水和廢水總大腸菌群濾膜法

A. 水體中大腸菌群如何檢測

水的大腸菌群數是指100 mL水檢樣內含有的大腸菌群實際數值，以大腸菌群最近似數(MPN)表示。在正常情況下，腸道中主要有大腸菌群、糞鏈球菌和厭氧芽孢桿菌等多種細菌。這些細菌都可以隨人畜排泄物進入水源，由於大腸菌群在腸道內數量多，所以，水源中大腸菌群的數量，是直接反映水源被人畜排泄物污染的一項重要指標。目前，國際上已公認大腸菌群是糞便污染的指標。因而對飲用水必須進行大腸菌群的檢查。水中大腸菌群的檢測方法，常用多管發酵法和濾膜法。多管發酵法可適用於各種水樣的檢驗，但操作繁瑣，需要的時間較長。濾膜法僅適用於自來水和深井水，操作簡單、快速，但不適用於雜質較多、易於堵塞濾孔的水樣。

B. 有什麼方法可以簡單的檢驗水質

1、看

用透明度較高的玻璃杯接滿一杯水,對著光線看有無懸浮在水中的細微物質？靜置三小時,然後觀察杯底是否有沉澱物？如果有,說明水中懸浮雜質嚴重超標。

2、聞

用玻璃杯距離水龍頭盡量遠一點接一杯水，然後用鼻子聞一聞，是否有漂白粉（氯氣）的味道？如果能聞到漂白粉（氯氣）的味道，說明自來水中余氯超標。

3、嘗

熱喝白開水,有無有漂白粉（氯氣）的味道,如果能聞到漂白粉（氯氣）的味道,說明自來水中余氯超標！也必須使用凈水器進行終端處理。

4、觀

用自來水泡茶，隔夜後觀察茶水是否變黑？如果茶水變黑，說明自來水中含鐵、錳嚴重超標，應選用裝有除鐵、錳濾芯的凈水器進行終端處理。

5、品

品嘗白開水，口感有無澀澀的感覺？如有,說明水的硬度過高。

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檢驗項目

天然水、用水和廢水的水質參數分別見河流自凈、用水水質和廢水水質。某些檢驗項目的制定與單位，決定於檢驗方法。例如反映糞便對水的污染，檢驗項目最好採用大腸桿菌。

但是，由於大腸桿菌的檢驗費事費時，一般常用大腸菌群為參數，採用的是多管發酵法，其單位按統計原理估計細菌個數，所以採用每升（或100毫升）最可能個數。

如果採用濾膜法檢驗，大腸菌群的定義和單位就要修改。類似這樣的檢驗項目還有渾濁度、色度、臭、味、懸浮固體、可沉固體等。

C. 請問總大腸菌群是指什麼啊

大腸菌群不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，這些細菌在生化及血清學方面並非完全一致。

其定義為：需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產酸產氣的革蘭氏陰性無芽胚桿菌。一般認為該菌群細菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產氣克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌等。

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大腸菌群都是直接或間接地來自人或動物的糞便。而大腸菌群超標可能由於產品的加工原料、包裝材料受污染，或在生產過程中產品受到人員、生產設備的污染，或產品滅菌不徹底而導致的。

大腸菌群存在於人畜腸道內，是一個能反映食品被糞便污染情況的指標，結果為每100ml（g）樣品中大腸菌群的最近似數，而超標就意味著該食品可能被人畜糞便污染。糞便中除了正常細菌外，還可能存在一些腸道致病菌，即能夠引起人們發病的細菌。

D. 為什麼用大腸桿菌來測水質污染程度

大腸桿菌的數量是一個很重要的水質標准。（溶解氧及大腸桿菌是兩項可反映海水水質的重要參數。）
然後有人拿草履蟲測銅離子濃度，（銅離子多了也是很有害的。）
要知道水質污染生物監測一般包括：生物群落法、細菌學檢驗法、水生生物毒性測定等等，所以很多生物都用於測定，而且像細菌檢定是不看各個種類的細菌分別有多少的。

