导航:首页 > 纯水知识 > 提dna一定要超纯水吗

提dna一定要超纯水吗

发布时间:2022-12-21 16:54:27

❶ 有哪位高人可以指导一下,在提DNA实验中,可否用超纯水替代注射用水

不能啊,那样人体遗传细胞会出现问题

❷ DNA可不可以溶于水啊

楼上错了,你做过实验吗.要看有机物是极性分子还是非极性分子.DNA是极性分子,水也是,DNA当然可以溶解在水里,不然怎么用于做实验.提取的DNA可以直接溶解在超纯水中,或者溶解在TE溶液中.溶解在水里是无色溶液.
反而,酒精是非极性分子,DNA不容于酒精,提取DNA的时候就是利用这个原理.

❸ 请教高手,我提的玉米叶片DNA降解很厉害,跑琼脂糖胶基本上没有主带,怎样才能提取高质量的DNA

是用SDS法提的吗?你首先确定SDS裂解液配的有没有问题,一般这个溶液配好了其它的溶液不会有大问题。DNA酶污染的情况并不常见,只要灭菌了不会有问题。DNA用百分之百乙醇析出的步骤容易造成机械损伤,加乙醇后要快点混匀。适当降低离心的转数,操作动作轻一点,防止机械断裂

补充:叶片取下来要零度保存,不要放太久,久了DNA也会降解,磨完样不要让干粉冻融,马上加SDS。操作时候温柔点,适当降低离心转数。吸上清的时候把枪头剪去一点。就这些办法了……多试试,应该没问题吧。玉米DNA,应该不是很难提,我提小麦水稻的DNA,基本上没遇到过问题

❹ 内生真菌DNA的提取方法

菌丝基因组 DNA的提取
取少量菌丝粉,采用 CTAB法提取 DNA,加适量灭菌超纯水 (含 20 pg·ml。RNase)溶解 DNA,37~C处理 l h后, 一20℃保存备用。

❺ 溶解DNA为什么用ddH2O而不是H2O

事实上来,你这个问题就有疑问。自可能你最后保存DNA的是ddH2O,但是最规范的操作是用TE缓冲液保存,里面的EDTA对DNA物理化学性质的稳定有很大的作用。退而求其次的方法是用ddH2O,里面还有杂质少,利于DNA物理化学性质的保存。溶解后建议放在-4℃及以下温度保存。
希望对你有帮助。

❻ 请问DNA提取过程中70%乙醇是如何配制的所用水是去离子水还是经过其他处置的水

就是体积比
70ml无水乙醇加30ml的去离子水 去离子水要灭过菌的

❼ 提取DNA时为什么要对耗材灭菌

灭菌的目的是为了防止菌体DNA的污染,当然也只是排除了耗材来源的外来菌种污染而已,空气中还有材料本身所带的菌种是无法去除的,那么问题的关键就在于你拿到目的基因组的下游要进行什么操作了,如果污染对下游没有影响,那么灭不灭菌都没关系了,通常情况下,下游应该是扩增,扩增的特异引物在亲缘关系较远的物种间是不能通用的,也就是说你在提取大豆基因组的时候只要不污染大豆近缘种的基因组,就不会对整个实验产生影响,我做这么多年实验,提过植物,动物,微生物的基因组,都没有进行过灭菌操作,至于水的问题,溶解DNA的水通常都是用ddh2o,现在的实验室所用的水通常都是从millipore纯水仪里接出来的,具体指标不清楚哦~普通的去离子水进行扩增和测序都是不好用的

❽ 怎么溶解DNA

如果是要马上做酶切或者连接,就用超纯水溶解,超纯水要提前灭菌,如果是要长期保存,就用TE溶解,TE会配吧?也要提前灭菌。

❾ dna的提取方法

一.DNA的提取方法简介
为了研究DNA分子在生命代谢中的作用,常常需要从不同的生物材料中提取DNA.由于DNA分子在生物体内的分布及含量不同,要选择适当的材料提取DNA。
动植物中,小牛胸腺۰动物肝脏۰鱼类精子,植物种子的胚中都含有丰富的DNA。
微生物中,谷氨酸菌体含7%~10%,面包酵母含4%,啤酒酵母含6%,大肠肝菌含9%~10%。

