一抗用pbs稀释还是纯水

1. 用冷冻干燥技术保存的抗体，用的时候是什么溶解啊 是用PBS吗

溶解可以直接加入一定量的双蒸水，溶解到100ul.稀释的时候可以用PBS。因为抗体在冻干前里面含有一定量的盐。当然，也可以加入等量的甘油。以保证在－20度不冻上。

2. 请教western blot孵一抗

1.TBS和PBS的缓冲体系不同，TBS用Tris做缓冲，PBS用磷酸盐做缓冲。实际使用中差别不大。
Tween-20是一种去污剂，可以降低非特异结合带来的背景。你上面提到的TBS+0.1% Tween-20+5%脱脂奶粉，其中的TBS完全可以被PBS代替。脱脂奶粉也可以用BSA代替，不过脱脂奶粉要便宜许多。
不知道你说的“做了几次都没结果”是怎么样没结果，膜都是黑的，还是都是白的？这是两种完全不同的“没结果”。如果膜是黑的，说明背景太强，加入Tween可能会改善一些。如果膜是白的，那和PBS或者TBS关系不大，说明你实验中有些关键试剂或步骤有问题，比如抗体或者转膜过程，你需要一个一个去核实。

2. 网上TBS配方很多，自己搜一下吧，效果不会差太多。

3. 免疫组化一抗用什么稀释PBS可以吗

建议用血清稀释，最理想的方法是用二抗同种属的血清，如二抗是山羊的，用山羊血清，或者是用2%BSA，前提是一抗不是牛的。也就是说，一抗是羊的，小鼠的，兔子的，都可以用BSA。

4. 血清抗体干冻粉用何稀释啊（是去离子水，PBS,还是生理盐水啊 ）

你可以先加少量的水，比如100ul或者1ml的水溶解。溶解完后，稀释可以用PBS或者专门的抗体稀释液。

5. western 一抗用什么稀释比较好

可以用加了脱脂奶粉的封闭液，也可以用TBST液。如果显色用的是红外荧光二抗，则只能用TBS液稀释。

6. WB一抗用什么稀释

建议起始浓度1:200开始（当然你也可以1:100，如果你的背景不高的话），倍比稀释，不是再做1:100-1:1000稀释，注意了。其实没有必要分装，一般都会添加保护剂的。如果你一定要分装，建议原液分装或是10稀释后分装。

溶液的浓度取决于溶解在溶剂内的物质的多少。溶解度则是溶剂在特定温度下，可以溶解最多多少物质。 有机溶剂主要用于干洗（例如四氯乙烯）。

作涂料稀释剂（例如甲苯、香蕉水、松香水、松节油），作洗甲水或去除胶水（例如丙酮，醋酸甲酯，醋酸乙酯），除锈（例如己烷），作洗洁精（柠檬精），用于香水（酒精）跟用于化学合成。

溶剂：

溶剂是一种可以溶解固体，液体或气体溶质的液体，继而成为溶液。在日常生活中最普遍的溶剂是水。而所谓有机溶剂即是包含碳原子的有机化合物溶剂。溶剂通常拥有比较低的沸点和容易挥发。或是可以由蒸馏来去除，从而留下被溶物。

因此，溶剂不可以对溶质产生化学反应。它们必须为低活性的。溶剂可从混合物萃取可溶化合物，最普遍的例子是以热水冲泡咖啡或茶。溶剂通常是透明，无色的液体，他们大多都有独特的气味。

溶质，溶液中被溶剂溶解的物质。溶质可以是固体（如溶于水中的糖）、液体（如溶于水中的酒精）、或气体（如溶于碳酸饮料中的二氧化碳）。其实在溶液中，溶质和溶剂只是一组相对的概念。一般来说，相对较多的那种物质称为溶剂，而相对较少的物质称为溶质。

7. 免疫荧光的一抗核二抗分别用什么稀释

PBS稀释。当然最好用封闭液直接稀释，再加一点TritonX100效果好。

培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了，用培养液没什么意义，只要保证其pH等条件适合就好了。

抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下，有很多protocol。一般一比几百到一万都有，依抗体而定。可以4度过夜，这样染色效果好。

二抗一般较便宜，一般1：50到1：200多。

(7)一抗用pbs稀释还是纯水扩展阅读：

注意事项：

为进一步提高信噪比，推荐配套使用QuickBlock™免疫染色封闭液(P0260)和QuickBlock™免 疫染色一抗稀释液(P0262)用于封闭及一抗的稀释。

为了能使稀释的二抗可以反复多次使用，二抗孵育结束后稀释的二抗应立即存放在4℃，以便于后续重复使用。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品， 不得存放于普通住宅内。

为了安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

8. 做免疫组化都需要哪些试剂

最重要的是选择好一抗、二抗或者还有三抗，注意抗体的特异性、效价和交叉反应，最好用单抗。
其他常用试剂有：
1、0.01M(pH7.4)的磷酸盐缓冲生理盐水（PBS），稀释抗体和洗片子用；
2、清洁液、纯水，洗玻片用
3、多聚赖氨酸处理载玻片，防止脱片
4、固定液：4%多聚甲醛或冷丙酮等；
5、15%~30%蔗糖，组织脱水用；
6、梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋，或者OCT包埋做冰冻切片；
7、抗原修复液：枸橼酸缓冲液（pH6.0）；
8、活化剂：EDTA或者Triton X-100；
9、1%~10%牛血清清蛋白（BSA）封闭液；
10、H2O2，灭活内源性过氧化物酶；
11、显色液：根据你做的酶来选择，如果是HRP就用DAB，如果是AKP，就用NBT/BCIP，免疫荧光则不需要；
12、50%缓冲甘油封片液。

9. 能用PBS代替抗体稀释液吗

抗体说明书里面应该有该抗体冻干制备之前，是用什么稀释的
如果是用PBS稀释的，则可以用PBS稀释
若是用生理盐水稀释的，则用生理盐水稀释

而且稀释后的用处也决定了是否能用PBS代替抗体稀释液
如果是用来做普通石蜡切片或者冰冻切片的免疫组化的话，可以用PBS代替抗体稀释液

10. ELISA间接法中一抗二抗的稀释用PBST或PBSM（包被液）有没有什么差异

一般直接用PBS或者PBST就可以了，PBSM应该是封闭液吧，理论上也可以。但有没有差别，不好说，只有自己试过才知道，因为牛奶成份复杂，一般的指标是没有影响的，但不能保证所有指标都适用。
商品化的ELISA抗体稀释液应该还含有一些稳定剂。但如果不存放，现配现用，与PBS或者PBST应该是没有差别的。