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水質污染生物監測
水環境中存在著大量的水生生物群落,各類水生生物之間及水生生物與其賴以生存的環境之間存在著互相依存又互相制約的密切關系.當水體受到污染而使水環境條件改變時,各種不同的水生生物由於對環境的要求和適應能力不同而產生不同的反應,因此可用水生生物來了解和判斷水體污染的類型,程度.
用水生生物來監測研究水體污染狀況的方法較多,如生物群落法,生產力測定法,殘毒測定法,急性毒性試驗,細菌學檢驗等.
2.6.1 生物群落法
(1)指示生物:生物群落中生活著各種水生生物,如浮游生物,著生生物,底棲動物,魚類和細菌等.由於它們的群落結構,種類和數量的變化能反映水質狀況,故稱之為指示生物.
(2) 監測方法
1.污水生物系統法
該方法將受有機物污染的河流按其污染程度和自凈過程劃分為幾個互相連續的污染帶,每一帶生存著各自獨特的生物(指示生物),據此評價水質狀況.
如根據河流的污染程度,通常將其分為四個污染帶,即多污帶,α-中污帶β-中污帶和寡污帶.各污染帶水體內存在著特有的生物種群.
2.生物指數法
是指運用數學公式反映生物種群或群落結構的變化,以評價環境質量的數值.
貝克生物指數(BI)= 2nA + nB BI=0時,屬嚴重污染區域,BI=1-6時,為中等有機物污染區域,BI=10-40時,為清潔水區.
2.6.2細菌學檢驗法
水的細菌學檢驗,特別是腸道細菌的檢驗,在衛生學上具有重要意義.實際工作中,常以檢驗細菌總數,特別是檢驗作為糞便污染的指示細菌,來間接判斷水的衛生學質量.
2.6.2.1 水樣的採集
:嚴格按無菌操作要求進行,防止在運輸過程中被污染,並應迅速進行檢驗.
2.6.2.2 細菌總數的測定
細菌總數是指1mL水樣在營養瓊脂培養基中,於37℃經24小時培養後,所生長的細菌菌落的總數.它是判斷飲用水,水源水,地表水等污染程度的標志.
其操作過程如下:1)滅菌 ;2)制備營養瓊脂培養基 ;3)培養(二份平行樣,一份空白) ;4)菌落計數.
2.6.2.3 總大腸菌群的測定
總大腸菌群是指那些能在35℃,48小時之內使乳糖發酵產酸,產氣,需氧及兼性厭氧的,革蘭氏陰性的無芽孢桿菌,以每升水樣中所含有的大腸菌群的數目來表示.
總大腸菌群的檢驗方法富有發酵法和濾膜法.發酵法可用於各種水樣(包括底泥),但操作繁瑣,費時間.濾膜法操作簡便,快速,但不適用於渾濁水樣.
2.6.2.4其他細菌的測定
2.7 底質監測
底質是沉積在水體底部的堆積物質的統稱,是礦物,岩石,土壤的自然侵蝕產物,是生物活動及降解有機質等過程的產物.一般不包括工廠廢水沉積物及廢水處理廠污泥.底質是水體的主要組成部分.

E. 濾膜法測大腸桿菌的培養基

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，這些實驗儀器都需要經過滅菌處理，與過濾有關的操作都要在酒精燈火焰旁進行，防止雜菌的污染．
（2）待測水樣過濾完之後，還有部分細菌吸附在濾杯杯壁上，此時可以在無菌條件下，用無菌水沖洗濾杯，再次過濾，將這部分細菌也盡可能集中到濾膜上．
（3）將完成過濾之後的濾膜緊貼在EMB培養基上，屬於微生物培養中的接種操作．從功能上看，該培養基中含有伊紅美藍，因此EMB培養基屬於鑒別培養基．
（4）無菌操作下將90ml無菌水加入到10ml待測水樣中，這樣就將待測水樣稀釋了10倍；根據大腸桿菌鑒定的原理可知，黑色菌落為大腸桿菌，因此1升待測水樣中的大腸桿菌數目=5×（1000÷10）=500個．
（5）若要測定待測水樣中酵母菌的數目，酵母菌屬於真核生物，大腸桿菌屬於原核生物，真核細胞的直徑比原核細胞大，因此應更換上述過濾裝置中的濾膜，選擇孔徑更大的濾膜．
故答案為：
（1）濾杯、濾膜和濾瓶
（2）無菌條件下用無菌水沖洗濾杯，再次過濾
（3）接種 鑒別
（4）10 500
（5）更大

