『壹』 做超濾實驗時,超濾膜上標的10KD、30KD單位如何對應分子的大小是否單位越大,超濾得到的物質分子越小
首先與超濾膜的材質有關,比如聚醚碸的和再生纖維的,同樣是10KD的,截流能力專是不相同的屬,一般要求在截流分析量的2倍-5倍以上方可實現良好的分離,同時不同公司的超濾膜本身應該有自己的說明的,參照說明要求即可。
『貳』 澄清過濾後超濾用多少KD的膜進行比較合適
100KD和300KD都可以,因為HCD, HCP和RNA的分子量一般會小於100KD而質粒的分子量較大,因此這兩款膜包都可回以對質粒進行快速有答效的超濾濃縮以及洗濾換液。Sartorius賽多利斯擁有膜配方和生產專利,通過對樹脂規格,配方和制膜工藝的專業引領著一次性行業的發展。
『叄』 過濾膜 的孔徑大小,10kd 的蛋白選用多少的孔徑過濾
第一超濾管達不來到100%的與孔徑源完全一致。任何濾膜都達不到和標稱孔徑完全一致,只能是無限的接近孔徑。 其二分子量是質量,而孔徑是長度單位,原則上不具有匹配性。原因是,標的物的結構會直接影響過濾精度。球狀的和鏈狀的,分子量相同,但是用相同孔徑可以截住球狀的,而鏈狀的就會透過去。 因此,兩者之間沒有絕對的聯系。
早上好,這個看你要過濾的材料要求了。如果是低黏度的,通常選擇小孔徑的比如0.22,如果是高黏度的,一般選擇0.8或者更高的,特別粘稠比如甘油那樣超過300cps的就不要過濾了……含有大量固體顆粒的,請先選擇二級過濾,比如先用0.8再用0.45,直接用0.45或者0.22將會導致過濾器壓力急劇升高爆膜掉。你是要過濾水相,還是有機相的?
『肆』 蛋白分子量為45KD應選用截留分子量30kd的超濾管合適嗎
3KD指的是截留分子量截留分子量(MWCO:molecularweightcutoff)是使用分子量大小表示的超濾膜的截留性能,專又稱作切割分子量。由屬於直接測定超濾膜的孔徑相當困難,所以使用已知分子量的球狀物質進行測定。如膜對被截留物質的截留率大於90%時,就用被截留物質的分子量表示膜的截留性能,稱為膜的截留分子量。實際上,所使用的物質並非絕對的球形,由於試驗條件的限制,所測定的截留率也有一定的誤差,所以截留分子量不能絕對表示膜的分離性能。也就是說3KD分子量的產品有可能透過膜也有可能被膜攔截,一般來說希望3KD的產品全部透過,需要選擇截留分子量更大的膜,比如5KD
『伍』 分離22KD的蛋白質選擇什麼型號的超濾膜
如果是分離22kDa及分子量遠小於它的小蛋白,推薦用millipore的超濾管,截留分子量10kDa,體積1-15ml都有。主要還是看你的目的蛋白是集中於濃縮液部分,還是濾液部分,從而選擇合適的截留分子量
『陸』 我做western,蛋白180KD,請問用多大濃度的分離膠即濃縮膠
濃縮膠是固定的 分離膠配稀一點唄 10或者8%的 這么大得多跑跑
『柒』 超濾分子量在10-30KD的蛋白,用外壓膜好還是內壓膜好
都一樣抄的,超濾水是把細菌等物襲質過濾在膜外,而水通過膜,而超濾蛋白你可以選擇多少以上的被截留,以下的通過膜而被純化,這取決於你的雜蛋白的分布范圍,如果你的雜蛋白分布主要是小分子量的,目的蛋白較大,你也可以選擇雜蛋白通過而目的蛋白被截留在膜上,然後洗滌膜後洗脫蛋白純化
『捌』 我的蛋白分子量150-160kd的,我應該用多少的分離膠
根據一般的建議,蛋白分子量150-160kd的應該選擇丙烯醯胺濃度5%左右的分離膠,此時膠濃度較稀易碎,需要小心操作。
『玖』 蛋白大小為27.8kd,應該用多大的超濾管截流
3KD指的是截留分子量
截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff)是使用分子量大小表示的超濾膜的內截留性能,又稱容作切割分子量。
由於直接測定超濾膜的孔徑相當困難,所以使用已知分子量的球狀物質進行測定。如膜對被截留物質的截留率大於90%時,就用被截留物質的分子量表示膜的截留性能,稱為膜的截留分子量。實際上,所使用的物質並非絕對的球形,由於試驗條件的限制,所測定的截留率也有一定的誤差,所以截留分子量不能絕對表示膜的分離性能。也就是說3KD分子量的產品有可能透過膜也有可能被膜攔截,一般來說希望3KD的產品全部透過,需要選擇截留分子量更大的膜,比如5KD
『拾』 我的蛋白分子量150-160kd的,我應該用多少的分離膠呀我查的最佳是6%,能用10%的么這二者有什麼區別優
膠濃度與蛋白大小,是經過前人多次電泳的經驗總結。在最佳的電泳條件下,能得到比較好的分離效果和比較好看的條帶。
如果膠濃度夠大,蛋白條帶會比較細一些,但電泳速度比較慢,大的片段可能分不開。
10%能不能用得看你的情況了。如果只是一個條帶,用10%是沒有問題的。如果有些雜帶,而且雜帶與你的目標蛋白差得比較遠,也是可以用的。如果差別小,那就得用濃度低一點的膠了,這樣才能分開。