單，孔徑大概在1-2nm左右，凝膠型樹脂的操作容量高，產水量高，物理強度好，且再生效率高，被廣泛應用在食品飲料加工，超純水制備，飲用水過濾，硬水軟化，製糖業，制葯等領域。

2.大孔型樹脂的孔徑一般在10nm左右，在樹脂中孔徑是比較大的，所以被稱為大孔型樹脂，且孔徑不會隨著周圍的環境而變化，能夠彌補凝膠型樹脂不能在非水系統中使用的缺點，吸附能力非常強大，不易碎裂，耐氧化好，操作容量高，能夠應用在醫葯領域、除重金屬污染、葯品純化、水處理中除去碳酸硬度、冷凝水精處理等領域。

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『陸』 2021年執業葯師《中葯一》備考練習題(4)

中葯化學成分

最佳選擇題

1[.單選題]含有大量澱粉、樹膠、果膠、黏液質的中葯適用的提取方法是()。

A.浸漬法

B.水蒸氣蒸餾法

C.煎煮法

D.迴流提取法

E.連續迴流提取法

[答案]A

[解析]浸漬法是在常溫或溫熱(60℃~80℃)條件下用適當的溶劑浸漬葯材以溶出其中有效成分的方法(通常為冷浸法)。本法適用於有效成分遇熱不穩定的或含大量澱粉、樹膠、果膠、黏液質的中葯提取。

2[.單選題]關於滲漉法特點的敘述，正確的是()。

A.常濕或溫熱提取，適用於有效成分遇熱不穩定或含大量澱粉、樹膠、果膠、黏液質的中葯

B.常溫下不斷向粉碎的葯材中添加新鮮溶劑，消耗溶劑量大、費時

C.加水煮沸，簡便，但含揮發性成分或有效成分遇熱易分解的中葯材不適用

D.用易揮發有機溶劑加熱迴流提取，缺點是對熱不穩定成分不適用，溶劑消耗量大

E.實驗室常用索氏提取器操作，優點是節省溶劑，操作簡單，缺點是耗時較長

[答案]B

[解析]滲漉法是不斷向粉碎的中葯材中添加新鮮浸出溶劑，使其滲過葯材，從滲漉筒下端出口流出浸出液的一種方法。該法缺點是消耗溶劑量大、費時長操作比較麻煩。故選B。其他選項中，A選項前半部分有誤，滲漉法一般均為室溫操作;C選項為煎煮法的特點，D選項為迴流法的特點;E選項為連續迴流法的特點。

3[.單選題]水蒸氣蒸餾法主要用於提取()。

A.揮發油

B.黃酮苷

C.強心苷

D.糖類

E.生物鹼

[答案]A

[解析]水蒸氣蒸餾法適用於具有揮發性的、能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞，且難溶或不溶於水的化學成分的提取。在中葯化學成分類型中，主要適用於揮發油的提取。

4[.單選題]目前最常用的超臨界流體是()。

A.二氧化碳

B.乙烷

C.庚烷

D.一氧化二氮

E.六氟化硫

[答案]A

[解析]已知可作為超臨界流體的物質很多，如二氧化碳、一氧化二氮、六氟化硫、乙烷、庚烷、氨、二氯二氟甲烷等，其中以二氧化碳最為常用。

5[.單選題]單一化合物的熔距要求為()。

A.0.5℃~1℃

B.1℃~2℃

C.2℃~3℃

D.3℃-4℃

E.4℃~5℃

[答案]B

[解析]單一化合物的熔距要求在1℃~2℃的范圍內。

6[.單選題]水提醇沉法主要可沉澱除去的水溶性雜質為()。

A.揮發油、木脂素

B.三萜皂苷、甾體皂苷

C.多糖、蛋白質

D.香豆素、木脂素

E.蒽醌、生物鹼

[答案]C

[解析]水提醇沉法(也稱水/醇法)是在葯材濃縮水提取液中加入數倍量高濃度乙醇，放置，可沉澱除去多糖、蛋白質等水溶性雜質，達到分離的目的。

配伍選擇題

【1~3題共用備選答案】

1[.共享答案題]