F. 水中大腸桿菌濾膜法檢驗

1. 消毒設備按照產品使用說明操作，待設備運轉正常後，取水樣進行消毒效果檢驗。消毒劑發生器按照產品使用說明書操作，待設備運轉正常後，在出口處採集樣品，按說明書規定的有效劑量稀釋後，進行消毒效果檢驗。消毒劑按產品使用說明書稀釋配製水樣。2. 細菌加標操作程序(1) 在脫氯自來水中加入大腸桿菌，實驗用菌種為大腸桿菌8099。加標量為>5×100-2×1000/100ml。(2) 將裝有加標菌水樣的三角燒瓶放入恆溫水浴箱(20℃)中，開動磁力攪拌器5min，使細菌在水中分布均勻。先取2份細菌加標的水樣，進行大腸桿菌活菌計數(陽性對照組)。(3) 待水溫恆定後按說明書規定的最小劑量加入消毒劑，迅速攪拌均勻，從加入消毒劑起計時。設定3個工作時間，說明書規定的最短作用時間為T，3個作用時間分別為0.5T，T和1.5T，作用後分別吸取水樣，注入裝有中和劑(如硫代硫酸鈉)無菌三角燒瓶中，以終止消毒作用。 對飲用水消毒處理器和消毒劑發生器應根據消毒產物的產生量及處理水最高流量進行加標采樣。(4) 將中和的水樣，分別取100ml、10ml、1ml各兩份，用濾膜法進行大腸菌活菌計數。(5) 將未接種大腸桿菌的試驗用同批培養基平板2個，置溫箱中培養(陰性對照組)。試驗重復三次。3. 上述試驗同時，測定消毒成分和劑量，記錄作用時間和水溫。4. 結果評價消毒後水中大腸菌群指標應符合《生活飲用水水質衛生規范》規定5．√－ 必需測定項目 ； △ －如含有，需測定http://szbbs.soufun.com/2810026793~-1/23633781_23633781.htm

水中大腸菌群檢驗方法的改進
晁福環;芮期義;王新為;高明;歐陽川
<正> 水中細菌,包括致病菌與指標菌,因受自然條件或水處理過程的影響可以形成生理上存在缺陷,這些細菌稱為損傷菌。損傷菌在適宜條件下仍可發育成正常菌落,可是直接暴露於含有抑制劑的選擇性培養基時就不易生長。因此,現有遠藤培養基濾膜法有可能使大腸菌檢
【作者單位】：軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所;軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所;軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所;軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所;軍事醫學科學院衛生學環境醫學研究所 300050 天津;300050 天津;300050 天津;300050 天津;300050 天津
【DOI】：cnki:ISSN:1004-8685.0.1991-01-021
【正文快照】：
水中細菌,包括致病菌與指標菌,因受自然條件或水處理過程的影響可以形成生理上存在缺陷,這些細菌稱為損傷菌.損傷菌在適宜條件下仍可發育成正常菌落,可是直接暴露於含有抑制劑的選擇性培養基時就不易生長.因此,現有遠藤培養基濾膜法有可能使大腸菌檢出菌數偏低,影響水質衛生學評價的准確性。為提高檢出率,本文在水中大腸菌損傷狀況及生長特點研究的基礎上,對現用遠膝培養基進行了改進研究. 一、天然水及經不同條件處理後水中大腸菌損傷狀況見表l、2.裹l不同條件處理後水中大腸,抓傷狀況實較條件翻傷和.。,卜飛,了氣P側價與腳腳日)『t習分鍾…
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-ZWJZ199101021.htm

1 材料 呋喃唑酮片（地產及市售，規格0．10g／片），混合纖維素酯微孔濾膜，孔徑規格0．45μm、1．2μm、3．0μm，大腸桿菌CMCC（B）〔4〕、膽鹽乳糖增菌液（BL）、伊紅美藍瓊脂（EMB）及大腸桿菌生化反應用培養基均由中國葯品生物製品檢定所提供。

2 方法和結果 供試液先經離心，取上清液依次經過孔徑為1．2μm或3．0μm的微孔濾膜和0．45μm的微孔濾膜過濾後取0．45μm的濾膜加入BL中增菌。
2．1 由於呋喃唑酮幾乎不溶於水，故選用一次離心法、二次離心法和離心-濾膜法〔1，2〕以及離心-雙重濾膜法進行方法比較，結果表明只有離心-雙重濾膜結合法能確保陽性菌的檢出。

表1 不同方法陽性菌的檢出試驗結果

方法 BL增菌48h EMB平板分離 大腸桿菌
檢出結果
一次離心法 微混 未長菌落 未檢出
二次離心法 澄清 未長菌落 未檢出
離心-濾膜法 澄清 未長菌落 未檢出
離心-雙重濾膜法 混濁、產氣 典型的大腸
桿菌菌落 檢出

2．2 人工污染呋喃唑酮片大腸桿菌的檢出情況 選用8批樣品加入大腸桿菌進行人工污染5d後，採用離心-雙重濾膜法進行檢驗，結果表明8批均能檢出。
表2 人工污染大腸桿菌的陽性檢出情況

