⑴ 合成的引物该怎么处理,用超纯水还是什么稀释
如果短期内不用,不开管-20度保存就行,开管了,用超纯水稀释就可以,一般按照说明书稀释就行,稀释后-20度保存,我用的-20度保存5年还能用,不过没评价效果降低到什么程度
⑵ 合成的引物该怎么处理,用超纯水还是什么稀释
12000rpm离心1min后加入ddH2O,涡旋震荡1min后瞬时离心甩一下即可。加水量根据你需要的浓度确定。比如引物管上是4nmol,那么加入400μl水,浓度就是100p
⑶ 酶切后直接用乙醇沉淀,然后用灭菌超纯水溶解后直接做连接会有影响吗
不太好,如果只做沉淀,没有酚氯仿抽提,酶可能还是有活性的。所以后面连接的时候可能会有干扰。如果能用PCR clean的试剂盒处理一下的话,就比较保险了。不然最好做酚氯仿抽提。
⑷ 如何稀释新引物啊
用TE(或ddH2O)稀抄释,按引物合成报袭告单上写的先稀释到100uM(一般有To dissolved into 100uM,add XX ul water...,不过注意一下是1OD的还是一管的,一般指1OD加这么多),作为贮存液。
然后再取出一部分,稀释10倍到10uM,使用
⑸ pcr用超纯水
最好还是在冰上做啦,一次两次没有问题,久了多了可能问题就出来了
一般用的是灭菌的双蒸水
保证引物的终浓度就可以.都是用水稀释的,没啥差别
⑹ 请问引物是怎么稀释的
上面网友讲的估抄计应该会出现袭在你合成的引物单上。 在实际操作时,你首先需要进行离心。离心前请不要打开盖子。 离心后,在离心管底可见白色沉淀,这时你可根据合成单上的说明,加入适量的ddH2O或者Elution Buffer。合成单上标有Tm值,OD值以及引物长度等。通常,会有1OD=?ug的标记(由于引物长度不同,此处数值也对应不同),直接按??值加入等量ddH2O(如20ug对应加入20ul水)便可稀释为1ug/ul 最后充分涡旋,使沉淀完全溶解。 -20度保存,使用时,应稀释10倍。