㈠ 大腸桿菌的檢測方法
多管發酵法。
多管發酵法是一種檢測水體中大腸桿菌的傳統方法,這種方法是在44.5℃的含有熒光底物的培養基上連續培養24h,而後能產生分解熒光底物——葡萄糖醛酸酶,從而釋放出熒光產物,進而使培養基在紫外光照射下產生特徵熒光。此方法可被用來對原樣品中的菌落數作統計學估計。
在單料或雙料乳糖膽鹽發酵管內發酵,分離培養試驗,利用伊紅美藍培養皿分離,接著是在乳糖發酵管中進行二次發酵,最後通過芽孢染色、革蘭氏染色、顯微鏡觀察等來完成。多管發酵法對試驗條件要求不高,成本低,但是檢測時間較長,容易受其他條件干擾,進而影響到測定結果的精確度。
(1)污水糞大腸菌群兩個小時檢測擴展閱讀:
注意事項:
1、檢樣時注意無菌操作。
2、稀釋時採用的稀釋液可以用磷酸鹽緩沖液或生理鹽水,接種時可採用九管法,設置三個梯度,分別為0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一個稀釋度的試管應充分混勻。
3、每次實驗需要有陰性對照。
4、使用小倒管培養基配製時,為排凈氣泡,滅菌時不要把試管的蓋子蓋的太緊,滅菌後注意觀察一下倒管中的氣體是否排完全、
5、高壓滅菌後等高壓滅菌鍋的壓力表達到0,取出培養基放到冰箱冷卻,效果會比較好。
㈡ 醫療機構污水允許大腸桿菌的檢測值是多少
首先要看哪類醫療機構,如果是傳染病、結核病醫療機構,大腸桿菌菌群回數不得高於100MPN/L。
如果是綜合醫療答機構或其它醫療機構,那就要看排放標准。如果直接排放到自然界,執行污水排放標准,大腸桿菌菌群數不得高於500MPN/L。 如果排入市政管網,執行預處理標准,大腸桿菌菌群數不得高於5000MPN/L。
㈢ 關於水中糞大腸菌群數的測定
1.管的規劃不定,最好是帶蓋子的10-50ml的玻璃管,一般要最少做5個平行。
2.培養基都可以自己配的,建議用簡單的lb培養基即可,葯品為蛋白腖和nacl(固體用agar)。
3.塞子或蓋子都可以,但一定要加。
4.需要超凈台、高壓滅菌鍋、調溫搖床這些必備儀器。
糞大腸菌群是生長於人和溫血動物腸道中的一組腸道細菌,隨糞便排出體外,約占糞便乾重的1/3以上,故稱為糞大腸菌群。糞大腸菌群不是細菌學上分類命名,而是根據衛生學方面的需要,而設定的一類與糞便污染有關的一組細菌,是能在44.5℃24h內發酵乳糖產酸產氣的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。糞大腸菌群為一群需氧及兼性厭氧的菌群,呈革蘭氏陰性反應,能在普通培養基上生長繁殖;其生化活動能力較強,能發酵多種糖類,產酸產氣,其特點是能較快發酵乳糖,糞大腸菌群在乳糖培養基中於.37℃下進行培養,在24h內能使乳糖發酵產酸,還有甲酸解氫酶進行分解甲酸,生成氫氣和二氧化碳,產生大量氣體,這時,若加入伊紅美蘭指示劑,分解乳糖所產生的酸(帶陽電荷)與伊紅相染呈紫色且有金屬光澤,故常用此特性來鑒定識別糞大腸菌群。
具體操作如下:
(1)發酵(產酸產氣)試驗
將試樣液以無菌接種於雙倍乳糖膽鹽發酵管(其內放有倒置的小玻璃管,以收集氣體)內,置44'e培養箱中培養24—48h,由於乳糖膽鹽培養基是一種具有選擇作用的培養基,其中膽鹽具有抑製革蘭氏陽性菌的作用,若觀察到發酵管內不產酸(有酚紅指示劑指示)不產氣,則報告試樣為糞大腸菌群陰性,未檢出,檢測結束。
若發酵管內產酸產氣,則繼續進行下列檢測。
(2)鑒別培養
將有產酸產氣的發酵管內試樣培養液接種到伊紅美蘭瓊脂培養基平皿上,置37℃培養18~24h;同時將該培養液接種到蛋白腖水中,置44℃培養24h。
(3)驗證實驗
菌落觀察:在上述平皿培養基上,仔細觀察菌落生長情況:大腸菌群在伊紅美蘭瓊脂培養基上其典型菌落是呈深紫色、圓形、邊緣整齊、表面光滑、濕潤、常具有金屬光澤,或呈紫黑色不帶或略帶金屬光澤及粉紫色,中心較深的菌落。
革蘭氏染色、鏡檢:將以上典型的(或近似的)大腸菌群菌落進行革蘭氏染色、鏡檢,若革蘭氏染色呈陽性(紫色)反應,則報告糞大腸菌群呈陰性,未檢出。若革蘭氏染色呈陰性,檢測還需進行下一試驗,以待進一步證實。
靛基質試驗(吲哚試驗):對前已培養好的蛋白腖水中,滴人靛基質試劑(對二甲基氨基苯甲醛試劑),進行靛基質反應,若液面呈玫瑰紅色,呈陽性反應,則報告糞大腸菌群呈陽性,檢出;若液面仍是棕黃色,則報告糞大腸菌群呈陰性,未檢出。
(4)檢測程序
將上述檢測糞大腸菌群的操作步驟可歸結為以下程序圖示。
(5)檢驗報告