葯品
批次 BL增菌
48h EMB
平板分離 大腸桿菌
檢出結果 檢出率
％
8批 8批出現混
濁、產氣 8批呈典型菌落 8批檢出 100

註：上述EMB平板分離的典型菌落均經生化反應確認檢出大腸桿菌
3 討論

3．1 雖然呋喃唑酮在水中的溶解僅達40mg／L〔3〕，但由於呋喃唑酮在BL增菌液中的最低抑菌濃度即MIC為0．01mg／L〔4〕，採用一次離心、二次離心法均未能使BL增菌液中的濃度低於0．01mg／L，採用2次離心-濾膜法，則由於供試液經孔徑0．45μm濾膜過濾時殘留呋喃唑酮，當加入BL增菌液後，呋喃唑酮的濃度仍高於MIC，因此大腸桿菌仍無法繁殖，而本文採用的離心-雙重濾膜法，既能除去水中溶解的微量呋喃唑酮，又能把離心後上清液殘留的呋喃唑酮截留在孔徑1．2μm或3．0μm的濾膜上，最大程度地降低孔徑0．45μm濾膜上的呋喃唑酮，也降低了BL增菌液中的呋喃唑酮濃度，所以大大提高了陽性檢出率。
3．2 人工污染大腸桿菌5d仍能檢出，說明離心-雙重濾膜法檢驗過程中不影響大腸桿菌在BL增菌液中的繁殖，能有效地保證樣品的陽性檢出率。
3．3 離心-雙重濾膜法能在很大程度上解決難溶於水的抗菌劑在BL增菌液中的濃度，故對今後開展口服抗生素控制菌的檢驗具有較高的參考意義。
3．4 因埃希氏桿菌屬的菌體，直徑為0．4～0．7μm，長度為1．0～3．0μm，筆者認為採用3．0μm孔徑的濾膜比1．2μm的濾膜可使實際檢驗效果更佳。同時，筆者也認為選擇何種規格的濾膜可因樣品而異，這方面還有待進一步深入探討。http://www.wanfangdata.com.cn/qikan/periodical.articles/haixyx/haix99/haix9903/990393.htm

G. 大腸菌群怎麼樣測定

不同的產品可能檢測方法略有不同，但是基本原理是差不多的。
主要是利用大腸菌群能在特定的培養基上產酸產氣這個原理。
如果是食品行業，現在有新的國家標准了，GB4789.3-2008食品衛生微生物學檢驗——大腸菌群計數，那裡有具體的步驟。買來培養基，照著做就行了。
還是不太懂的話可以找我啊！我就是從事這個行業的，天天和大腸菌群打交道，呵呵！

H. 濾膜法指的是什麼

濾膜法是適用於雜質較少的水樣或檢測空氣中浮菌數的方法。
1、濾膜法是檢測水樣中大腸細菌群的方法。將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經過抽濾，細菌被截留在濾膜上，將濾膜貼於品紅亞硫酸鈉培養基上，經培養後計數和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落，依據過濾水樣計算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數。操作簡單、快速，主要適用於雜質較少的水樣。
2、濾膜法是檢測空氣中浮菌數的方法。將定量的空氣抽濾器通過微孔薄膜，帶菌的塵粒即留滯在濾膜上，將濾膜貼於營養瓊脂平皿上，培養後計數濾膜上生長的菌群數，根據氣樣量計算每立方米空氣中的細菌總數。

I. 用濾膜法檢測大腸菌群有何優點

濾膜法的優點：⑴與直接法比較可以檢測大量的樣品。
⑵濃縮效應使微生物的檢測結果提高。
⑶帶有菌落的濾膜可作為檢測的永久記錄存檔。
⑷可見的菌落與樣品量直接對應，得出定量結果。

J. 做生產用水微生物的細菌總數和大腸菌群德檢測依據是什麼

一、水質微生物及指示菌

在各種水體，特別是污染水體中存在有大量的有機物質，適於各種微生物的生長，因此水體是僅次於土壤的第二種微生物天然培養基。水體中的微生物主要來源於土壤，以及人類的動物的排泄物及污染。水體中微生物的數量和種類受各種環境條件的制約。

一般認為，水中微生物以革蘭氏陰性桿菌佔有較大優勢。與其他水體相比，河水及溪水中革蘭氏陽性菌相對較多，這是因為陸地微生物沖洗污染的緣故。

水體中的致病性微生物一般並不是水中原有微生物，大部分是從外界環境污染而來，特別是人和其它溫血動物的糞便污染。水中常見的致病性細菌主要包括：志賀氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌、小腸結炎耶爾森氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌等。