A.揮發油

B.皂苷

C.黃酮

D.活性多糖

E.生物鹼

1[1單選題]不宜用煎煮法提取的成分是()。

[答案]A

[解析]揮發油具有揮發性，不宜用煎煮法提取。多糖可採用水提醇沉法提取，調整含醇量，可使多糖沉澱析出。生物鹼具有一定的鹼性，可以採用酸水提取法提取。

2[1單選題]可採用水提醇沉法提取的成分是()。

[答案]D

[解析]揮發油具有揮發性，不宜用煎煮法提取。多糖可採用水提醇沉法提取，調整含醇量，可使多糖沉澱析出。生物鹼具有一定的鹼性，可以採用酸水提取法提取。

3[1單選題]可採用酸水提取法提取的成分是()。

[答案]E

[解析]揮發油具有揮發性，不宜用煎煮法提取。多糖可採用水提醇沉法提取，調整含醇量，可使多糖沉澱析出。生物鹼具有一定的鹼性，可以採用酸水提取法提取。

【4~5題共用備選答案】

2[.共享答案題]

A.二氧化硅

B.二氧化碳

C.活性炭

D.硅膠

E.聚醯胺

4[1單選題]常用的極性吸附劑是()。

[答案]D

[解析]硅膠是常用的極性吸附劑。活性炭是常用的脫色劑。

5[1單選題]常用的脫色劑是()。

[答案]C

[解析]硅膠是常用的極性吸附劑。活性炭是常用的脫色劑。

多項選擇題

1[.多選題]根據物質分子大小差別進行分離的方法是()。

A.凝膠色譜法

B.結晶法

C.膜分離法

D.硅膠柱色譜法

E.大孔樹脂色譜法

[答案]AC

[解析]根據物質分子大小差別進行分離的方法主要有凝膠色譜法、膜分離法、大孔樹脂色譜法等。

2[.多選題]關於聚醯胺柱色譜的吸附規律，敘述正確的是()。

A.化合物與聚醯胺形成氫鍵的基團數目越多，則吸附能力越強

B.越易形成分子內氫鍵的化合物，在聚醯胺上的吸附能力越強

C.分子中芳香化程度越高的化合物，則吸附性越強

D.化合物極性越大，則吸附能力越強

E.化合物鹼性越大，則吸附能力越強

[答案]AC

[解析]聚醯胺柱色譜的吸附強弱，主要與化合物與聚醯胺形成氫鍵能力強弱有關，與化合物極性及酸、鹼性沒有直接關系，可先排除D、E選項。易形成分子內氫鍵的化合物，在聚醯胺上的吸附相應減弱，故B選項也為錯誤選項。化合物與聚醯胺形成氫鍵的基團數目越多，則吸附能力越強;分子中芳香化程度高的化合物，則吸附性增強，故A、C選項正確。

3[.多選題]下列敘述，符合凝膠過濾法的是()。

A.適用於分離分子大小不同的成分

B.可在水中應用

C.可在極性有機溶劑中應用

D.採用親脂性溶劑洗脫

E.適用於分離酸性強度不同的成分

[答案]ABC

[解析]凝膠過濾法分離是基於分子篩原理，適用於分離分子量不同的成分。常用的凝膠填料有兩種，是葡聚糖凝膠(Sephadex)適於在水中應用，一是羥丙基葡聚糖凝膠可以在極性有機溶劑中應用。凝膠過濾柱色譜採用水-醇系統洗脫，不適用於親脂性溶劑洗脫，一般也不用於分離酸性強度不同的成分，故DE選項錯誤。其他選項均正確。

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『柒』 大孔樹脂吸附技術和凝膠過濾色譜的區別

凝膠過濾色譜法：解析度較高，但是上樣量僅為柱體積的1%，而且對流速也有嚴版格的限制。離子交換色譜權法：根據目的蛋白質表面所含有的氨基酸殘基帶有的凈電荷分離蛋白質，但是解析度沒有凝膠過濾高。親和層析法：根據生物分子的特異性分離目的蛋白，特異性很高，但是配件容易丟失適合含有特異性的標簽的或者抗體。疏水色譜：根據疏水性來分離蛋白質,缺點是有的蛋白質在高鹽中溶解度降低，所以應用范圍受到限制，適合蛋白質表面含有較多疏水性氨基酸殘基的疏水性蛋白質。

『捌』 中性氧化鋁柱，大孔樹脂，固相萃取柱有什麼區別各適用於分離純化哪些類物質

大孔樹脂主要起分子篩的作用，適用於分離糖類大分子物質
固相萃取適用於液相色譜之前的樣品預處理，使樣品更干凈
中性氧化鋁適用於醛 醌 酮 某些苷 及酸鹼溶液中不穩定的化合物如酯 等化合物的分離

『玖』 聚醯胺、硅膠、大孔樹脂色譜柱適合分離的成分分別是什麼

聚醯胺與硅膠對極性大的有機物吸附強
大孔樹脂主要用於水溶性成分的分離純化，尤其是大分子的親水性成分如多糖、皂苷、黃酮、生物鹼、三萜類化合物