當發酵管內產酸產氣,觀察試液平皿上為典型糞大腸菌群菌落,並經革蘭氏染色、檢鏡試驗為陰性(—)及靛基質試驗為陽性,則報告該試液經檢測檢出糞大腸菌群。其他結果均為未檢出糞大腸菌群。
㈣ 水中糞大腸菌群的測定
化妝品檢測項目中糞大腸菌群的檢測流程:
10g/mL樣品+90mL滅菌生理鹽水 →10mL+10mL雙倍乳糖膽(含中和劑)培養基→糞大腸菌群 44.5℃,48h培養
註:在化妝品檢測項目中,如果樣品含有油脂性的成分,如精油,在樣品前處理中需加入液體石蠟、吐溫80、生理鹽水進行均質,使樣品能夠均勻分散開來。
糞大腸菌群又是一個什麼樣的微生物呢?下面我們來詳細介紹下:
大腸菌群:大腸菌群並非細菌學分類命名,而是衛生細菌領域的用語,它不代表某一個或某一屬細菌,而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌,這些細菌在生化及血清學方面並非完全一致。
定義(GB2010):在一定培養條件下能發酵乳糖、產酸產氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽孢桿菌。
糞大腸菌群:大腸菌群的一種,又稱耐熱大腸菌群,培養溫度:44.5±0.5℃,糞大腸菌群是化妝品檢測項目中必檢的微生物項目。
大腸埃希氏菌:((Escherichia. coli )通常稱為大腸桿菌。根據不同的生物學特性將致病性大腸桿菌分為5類:
致病性大腸桿菌(EPEC)、
腸產毒性大腸桿菌(ETEC)、
腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、
腸出血性大腸桿菌(EHEC)、
腸黏附性大腸桿菌(EAEC)。
您可能感興趣的檢測服務:
㈤ 大腸菌群檢測方法
GB 4789.3-2016 《食品安全國家標准 食品微生物學檢驗 大腸菌群計數》中的規定操作步驟:
1、乳糖發酵試驗:樣品稀釋後,選擇三個稀釋度,每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發酵管。36±1℃培養48±2h,觀察是否產氣。
2、分離培養:將產氣發酵管培養物轉種於伊紅美藍瓊脂平板上,36±1℃培養18-24h,觀察菌落形態。
3、證實試驗:挑取平板上的可疑菌落,進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發酵管36±1℃培養24±2h,觀察產氣情況。
SN0169-92 《中華人民共和國進出口商品檢驗行業標准出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢驗方法》規定操作:
1、推測試驗:樣品稀釋後,選擇三個稀釋度,每個稀釋度接種三管LST肉湯。36±1℃培養48±2h,觀察是否產氣。
2、證實試驗:將產氣管培養物接種煌綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯管中,36±1℃培養48±2h,觀察是否產氣。以BGLB產氣為陽性。查MPN表,報告每ml(g)樣品中大腸菌群的MPN值。
大腸菌群並非細菌學分類命名,而是衛生細菌領域的用語,它不代表某一個或某一屬細菌,而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌,這些細菌在生化及血清學方面並非完全一致。一般認為該菌群細菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。
大腸菌群是作為糞便污染指標菌提出來的,主要是以該菌群的檢出情況來表示食品中有否糞便污染。大腸菌群數的高低,表明了糞便污染的程度,也反映了對人體健康危害性的大小。
糞便是人類腸道排泄物,其中有健康人糞便,也有腸道患者或帶菌者的糞便,所以糞便內除一般正常細菌外,同時也會有一些腸道致病菌存在,因而食品中有糞便污染,則可以推測該食品中存在著腸道致病菌污染的可能性,潛伏著食物中毒和流行病的威脅,必須看作對人體健康具有潛在的危險性。
㈥ 能不能介紹幾種微生物快速檢測儀2小時內出結果的有沒有主要是檢測菌落總數、大腸菌群、致病菌.
這個要求目前沒有能達到的,菌落總數、大腸菌群且不說,致病菌的檢測用vitek II 也需要前增菌、純化,機器檢測時間取決於你純化的純度.
不過,科研方面已經有人在搞利用機器識微生物「相貌」特徵的研究,據我看到的文獻,也需要增菌,不然很容易被忽略掉.