在實際控制中，對水質衛生質量的評價和控制，是無法對各種可能存在的致病微生物一一進行檢測，而一般利用對指示菌的檢測和控制，來了解水體是否受到過人畜糞便的污染，是否有腸道病原微生物存在的可能，從而評價水的質量，以保證水質的衛生安全。

目前，世界各國一般認為大腸菌群是指示水質受糞便污染較好的指示菌。

我國水質控制也採用大腸菌群作為指示菌，GB5749-85《中華人民共和國國家標准
生活飲用水衛生標准》規定，生活飲用水中大腸菌群每升不得超過3個。

在某些情況下，水體中的細菌總數也可指示水體受糞便等污染物污染的情況。這里的細菌總數其實是指營養瓊脂培養後形成的菌落總數。目前世界各國對於控制飲用水的衛生質量，除採用大腸菌群等指標外，一般還採用細菌總數這個指標。我國GB5749-85《中華人民共和國國家標准
生活飲用水衛生標准》中規定生活飲用水細菌總數每毫升不得超過100個。

二、水質微生物檢驗方法

GB5750-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水標准檢驗法》提供了水質中細菌總數和總大腸菌群的檢測方法。

（一）細菌總數的檢測：

國家標准中，細菌總數是指1ml水樣在營養瓊脂培養基中，於37℃經24h培養後，所生長的細菌菌落的總數。

對生活飲用水，直接吸取1ml水樣於平皿中，加入營養瓊脂後混勻，37℃培養24h，進行計數。

對水源水，根據情況對樣品進行10倍梯度稀釋，選擇適宜稀釋液1ml，加註平皿，營養瓊脂混勻，37℃培養24h，進行計數。

按照規定格式報告每毫升水中細菌總數。

（二）總大腸菌群的檢測：

國家標准中，利用總大腸菌群作為糞便污染的指標。總大腸菌群是指一群需氧及兼性厭氧的，37℃生長時能使乳糖發酵，在24h內產酸產氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。水樣中總大腸菌群數的含量，表明水被糞便污染的程度，而且間接地表明有腸道致病菌存在的可能。

國家標准提供了多管發酵法及濾膜法檢測總大腸菌群的方法。

多管發酵法檢測總大腸菌群，分為三步：初發酵試驗，平板分離，復發酵證實試驗。初發酵試驗，採用乳糖蛋白腖培養液37℃培養24h，觀察產酸產氣情況。對陽性管培養物，接種於品紅亞硫酸鈉培養基或伊紅美藍培養基，觀察菌落特徵，並進行革蘭氏染色和鏡檢。對典型和可疑菌落，接種於乳糖蛋白腖培養液，進行復發酵證實試驗，並根據標准所附檢數表報告結果。

其中，對生活飲用水，初發酵試驗接種水樣總量300ml，即100ml接種2管，10ml接種10管，採用兩個稀釋度，12支發酵管。對水源水，初發酵試驗接種水樣總量55.5ml，即10ml接種5管，1ml接種5管，0.1ml接種10管，共採用三個稀釋度，15支發酵管。兩種接種方法，所用的檢數表是不同的。

濾膜法檢測總大腸菌群，就是利用微孔濾膜，過濾一定量水樣，將水樣中含有的細菌截留在濾膜上，然後將濾膜帖放在選擇性培養基上（如品紅亞硫酸鈉培養基），經培養和證實試驗後，直接計數濾膜上生長的典型大腸菌群菌落，並計算出每升水樣中含有的總大腸菌群數。

三、說明：

1．菌落總數測定中，應選擇合適的稀釋度進行。生活飲用水，國家標准規定每毫升不得超過100個，因此可以直接吸取1毫升到平板進行培養。

2．培養時間。與食品中菌落計數不同，測定水中細菌總數，培養時間採用24h。

3．總大腸菌群的測定方法，由於飲用水和水源水可能的污染程度不同，因此採用不同的接種量，檢數表也不相同。

4．當接種量超過1毫升時，一般採用多倍濃度培養液。如配製3倍濃縮乳糖蛋白腖培養液50mL，加入100mL水樣後，總體積為150mL，培養液恢復到正常濃度。

5．濾膜法檢測總大腸菌群，一般在檢測較大量低濁度水樣時採用，大量水樣濾過濾膜後，水中所含有的所有細菌均截留在濾膜上。