从各种材料中提取DNA方法不同,分离提取的难易程度也不同。
对于低等生物。如从病毒中提取DNA 比较容易,多数病毒DNA 分子量较小,提取时易保持其结构完整性。
从细菌及高等动植物中提取DNA难度大一些。细菌DNA 分子量较大,一般达2×10 道尔顿。因此易被机械张力剪断。细菌DNA,除核DNA 外,还有质粒DNA 等。

1、核酸的理化性质
RNA和核苷酸的纯品都呈白色粉末或结晶,DNA则为白色类似石棉样的纤维状物。除肌苷酸、鸟苷酸具有鲜味外,核酸和核苷酸大都呈酸味。
DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂,它们的钠盐比游离酸易溶于水,RNA钠盐在水中溶解度可达40g/L。DNA在水中为10g/L,呈黏性胶体溶液。在酸性溶液中,DNA、RNA易水解,在中性或弱碱性溶液中较稳定。

天然状态的DNA 是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于细胞核中。要从细胞中提取DNA 时,先把DNP抽提出来,再把P除去,再除去细胞中的糖,RNA 及无机离子等,从中分离DNA 。
DNP和RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响而不同。DNP在低浓度盐溶液中,几乎不溶解,如在0.14 mol/L的氯化钠溶解度最低,仅为在水中溶解度的1%,随着盐浓度的增加溶解度也增加,至1mol/L氯化钠中的溶解度很大,比纯水高2倍。
RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响较小,在0.14mol/L氯化钠中溶解度较大。因此,在提取时,常用此法分离这两种核蛋白。

2.细胞的破碎
细菌有坚硬的细胞壁,首先要破碎经胞。方
法有三种:①机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法;②化学试剂法:用SDS处理细胞; ③酶解法:加入溶菌酶或蜗牛酶,都可使细胞壁破碎。

由于高等动物DNA 主要存在于细胞核与线粒体中,所以提取时有两个困难(高等植物与此类似):
①破碎细胞难;从处死动物٠分离组织器宫到破碎细胞费时长。在此时期间DNA 可能会被DN ase降解,而动物组织:特别是肌肉组织很难破碎,即使是较易破碎的肝٠肾等组织也往往使用组织匀浆器,易造成DNA 断裂。
②分子量大,一般比细菌的大2—3个数量级,比病毒的大4—5个数量。对不同生物材料,要根据具体情况选择适当的分离提取方法。

3.DNA提取的几种方法
(1).浓盐法
利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.
也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.
两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.
以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.

(2).阴离子去污剂法:
用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.
(3).苯酚抽提法:
苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 .

( 4).水抽提法:
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

❿ 回收dna胶时若要稀释是用depc水稀释吗

DNA比较稳定,DEPC主要是处理RNase的,在有RNA样品时使用.
不太明白,如果是胶回收,一般都直接用试剂盒,里面带的buffer就可以用.
你说的应该是回收以后的稀释吧.主要看稀释后样品做什么用,一般用超纯水稀释就可以了.

阅读全文

与提dna一定要超纯水吗相关的资料

热点内容
换下来的过滤芯有什么用 浏览:988
污水站运行记录造假怎么处罚 浏览:114
酒精蒸馏实验室原理 浏览:993
洗手台水垢是红色的 浏览:48
大众换个滤芯多少钱 浏览:192
沁园净水器滤芯报警怎么回事 浏览:195
惠尔顿净水属于什么档次 浏览:16
雨水回用设备报价 浏览:112
柴油滤芯哪里最好 浏览:266
瓶胆内的水垢长什么样 浏览:97
朔州移动空气净化器机器人怎么样 浏览:188
饮水机烧不开是什么原因 浏览:48
酚醛树脂非晶 浏览:955
污水沟流水量表示方法 浏览:662
广西桶装纯净水哪个好 浏览:960
怎样去除风水轮里的水垢 浏览:354
马桶上水管过滤芯如何拆下 浏览:220
饮水机里的气体是什么 浏览:49
污水废气处理价格多少 浏览:998
混凝土为什么不用纯水泥 浏览:796