㈦ 醫院污水排放每日怎樣檢測
醫院類污水一般要求檢測PH值、懸浮物(SS)、化學需氧量(CODcr)、氨氮(NH4+-N)
、總磷(TP)、糞大腸菌群、余氯等7項,你要自己檢測嗎? 如果不是,為了過環保局那裡還是找第三方檢測機構來檢測,如中科華航,有蓋CMA的醫療污水檢測報告,就可以過了
㈧ 廢水中糞大腸菌群的標準是多少啊
我國廢水排放標準的糞大腸指標為1000個/升。國家規定「糞大腸菌群數」一級排放A標准為10³個/L,一級排放A標准為10^4個/L,二級排放標准為10^4個/L.三級不做規定。
(8)污水糞大腸菌群兩個小時檢測擴展閱讀:
檢驗注意事項
(1)將接種好的樣品放人恆溫水浴箱或隔水式恆溫培養箱時,箱內溫度一定要求達到所要求的溫度(44±1℃)時,方可放入。如用恆溫水浴箱其水面要高於接種物面,放濾膜的培養皿要沉到水浴箱底部。
(2)MFC培養基中苯胺藍的純度和質量往往影響菌落的顏色,根據試驗結果用進口苯胺藍加O.1g,用國產苯胺藍加0.2g,培養出的糞大腸菌菌落顏色較典型。但國產苯胺藍的性能是否同樣穩定尚不能肯定。因此,制好的培養基在使用前,最好先接種典型糞大腸菌,以觀察對比菌落的顏色。
玫紅酸高壓後會分解,配好的試液應在2-lO℃保存不超過2周,如顏色由暗紅變成棕色沉澱時應棄去。如雜菌污染少,且加與不加玫紅酸對菌落計數無影響時,可不加。.
(3)在濾膜上生長的菌落除挑取藍色菌落外,淺藍色菌落或淺藍色中心較深的菌落也應挑取。
(4)生活飲用水通常都是經氯處理消毒的,水中含有一定量的余氯,使大腸菌群處於受損或受抑制狀態,在採集水樣時應加硫代硫酸鈉脫氯,使此受損的細菌得以復甦與修復,從而避免計數結果偏低甚至假陰性出現。
(5)采樣後水樣的正確保存很重要,如保存不當可使檢樣中的大腸菌群細菌死亡或在一定條件下再生長,這些都將影響檢驗結果的准確性。檢驗室接到水樣後,應立即檢驗。如因故不能檢驗時,應立即置於冰箱內並於2小時內檢驗。
關於水樣儲存時間與溫度對大腸菌群數的影響,Lonsans等報告認為水樣中大腸菌群數不多時,則冰箱保存與室溫保存相差不大;如水樣中菌數多時,則在室溫(23-39.5℃)內保存比在冰箱(0-1O℃)中保存菌數的減少速度快。
參考資料來源:
網路-糞大腸菌
㈨ 純凈水的大腸菌群的檢測方法
2.7細菌總數:(詳見衛標) 2.7.1方法:以無菌操作方法用已滅菌過1 ml吸管,吸取已搖勻的水樣1 ml注入已經過121℃20分鍾滅菌的90ml生理鹽水的三角燒瓶中,搖勻,稱1:10的供試液。另取滅菌吸管1支,從三角燒瓶分別吸取為1:10的供試液1 ml注入經160℃2小時滅菌平皿中(共注三個平皿)。然後各平皿倒入已滅菌熔化的肉湯瓊脂培養基約15ml,搖勻。另再倒空白平皿,作對照。待冷卻凝固後,翻轉平皿(底朝上)置36.5℃恆溫培養箱內培養48小時後進行細菌計數。 2.7.2細菌計數: 將三個平皿中的平均菌落數,以稀釋度的選擇乘以其稀釋倍數,即為水樣的細菌總數。 一般都是檢測細菌總數的!
㈩ 誰能告訴我糞大腸菌群數測定的步驟 簡述就可以了~
看來我們使用的方法是一樣的,區別是你沒有操作過,對吧 按你提問的順序分列 一、 試管的規格大約為長度--cm,直徑2--2.5cm,小玻璃管的長度大約2-3cm直徑約0.3-0.5cm。操作的時候是把小的玻璃管(一端封閉)開口的一端朝大試管底部放入,至於需要多少支。要看你一次做幾個樣品,幾個倍數,我們一般准備30--50套。 二、不管是什麼培養基,我們都是自己配製,試劑商店裡可以買到的(按方法中所列試劑品種購買。 三、肯定要加塞子的,我們用的塞子是軟材料(好像是軟橡膠?白色的,塞子中間另有一個可以活動的塞子,能保證加塞後的試管透氣,其實用什麼材料不重要的。 四、需要的儀器設備為:生化培養箱、無菌操作台(空氣精華級別100)、高壓滅菌鍋、冰箱、乾燥箱。